پلتفرم کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ
بر اساس فناوری نمایش فاژ، آلفا لایفتک میتواند خدمات ساخت و غربالگری کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ با کیفیت بالا، از جمله کتابخانههای پپتیدی خطی ۷، کتابخانههای پپتیدی خطی ۹، کتابخانههای پپتیدی خطی ۱۰، کتابخانههای پپتیدی خطی ۱۵، کتابخانههای پپتیدی خطی ۱۲، کتابخانههای پپتیدی حلقوی ۷ و سایر کتابخانههای پپتیدی را در اختیار مشتریان قرار دهد. تنوع کتابخانه، نرخ درج و نرخ مثبت میتواند به بیش از ۹۰٪ برسد تا نیازهای مختلف مشتریان مختلف به کتابخانههای پپتیدی نمایش فاژ را برآورده کند.
کتابخانههای نمایش فاژ به طور گسترده در تحقیقات و کاربردهای زیستپزشکی مورد استفاده قرار میگیرند. به عنوان مثال، در مهندسی آنتیبادی و توسعه آنتیبادی، میتوان از کتابخانههای نمایش فاژ برای غربالگری و بهبود انواع آنتیبادی استفاده کرد. در غربالگری دارو و کشف هدف دارویی، میتوان از کتابخانههای نمایش فاژ برای جستجوی پروتئینها یا پپتیدهایی با پتانسیل دارویی استفاده کرد. در تحقیقات واکسن، میتوان از کتابخانه نمایش فاژ برای انتخاب آنتیژن واکسن و توسعه واکسن استفاده کرد. علاوه بر این، میتوان از کتابخانههای نمایش فاژ در بسیاری از زمینهها مانند تحقیقات برهمکنش پروتئین، تشخیص و درمان سرطان نیز استفاده کرد.
فناوری نمایش فاژ
فناوری نمایش فاژ، فناوریای است که ژن پروتئین هدف را با ژن پروتئین سطح فاژ ترکیب میکند و پروتئین هدف را از طریق بیان ژن، به شکل پروتئین ترکیبی روی سطح فاژ نشان میدهد. این پروتئینهای نمایش داده شده روی سطح فاژ میتوانند ساختار فضایی نسبی و فعالیت بیولوژیکی خود را حفظ کنند و میتوانند با تعامل با آنتیبادیهای خاص یا سایر مولکولها، غربالگری، شناسایی و تشخیص داده شوند. اشیاء نمایش داده شده در فناوری نمایش فاژ شامل آنتیبادی، قطعه آنتیبادی، قطعه پپتیدی، cDNA و غیره هستند.
سیستم فناوری نمایش فاژ عمدتاً شامل سیستم نمایش فاژ M13 (مانند سیستم نمایش PⅢ، سیستم نمایش PⅧ و غیره)، سیستم نمایش فاژ λ، سیستم نمایش فاژ T4، سیستم نمایش فاژ T7 و غیره است. هر یک از این سیستمها ویژگیهای خاص خود را دارند و برای نیازهای تحقیقاتی مختلف مناسب هستند. فاژ M13، به دلیل خواص لیزوژنیک خود، پس از آلوده کردن سلول میزبان، آن را لیز نمیکند، که به آن اجازه میدهد تا به طور مداوم قطعات خارجی را در سلول میزبان تکثیر و بیان کند، که برای غربالگری طولانی مدت و بیان پایدار مناسب است. به دلیل چرخه عمر کوتاه و راندمان تکثیر بالا، فاژ T7 میتواند به سرعت تعداد زیادی فاژ حاصل تولید کند که برای غربالگری با توان عملیاتی بالا و بیان سریع مناسب است.
| فاژ M13 | فاژ T7 | |
|---|---|---|
| ۱. ساختار مورفولوژیکی | فاژ رشتهای | فاژ چندوجهی |
| ۲. ماده ژنتیکی | مولکول DNA تک رشتهای حلقوی | DNA خطی، دو رشتهای و در نهایت زائد |
| ۳. تکثیر و عفونت | فاژهای لیزوژنیک که در پریپلاسم جمع میشوند، میتوانند بدون لیز کردن سلولهای میزبان، از غشاهای باکتریایی ترشح شوند. | فاژهای بیماریزا، که زادهی فاژهای تجمعیافته در سیتوپلاسم باکتری هستند، توسط لیز غشای سلولی آزاد میشوند. |
| ۴. سیستم نمایش | یک سیستم نمایش با استفاده از پروتئینهای کپسید pIII و PVIII ساخته شد که برای نمایش پپتیدها/پروتئینهای خارجی با اندازههای مختلف مناسب است. | سیستم نمایش با پروتئین کپسید 10B ساخته شده است که نیازی به فرآیند ترشح ندارد و برای نمایش پپتیدها/پروتئینهایی که اثر مهاری بر فرآیند ترشح دارند، مناسب است. |
