خدمات ساخت ردههای سلولی پایدار
شرکت آلفا لایفتک (Alpha Lifetech) یک پلتفرم سلولی آلوده به لنتیویروس دارد که میتواند فرآیند آزمایش را برای انواع مختلف سویههای ترانسموتاسیون پایدار سلولی سفارشیسازی کند.
تماس با ما01
خدمات ساخت ردههای سلولی پایدار
شرکت آلفا لایفتک سالهاست که عمیقاً در زمینه توسعه فرآیند ساخت ردههای سلولی پایدار فعالیت دارد. این شرکت یک پلتفرم فرآیند ساخت ردههای سلولی پایدار بینقص با بیش از ۳۰۰ نوع سلول توموری و سلولهای اولیه ساخته است که میتواند ردههای سلولی پایدار را ارائه دهد و در عین حال در زمان تحقیقات علمی یا تحقیقات پروژه صرفهجویی کند و تولید بعدی را تسهیل نماید. آلفا لایفتک همچنین میتواند خدماتی مانند توسعه فرآیند سویه، غربالگری سویه، ساخت سویه، پروتئین نوترکیب و تولید آنتیبادی را به مشتریان ارائه دهد و زمینه تحقیقاتی برای داروهای جدید را فراهم کند.
شرکت آلفا لایفتک (Alpha Lifetech) دارای یک پلتفرم سلولی آلوده به لنتی ویروس است که میتواند فرآیند آزمایش را برای انواع مختلف سویههای ترانسموتاسیون پایدار سلولی سفارشیسازی کند. ما از فناوری حذف ژن (gene knockout) برای ساخت ردههای سلولی حذفشده CRISPR/Cas9 استفاده کردیم. از تکنیکهای بیان بیش از حد ژن و خاموش کردن ژن برای تثبیت سویههای ترانسموتاسیون استفاده شد. ادغام اختصاصی جایگاه ژن، خدمات ساخت رده سلولی ادغام رأسی را تکمیل میکند.
مقدمهای بر ساخت ردههای سلولی پایدار
یک رده سلولی پایدار به رده سلولی اطلاق میشود که ژنهای خارجی را در ژنوم سلول میزبان ادغام میکند تا ژنهای خارجی بتوانند برای مدت طولانی به طور پایدار در سلول میزبان بیان شوند. اصل این است که ژن خارجی را به یک وکتور با مقاومت خاص تبدیل کنیم، سلولهای میزبان را ترانسفکت کنیم، ژن خارجی را در کروموزوم میزبان ادغام کنیم و ژنهای مقاومت موجود در وکتور را غربالگری کنیم تا ردههای سلولی پایدار با بیان بالای پروتئین هدف یا خاموشی پایدار ژن هدف که الزامات آزمایش را برآورده میکنند، به دست آوریم.
آلفا لایفتک دارای یک کارگاه ذخیرهسازی مستقل، سیستم مدیریت انجماد و ذخیرهسازی سلولی بینظیر و بیش از ۳۰۰ نوع سلول توموری و سلولهای اولیه برای انتخاب شما است که به تحقیقات علمی شما اختصاص داده شده است.
فرآیند ساخت رده سلولی پایدار
روش ساخت رده سلولی پایدار
روشهای ساخت رده سلولی پایدار شامل روشهای مبتنی بر لنتی ویروس، مبتنی بر ترانسپوزون، مبتنی بر CRISPR/Cas9 و غربالگری پلاسمید است.
تکثیر با واسطه لنتی ویروس یکی از رایجترین روشهای مورد استفاده برای ساخت ردههای سلولی پایدار است. این رویکرد مزیت آلوده کردن تقریباً همه انواع سلولها و ادغام مواد ژنتیکی در ژنوم سلول میزبان برای بیان پایدار در یک دوره طولانی را دارد. با این حال، این سیستم محدودیتهای خاصی دارد و لنتی ویروس ظرفیت بستهبندی محدودی دارد، بنابراین برای رونویسی ژنهایی با نواحی رونویسی طولانی مناسب نیست.
در مقایسه با روش لنتیویروسی، روش ترانسپوزونی هیچ محدودیتی در اندازه ژن ندارد و با بهینهسازی مداوم فناوری، کارایی درج ترانسپوزون چندین بار بهبود یافته است. عیب این روش این است که محدودیتهای خاصی روی سلولهای اولیه وجود دارد و ترانسفکشن سلولها دشوار است.
CRISPR/Cas9 شامل حذف ژن crispr و حذف ژن crispr است. حذف ژن کریسپر به قطع دو رشته DNA اشاره دارد که منجر به از دست رفتن عملکرد ژن هدف میشود. حذف ژن کریسپر به قطعات DNA خارجی در ژنهای خاص اشاره دارد که میتوانند برای ترمیم ژنهای معیوب یا معرفی ژنهای عملکردی جدید استفاده شوند.
