سرویس کشف آنتی‌بادی scFv

شرکت آلفا لایف‌تکمفتخر است که خدمات جامع ساخت کتابخانه scFv را برای برآوردن نیازهای متنوع دانشمندان جهان ارائه دهد. هدف ما درک و برآورده کردن خواسته‌های مشتریان مختلف و کمک به هرگونه مشکل پیش رو و نوظهور در کارهای تحقیقاتی است.

آنتی‌بادی قطعه متغیر تک زنجیره‌ای scFv چیست؟

یک آنتی‌بادی تک‌زنجیره‌ای از یک قطعه متغیر آنتی‌بادی سبک (VL) و سنگین (VH) تشکیل شده است که توسط یک پیوند دهنده پپتیدی انعطاف‌پذیر به هم متصل می‌شوند، که می‌تواند به راحتی به شکل عملکردی روی سطح فاژ بیان شود و بنابراین معمولاً به عنوان یک قطعه متغیر تک‌زنجیره‌ای (scFv) شناخته می‌شود. قطعه scFv کوچکترین واحد مولکول ایمونوگلوبولین (به جز نانوبادی‌ها) است که در فعالیت‌های اتصال آنتی‌ژن نقش دارد و به مهندسی پروتئین اجازه می‌دهد تا خواص scFv (متغیر قطعه تک‌زنجیره‌ای) مانند افزایش میل ترکیبی و تغییر ویژگی را بهبود بخشد. در Alpha Lifetech Inc.، آنتی‌بادی‌های scFv عمدتاً از هیبریدوما، سلول‌های طحال موش‌های ایمن‌شده و لنفوسیت‌های B انسان ساخته شده‌اند. RNA یا mRNA کل ابتدا از هیبریدوما، طحال، سلول‌های لنفاوی و سلول‌های مغز استخوان جدا شده و سپس به صورت معکوس به cDNA رونویسی می‌شود تا به عنوان الگویی برای تکثیر ژن آنتی‌بادی (PCR) عمل کند.

توسعه آنتی‌بادی scFv-فناوری نمایش فاژ

تنوع یک کتابخانه با تعداد کلون‌های مستقل تعیین می‌شود. برای تولید یک کتابخانه آنتی‌بادی scFv با اندازه بزرگ، دانشمندان ما از استراتژی دو مرحله‌ای اختصاصی ما برای تولید کتابخانه استفاده خواهند کرد. در مرحله اول روش شرح داده شده، مخازن اولیه از محصولات PCR که دامنه‌های VH، Vκ و Vλ را کد می‌کنند، تهیه می‌شوند و کتابخانه‌های متوسط ​​​​معمولی (1 تا 100 میلیون کلون) را به دست می‌دهند. در مرحله دوم، قطعات VH (یا VL) با هضم DNA پلاسمید خالص شده از مخازن اولیه جدا شده و در ناقل فاژمید پذیرنده حاوی مخازن VL (یا VH) کلون می‌شوند. این نوآوری اندازه کتابخانه‌ها را به طرز چشمگیری افزایش می‌دهد (1010-1012 کلون).

غربالگری آنتی‌بادی scFv در مقیاس بزرگ و با بازدهی بالا

برای آماده‌سازی scFv در مقیاس بزرگ، بدیهی است که انتخاب میزبان بیان، تأثیر قابل توجهی بر طراحی فرآیند، استراتژی‌های پردازش پایین‌دستی و هزینه فرآیند خواهد داشت. انتخاب مسیر تولید به ارتباط اصلاحات پس از ترجمه و جدول زمانی برای توسعه بالینی و اقتصاد بستگی دارد که اساساً به «سیستم میزبان» نیز وابسته هستند. هیچ سیستم بیان جهانی وجود ندارد که سطوح بالای بیان محصول را برای طیف وسیعی از آنتی‌بادی‌های مختلف یا حتی پروتئین‌ها تضمین کند.