سرویس کشف آنتی‌بادی VHH لاما

آلفا لایف تک می‌تواند ارائه دهد

شرکت آلفا لایف‌تک سال‌هاست که به ساخت کتابخانه‌های نانوبادی و خدمات غربالگری کتابخانه فاژ برای کتابخانه‌های نانوبادی اختصاص داده شده است. بر اساس پلتفرم خدمات توسعه آنتی‌بادی بالغ ما، سالانه صدها سرویس ساخت کتابخانه نانوبادی لاما با موفقیت ارائه می‌شود. آلفا لایف‌تک یک پلتفرم خدمات فناوری نمایش نانوبادی جامع و بالغ ایجاد کرده است. بر اساس فناوری نمایش فاژ، ما می‌توانیم مراحل اصلی آزمایش از جمله طراحی آنتی‌ژن، ساخت کتابخانه نانوبادی و غربالگری کتابخانه فاژ و تأیید عملکرد فعالیت را ارائه دهیم و خدمات کشف نانوبادی با اختصاصیت و میل ترکیبی بالا را به مشتریان ارائه دهیم.
ما تجزیه و تحلیل جامعی از اطلاعات توالی نانوبادی انجام خواهیم داد و آن را از طریق آزمایش‌های مختلف، مانند تعیین EC50، تجزیه و تحلیل میل ترکیبی، تأیید فلوسایتومتری و غیره، تأیید خواهیم کرد. ما پلتفرم‌های ساخت کتابخانه آنتی‌بادی فاژ متعددی از جمله فاژهای M13، T4، T7 و λ داریم که می‌توانند نیازهای مختلف مشتریان را برآورده کرده و خدمات ساخت کتابخانه نانوبادی شخصی‌سازی شده را ارائه دهند. آلفا لایف‌تک در ساخت انواع مختلف کتابخانه‌های نمایش فاژ، مانند کتابخانه‌های ایمنی، کتابخانه‌های بومی، کتابخانه‌های نیمه مصنوعی، کتابخانه‌های مصنوعی و غیره تخصص دارد. کتابخانه نانوبادی که ما ساخته‌ایم ظرفیت زیادی دارد و می‌تواند نانوبادی‌های با میل ترکیبی بالا تولید کند. ما می‌توانیم ناقل‌های باکتریوفاژ مختلفی از جمله pMECS، pComb3X و pCANTAB 5E را در اختیار مشتریان قرار دهیم. ما سویه‌هایی مانند TG1 Escherichia coli، XL1 Blue و ER2738 داریم که پس از کشت گسترده می‌توانند برای عفونت فاژ استفاده شوند. کتابخانه آنتی‌بادی که ما ساخته‌ایم ظرفیت بالایی تا 10^9 دارد و نرخ ورود قطعات هدف در آن بالا است که برای غربالگری نانوبادی‌هایی که رضایت مشتریان را جلب می‌کنند، مفید است. ما همچنین می‌توانیم نانوبادی‌های انتخاب‌شده را مطابق با نیاز مشتری بیان و خالص‌سازی کنیم. علاوه بر سیستم‌های بیان پروکاریوتی، ما سیستم‌های بیان یوکاریوتی مختلفی برای پروتئین‌های آنتی‌بادی، مانند سلول‌های پستانداران، سلول‌های مخمر، سیستم‌های بیان سلول‌های گیاهی و حشرات و غیره نیز داریم که می‌توانند نانوبادی‌های با کیفیت بالا را برای مشتریان تولید کنند.