غربالگری پلاسمید ابتداییترین طرح ساخت رده سلولی است که تنها نیاز به انتقال موفقیتآمیز پلاسمید هدف به سلول و استفاده از مقاومت مربوطه در غربالگری طولانیمدت دارد. سپس احتمال مشخصی برای دستیابی به ردههای سلولی پایدار وجود دارد.
روشهای ساخت ردههای سلولی پایدار مختلف
| روش واسطهای | سیستم لنتی ویروس | سیستم ترانسپوزون | با واسطه CRISP/Cas9 | غربالگری پلاسمید |
|---|---|---|---|---|
| ظرفیت حامل | ۵ کیلوبایت | ۱۰ کیلوبایت | ۵ کیلوبایت | ۱۰ کیلوبایت |
| کارایی واسطهای | بالا | عادی | عادی | کم |
| گاهشمار | ۱-۲ هفته | ۳-۴ هفته | ۳-۴ هفته | ۴-۶ هفته |
| مزیت | سریع و کارآمد | امنیت و ثبات | ادغام نقطه ثابت | هزینه کمتر |
| کاستی | خطر ایمنی زیستی | فراوانی بیان عادی | انتقال CAS9 دشوار و پرهزینه است | راندمان پایین و ناپایداری |
مشکلات فنی در ساخت ردههای سلولی پایدار
قبل از افزایش مقیاس فرآیند، از یک بیوراکتور کوچک برای تعیین پارامترهایی مانند گاز، سیستم سیال کشت، حداقل تنش هیدرودینامیکی اعمال شده به سلولها و غیره استفاده میشود تا کشت در مقیاس متقاطع تضمین شود. با این حال، حتی اگر پارامترهای فرآیند مربوطه تعیین شوند، محیط بیوراکتورهای بزرگ در تولیدکننده ناهموار خواهد بود و به راحتی ممکن است شکست بخورد. آلفا لایفتک سالها تجربه در کشت در مقیاس فرآیند دارد که میتواند تا حدی از اشتباهات جلوگیری کند، خطرات را کاهش دهد و میزان موفقیت را تا حد زیادی بهبود بخشد. در عین حال، آلفا لایفتک ثبات مواد اولیه و دستههای محیط کشت مورد استفاده را تضمین میکند و میزان شکست در افزایش مقیاس فرآیند کشت سلولی را کاهش میدهد.
آلفا لایفتک دارای یک پلتفرم جامع توسعه فرآیند رده سلولی پایدار است تا پایداری ردههای سلولی را در طول تولید تضمین کند. ما همچنین میتوانیم خدمات سفارشیسازیشدهای را برای رفع نیازهای شما ارائه دهیم.
محتوای خدمات ساخت ردههای سلولی پایدار
| محتوا | گاهشمار |
| کشت رده سلولی HEK293 ارائه شده توسط مشتری. | ۳-۵ ماهها |
| ساخت پلاسمید sgRNA-Cas9 (همراه با ژن غربالگری G418). | |
| الگوی sgRNA-Cas9 و DNA ترمیمی به طور همزمان به رده سلولی HEK293 منتقل شدند. | |
| غربالگری رده سلولی مونوکلونال (ژن GFP) کلون مثبت (در حال ضربه زدن). | |
| تحویل: وکتور، سویه دارای ژن GFP، نتایج توالییابی، تمام دادههای خام، گزارش آزمایشگاه |
سلولها قابل ردیابی هستند
این سلولها از سازمانهای حرفهای مانند ATCC خریداری میشوند و میتوانند مدرکی برای برآورده کردن نیازهای ثبت نام شما ارائه دهند.
مزیت تولید
آلفا لایفتک سالها تجربه برای برآورده کردن نیازهای متنوع توسعه دارد؛ ما انواع سلولها، یک کارگاه ذخیرهسازی مستقل، انجماد کامل سلول و یک سیستم مدیریت ذخیرهسازی داریم.
کنترل کیفیت پروژه
هر پروژه تحت فرآیندهای کنترل کیفیت سختگیرانهای قرار میگیرد تا از تحویل ردههای سلولی مطابق با استانداردهای بالا به مشتریان اطمینان حاصل شود.
مزیت فنی
علاوه بر مهندسانی با تجربه گسترده در حوزه سلولی، ما الگوریتمهای تکاملی فناوری پیشرفتهای برای بهبود شرایط راکتور و اصلاح پارامترهای فرآیند داریم.
اگر سوالی دارید، لطفا در هر زمانی با ما تماس بگیرید.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102