مقدمه ای بر کتابخانه های آنتی بادی سنتز شده

کتابخانه آنتی بادی سنتز شده، همچنین به عنوان کتابخانه De novo شناخته می شود، یک روش مصنوعی است که از تکنیک هایی مانند سنتز DNA یا نمایش فاژ برای طراحی و سنتز مناطق متغیر آنتی بادی کامل، از جمله مناطق چارچوب و CDR ها، بدون تکیه بر کتابخانه های آنتی بادی ساده استفاده می کند.

کتابخانه آنتی بادی نیمه مصنوعی با ترکیب کتابخانه های آنتی بادی طبیعی با تنوع مصنوعی ایجاد می شود. معمولاً شامل سنتز الیگونوکلئوتیدهای DNA برای تولید مجموعه ای از مناطق تعیین کننده مکمل مختلف (CDRs) است که سپس با یک چارچوب آنتی بادی ثابت مشتق شده از منابع طبیعی مانند سلول های B انسان یا حیوان ترکیب می شوند. CDR سنتز شده تنوع را به کتابخانه وارد می کند و در نتیجه آنتی بادی ها طیف وسیعی از اپی توپ ها را هدف قرار می دهند. کتابخانه آنتی بادی نیمه مصنوعی مصالحه ای بین تنوع طبیعی سیستم ایمنی و تنوع کنترل شده به دست آمده از طریق روش های مصنوعی فراهم می کند.

تمایز بین کتابخانه های آنتی بادی ساده و مصنوعی به منبع ژن های ایمونوگلوبولین بستگی دارد. در همین حال، تفاوت بین یک کتابخانه آنتی بادی نیمه سنتز و سنتز شده در این است که اولی شامل بخشی از بخش های آنتی بادی ساده مانند زنجیره سبک یا زنجیره سنگین است و تنها یکی از آنها در شرایط آزمایشگاهی سنتز می شود. در حالی که نمونه سنتز شده کاملاً از یک سنتز مصنوعی توسط PCR در شرایط آزمایشگاهی مشتق شده است.

Alpha Lifetech می تواند ارائه دهد

شرکت آلفا لایف تکمی تواند یک کتابخانه آنتی بادی نیمه سنتز شده/سنتز شده از حیوانات و انسان ها را بر اساس پلت فرم کشف آنتی بادی حرفه ای ما ارائه دهد. با سالها تجربه در اصلاح ژنتیکی و ساخت کتابخانه، می توان کتابخانه های سنتز شده ای ساخت که قادر به تولید آنتی بادی های مصنوعی با تمایل و ویژگی فراتر از ظرفیت آنتی بادی های طبیعی هستند.آلفا لایف تککارشناسان با افتخار اعلام می کنند که می توانیم نرخ موفقیت بالایی را در ساخت کتابخانه آنتی بادی حاوی 10^8 تا 10^10 کلون مستقل تضمین کنیم.

شرکت آلفا لایف تکمفتخر است که خدمات جامع ساخت کتابخانه آنتی بادی را برای پاسخگویی به نیازهای مختلف محققان جهانی از جمله scFv، Fab، آنتی بادی VHH و کتابخانه های سفارشی ارائه می دهد. هدف ما درک و برآورده کردن خواسته های مشتریان مختلف و کمک به مشکلات آینده و ظهور در کار تحقیقاتی است.

فرآیند خدمات ساخت کتابخانه های آنتی بادی سنتز شده

طراحی
مرحله طراحی شامل انتخاب چارچوب های آنتی بادی و مناطق تعیین کننده مکمل (CDRs) بر اساس توالی های آنتی بادی موجود یا داده های ساختاری است. آنتی بادی های مصنوعی CDR همچنین می توانند برای معرفی ویژگی های خاص یا افزایش خواص اتصال طراحی شوند.

سنتز
DNA مصنوعی کد کننده توالی های آنتی بادی طراحی شده، شامل هر دو ناحیه چارچوب و CDR ها، با استفاده از روش های شیمیایی یا آنزیمی سنتز می شود.

مونتاژ
قطعات DNA سنتز شده با استفاده از تکنیک هایی مانند PCR، بستن یا مونتاژ گیبسون در ناقل های بیان آنتی بادی مونتاژ می شوند. سپس این ناقل ها می توانند به سیستم های بیانی مانند سلول های باکتریایی، مخمری یا پستانداران برای تولید آنتی بادی وارد شوند.

غربالگری و انتخاب
کتابخانه‌های آنتی‌بادی ساخته‌شده با استفاده از روش‌های غربالگری با کارایی بالا، برای آنتی‌بادی‌هایی با ویژگی‌های مورد نظر غربالگری و انتخاب می‌شوند. این ممکن است شامل تکنیک هایی مانند نمایش فاژ، نمایش مخمر یا نمایش ریبوزوم، بسته به فرمت کتابخانه و کاربرد باشد.

خدمات ساخت کتابخانه های آنتی بادی سنتز شده

شرکت آلفا لایف تکبا استفاده از سیستم نوترکیبی اختصاصی سایت Cre-lox برای ایجاد مجموعه ای از Fabs نمایش داده شده بر روی فاژ شامل کلون های 6.5×10^10، یک طراحی یک مرحله ای و خدمات سنتز شده از کتابخانه های آنتی بادی را با بستن رپرتوارهای ژن V زنجیره سنگین و سبک در یک ناقل فاژ به مشتریان ارائه می دهد. این کتابخانه، Abs را در برابر آنتی ژن های متعدد، که برخی از آن ها شباهت های نانومولری داشتند، نشان داد. تولید کتابخانه آنتی بادی انسانی بر اساس فناوری نمایش فاژ M13 (نشان داده شده در شکل زیر) است.