معرفی سرویس کشف آنتی‌بادی VHH لاما

در سال ۱۹۹۳، یک آنتی‌بادی طبیعی فاقد زنجیره سبک (VL) در سرم شترها کشف شد. ساختار آن ساده است و فقط از دو زنجیره سنگین (VH) تشکیل شده است و حجم آن بسیار کم، حدود ۱۵ کیلو دالتون، است، از این رو نانوبادی (VHH) نامیده می‌شود. بعدها، این آنتی‌بادی در حیواناتی مانند آلپاکا و کوسه نیز یافت شد. نانوبادی‌ها فقط شامل یک ناحیه متغیر زنجیره سنگین و دو ناحیه CH2 و CH3 معمولی هستند. اگرچه آنها دامنه VL ندارند، اما همچنان می‌توانند به آنتی‌ژن‌ها متصل شوند و آنتی‌بادی‌های تک دامنه بسیار پایداری هستند. آنها همچنین کوچکترین واحد اتصال شناخته شده با فعالیت آنتی‌بادی هستند. هم نانوبادی‌ها و هم آنتی‌بادی‌های سنتی از چهار ناحیه چارچوبی (FRs) نسبتاً حفاظت شده و سه ناحیه تعیین‌کننده مکمل (CDRs) تشکیل شده‌اند. با این حال، در مقایسه با آنتی‌بادی‌های سنتی، CDR3 نانوبادی‌ها دارای یک ناحیه ساختاری دایره‌ای است که از ناحیه متغیر معمولی طولانی‌تر است و عملکرد اتصال بهتری دارد. علاوه بر این، نانوبادی‌ها ویژگی ایمنی‌زایی ضعیفی دارند. انسانی‌سازی آنتی‌بادی‌ها می‌تواند ایمنی‌زایی آنتی‌بادی‌های نوترکیب را بیشتر کاهش دهد و در نتیجه تأثیر آن بر اثربخشی درمان دارویی را کاهش دهد.

فرآیند خدمات کشف آنتی‌بادی VHH لاما

در ابتدا، ایمن‌سازی حیوانات باید با انتخاب گونه‌های مناسب شتر مانند شتر و آلپاکا برای ایمن‌سازی انجام شود. آنتی‌ژن‌های مربوطه برای تحریک حیوانات جهت ایجاد پاسخ‌های ایمنی علیه آنتی‌ژن‌های خاص استفاده می‌شوند و در نتیجه سلول‌های B اختصاصی آنتی‌ژن تولید می‌شوند. پس از مدت زمان مشخصی، سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی (PBMCs) از خون محیطی حیوانات ایمن‌شده جدا می‌شوند. RNA کل در PBMCها استخراج می‌شود و باید در طول فرآیند استخراج به یکپارچگی و خلوص RNA توجه شود. RNA استخراج‌شده به عنوان الگو استفاده می‌شود و به صورت معکوس به cDNA رونویسی می‌شود. پس از آن، cDNA به عنوان الگو استفاده می‌شود و ژن VHH توسط PCR تکثیر می‌شود. به طور کلی، دو دور تکثیر PCR برای بهبود اختصاصیت و بازده آنتی‌بادی‌ها انجام می‌شود. قطعه ژن VHH تکثیر شده در یک وکتور نمایش فاژ کلون شد و یک کتابخانه آنتی‌بادی نمایش فاژ ساخته شد. کتابخانه نمایش فاژ ساخته شده به سلول‌های میزبان مانند اشریشیا کلی، مخمر یا سلول‌های پستانداران تبدیل می‌شود و به ژن VHH اجازه می‌دهد تا در سلول‌های میزبان بیان شود و با پروتئین‌های سطحی فاژ ترکیب شود. روش‌های القایی مناسب، بیان پروتئین‌های ترکیبی را در سلول‌های میزبان تحریک کرده و VHH را روی سطح باکتریوفاژها نمایش می‌دهند. با استفاده از یک پلتفرم نمایش فاژ، کلون‌های مثبت VHH با میل ترکیبی بالا برای پروتئین‌های هدف خاص از طریق چندین دور غربالگری و غنی‌سازی از کتابخانه انتخاب شدند. در نهایت، آنالیز توالی‌یابی روی کلون‌های مثبت VHH غربالگری شده انجام شد تا اطلاعات توالی ژنی آنها به دست آید.