| 5. مزیت کاربرد | برای نمایش و غربالگری طولانی مدت پپتیدهای مولکول کوچک مناسب است. | این روش مزایایی در بیان سریع و غربالگری با توان عملیاتی بالا برای پروتئینهای ماکرومولکولی دارد. |
انواع کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ
شرکت آلفا لایفتک در ساخت و غربالگری کتابخانههای پپتیدی نمایش فاژ تجربه دارد و انواع مختلفی از کتابخانههای پپتیدی را برای انتخاب ارائه میدهد. بر اساس طول پپتید، میتوان آن را به ۷ کتابخانه پپتیدی، ۹ کتابخانه پپتیدی، ۱۰ کتابخانه پپتیدی، ۱۲ کتابخانه پپتیدی و ۱۵ کتابخانه پپتیدی تقسیم کرد. بر اساس ساختار فضایی پلیپپتیدها، میتوان آن را به کتابخانه پپتید فاژ خطی و کتابخانه پپتید فاژ حلقوی تقسیم کرد.
کتابخانه پپتید فاژ خطی
ژن پپتید به ناحیه کدکننده پروتئین پوششی ژنوم فاژ، معمولاً pIII یا PVIII، وارد میشود و به صورت یک زنجیره مستقیم خطی نمایش داده میشود. پپتیدهای زنجیره خطی خطی ممکن است به راحتی در داخل بدن تجزیه شوند و توانایی اتصال و پایداری آنها ممکن است تحت تأثیر قرار گیرد.
کتابخانه پپتید فاژ حلقوی
پپتید حلقهای اصلاحشده تحت تأثیر پیوندهای دیسولفیدی یا سایر پیوندهای اتصال، یک ترکیب ثابت تشکیل میدهد که نهتنها پایداری متابولیک و فراهمی زیستی را تا حد زیادی بهبود میبخشد، بلکه الزامات اتصال ترکیب گیرنده-لیگاند (آنتیبادی-آنتیژن) را نیز بهتر برآورده میکند.
فرآیند نمایش فاژ در کتابخانه پپتیدی
انتخاب فاژها
فاژهای نوع M13 یا فاژهای نوع T7 معمولاً به عنوان حامل انتخاب میشوند.
ساخت کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ
ساخت یک وکتور فاژ که قادر به داشتن توالی کدکننده پروتئین یا پلیپپتید خارجی باشد، که معمولاً شامل یک پروموتر، نشانگرهای انتخابی و عناصر تنظیمی مناسب است. درج توالی کدکننده یک پروتئین یا پپتید خارجی در یک حامل فاژ، معمولاً با روشهای برش و اتصال آنزیم محدودکننده. وکتور فاژ ساخته شده به سلول میزبان تبدیل میشود و به فاژ اجازه میدهد پروتئینها یا پپتیدهای خارجی را در داخل سلول تکثیر و بیان کند. کتابخانههای فاژ حاوی چندین پروتئین یا پپتید خارجی مختلف از طریق تبدیل و تکثیر گسترده تهیه میشوند.
غربالگری کتابخانه پپتیدی با نمایش فاژ
مولکولهای هدف (مانند پروتئینها، گیرندهها یا آنتیبادیها) را روی یک حامل فاز جامد ثابت کنید. کتابخانه پپتید نمایش فاژ ساخته شده را با یک هدف ثابت انکوبه کنید تا پپتیدهای روی فاژ به مولکول هدف متصل شوند. در طی این فرآیند، باکتریوفاژهای متصل نشده با شستشو حذف میشوند و در عین حال باکتریوفاژهایی که به هدف متصل میشوند، حفظ میشوند و باکتریوفاژهای متصل با میل ترکیبی بالا شسته میشوند. باکتریوفاژهای بازیابی شده با آلوده کردن اشریشیا کلی تکثیر میشوند و سپس تحت دور بعدی غربالگری قرار میگیرند. معمولاً 3 تا 5 دور غربالگری برای به دست آوردن پپتیدهایی با راندمان اتصال بالا لازم است.
طراحی و سنتز پپتید
سنتز پپتیدها بر اساس جایگاههای غربالگری.

شکل 1. فرآیند ساخت و غربالگری کتابخانه پپتید نمایش فاژ

پلتفرم ساخت کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ
شرکت آلفا لایفتک دارای تعدادی فناوری ساخت کتابخانه پپتیدی است. ما عمدتاً خدمات ساخت کتابخانه پپتیدی T7 و خدمات ساخت کتابخانه پپتیدی M13 را بر اساس انواع فاژ ارائه میدهیم.
ادامه مطلب
پلتفرم غربالگری کتابخانه پپتیدی نمایش فاژ
آلفا لایفتک تجربه غنی در غربالگری کتابخانه فاژ پپتیدی دارد و پشتیبانی فنی قوی برای کشف داروهای مولکول کوچک، تشخیص بالینی، درمان بیماری و تحقیقات بیولوژیکی ارائه میدهد.
ادامه مطلب اگر سوالی دارید، لطفا در هر زمانی با ما تماس بگیرید.
Leave Your Message
0102



2018-07-16 

