آنتی‌بادی مونوکلونال (mAb) به عنوان پیشگام داروهای آنتی‌بادی، بیش از ۱۰۰ آنتی‌بادی مونوکلونال برای درمان سرطان، بیماری‌های عفونی، بازار توسعه داروهای خود تأیید شده‌اند و ارزش درمانی منحصر به فرد خود را نشان می‌دهند. فناوری آنتی‌بادی تک سلولی B، به عنوان نسل جدیدی از فناوری توسعه آنتی‌بادی، می‌تواند آنتی‌بادی‌ها را به طور موثر و سریع از سلول‌های B تک سلولی جدا کند، که پس از هیبریدوما و نمایش فاژ، یک پیشرفت در فناوری تولید آنتی‌بادی است. فناوری مرتب‌سازی تک سلولی B می‌تواند برای تولید آنتی‌بادی علیه گونه‌های مختلف مانند خرگوش، موش، شتر، گوسفند و مرغ استفاده شود. فناوری تک سلولی B دارای مزایای برجسته‌ای مانند اختصاصیت بالا، فعالیت بالا و میل ترکیبی بالا است. بر اساس پلتفرم مرتب‌سازی تک سلولی B، Alpha Lifetech مزایایی در زمان غربالگری و به دست آوردن آنتی‌بادی‌های با کیفیت بالا دارد. این شرکت می‌تواند طراحی، سنتز و اصلاح آنتی‌ژن، ایمنی حیوانات، غربالگری غنی‌سازی تک سلولی B، توالی‌یابی تک سلولی، غربالگری با توان بالا، بیان و خالص‌سازی، خدمات فنی یک مرحله‌ای مانند تأیید عملکرد را برای برآوردن نیازهای متنوع مشتریان ارائه دهد.

آنتی‌ژن مناسب را برای حیوانات آزمایشگاهی (مانند موش، خرگوش و غیره) جهت تحریک سیستم ایمنی انتخاب کنید تا بتوانند آنتی‌بادی‌های اختصاصی علیه آنتی‌ژن تولید کنند.

ایمن‌سازی حیوانات مرحله اولیه تولید آنتی‌بادی است. ایمن‌سازی حیوانات استفاده از مکانیسم پاسخ ایمنی هومورال خود ارگانیسم است که از طریق تحریک مداوم آنتی‌ژن‌ها، حیوانات یک پاسخ ایمنی قوی ایجاد می‌کنند و سپس آنتی‌بادی‌های اختصاصی را علیه آنتی‌ژن‌های خاص ترشح می‌کنند.

سلول‌های B از خون محیطی، طحال یا غدد لنفاوی حیوانات ایمن جدا شدند. این سلول‌های B از نظر ایمونولوژیکی تحریک شده‌اند تا آنتی‌بادی‌هایی علیه آنتی‌ژن‌های خاص تولید کنند.

با روش‌های فیزیکی یا شیمیایی (مانند سانتریفیوژ گرادیان چگالی، جداسازی با مهره مغناطیسی و غیره) می‌توان سلول‌های B را غنی‌سازی کرد، سلول‌های ناخالص را حذف کرد، خلوص سلول‌های B و راندمان جداسازی بعدی را بهبود بخشید.

جداسازی سلولی فعال‌شده با فلورسانس (FACS)، جداسازی مغناطیسی سلولی (MACS)، جداسازی سلولی میکروفلوئیدیک (MCS) یا سایر تکنیک‌های غربالگری با توان عملیاتی بالا، همراه با برچسب‌گذاری اختصاصی آنتی‌ژن، می‌توانند برای غربالگری سلول‌های B منفرد از سلول‌های B غنی‌شده برای تولید آنتی‌بادی‌های هدفمند استفاده شوند.

وقتی یک سلول B منفرد از یک جمعیت سلول B مختلط جدا می‌شود، ژن‌های آنتی‌بادی آن باید با استفاده از فناوری توالی‌یابی تک سلولی توالی‌یابی شده و برای به دست آوردن اطلاعات توالی DNA مربوط به ناحیه متغیر زنجیره سنگین (VH) و ناحیه متغیر زنجیره سبک (VL) تجزیه و تحلیل شوند. فناوری توالی‌یابی تک سلولی عمدتاً شامل سه مرحله است: جداسازی تک سلولی، تکثیر اسید نوکلئیک درون سلولی و تجزیه و تحلیل توالی. اصل توالی‌یابی تک سلولی، تکثیر DNA یا RNA کل ژنوم سلول‌های منفرد جدا شده برای به دست آوردن یک ژنوم یا رونوشت کامل با پوشش بالا برای توالی‌یابی با توان عملیاتی بالا است.

از طریق غربالگری با توان عملیاتی بالا، توالی ژن آنتی‌بادی هزاران سلول B را می‌توان همزمان به دست آورد که سرعت کشف آنتی‌بادی را تا حد زیادی افزایش می‌دهد. این اطلاعات توالی می‌توانند بیشتر برای ساخت کتابخانه آنتی‌بادی و غربالگری استفاده شوند.

شکل 2 نمودار شماتیک از به دام انداختن تک سلول B، ساخت کتابخانه، غربالگری با توان عملیاتی بالا و تعیین توالی.(منبع مرجع: توالی‌یابی موازی و بسیار دقیق گیرنده‌های سلول B تک سلولی، کشف سریع آنتی‌بادی‌های متنوع واکنش‌دهنده به آنتی‌ژن را امکان‌پذیر می‌کند..）

(1) پروتئین نوترکیب: ≥2.5 میلی‌گرم، خلوص پروتئین >85٪، وزن مولکولی پروتئین بیشتر از 10 کیلو دالتون، غلظت پروتئین محلول بین 0.5 تا 5 میلی‌گرم در میلی‌لیتر. در صورت نیاز به خالص‌سازی با میل ترکیبی آنتی‌ژن، 10 میلی‌گرم پروتئین نوترکیب اضافی مورد نیاز است.

(2) پلی‌پپتیدها و مولکول‌های کوچک: پپتید خالص ≥10 میلی‌گرم، خلوص پپتید >90٪، حداقل 10 AA، اتصال KLH/BSA/OVA یا سایر پروتئین‌های حامل؛ مولکول‌های کوچک نیاز به ارزیابی ساختاری از قبل دارند.