Hybridoma-teknologia-alusta

Alpha Lifetechillä on runsaasti kokemusta vasta-aineiden kehittämisestä. Vuosien varrella Alpha Lifetech on perustanut kattavan vasta-aineiden kehitysalustan (mukaan lukien monoklonaalisten vasta-aineiden kehitys, polyklonaalisten vasta-aineiden kehitys, rekombinanttien monoklonaalisten vasta-aineiden kehitys ja muut vasta-aineiden valmistus- ja kehityspalvelut).

Alpha Lifetech tarjoaa asiakkaille laadukkaita vasta-aine- ja rekombinanttivasta-ainetuotteita ja -palveluita, ja valmistetuilla vasta-aineilla on vahva spesifisyys ja hyvä stabiilius. Useita vasta-aineiden puhdistuslaitteita ja -instrumentteja voidaan käyttää tarjoamaan vasta-aineiden puhdistuspalveluita eri lähteistä, kuten kanista, lampaasta, kanasta ja hiiren monoklonaalisista vasta-aineista, sekä proteiini A/G -affiniteettipuhdistuspalveluita ja vasta-aineiden erotuspalveluita.

Alpha Lifetech voi tarjota räätälöityjä palveluita eri lajien monoklonaalisille ja polyklonaalisille vasta-aineille hyödyntäen erilaisia vasta-aineiden valmistustekniikoita, kuten hybridoomasoluteknologiaa. Lisäksi voimme tarjota laajan valikoiman palveluita, kuten suuren läpimenon sekvensointia, vasta-aineiden valmistusta, vasta-aineiden puhdistusta ja validointia. Valitsemme puhdistusmenetelmän asiakkaan erityistarpeen perusteella. Kattavien alustajärjestelmien, kuten vasta-aineiden kehitysalustan ja proteiinialustan, pohjalta Alpha Lifetech kattaa vasta-aineiden tuotannon ylä- ja alavirran palvelut, tarjoten vasta-aineiden puhdistusta, vasta-aineiden suuren läpimenon sekvensointia, vasta-aineiden validointia ja muita teknisiä palveluita.

Hybridooma-tekniikka

Hybridoomateknologiaa voidaan käyttää monoklonaalisten vasta-aineiden valmistukseen. Yhdistämällä immunisoitujen hiirten pernasoluja ihmisen tai hiiren myeloomasoluihin muodostuu hybridoomasoluja, jotka erittävät spesifisiä vasta-aineita. Tuotettuja hiirestä peräisin olevia monoklonaalisia vasta-aineita voidaan käyttää tieteellisessä tutkimuksessa, kuten entsyymi-immunosorbenttimäärityksessä, radioimmunomäärityksessä, immunohistokemiassa, virtaussytometriassa, proteiinien puhdistuksessa jne. Monoklonaalisiin vasta-ainenäytteisiin kuuluvat askites, hybridoomaneste jne. Näytettä, joka saadaan injektoimalla hybridoomasoluja eläinten vatsaonteloon ja käyttämällä eläimen vatsaontelon fysiologista ympäristöä vasta-aineiden tuottamiseen, kutsutaan askitesnäytteeksi. Eläinten vatsaonteloon injektoidut hybridoomasolut voivat lisääntyä ja erittää monoklonaalisia vasta-aineita, jotka voivat kerääntyä askitekseen. Näiden vasta-aineiden epäpuhtauksien (eläinproteiinit, hormonit jne.) mahdollisuuden vuoksi puhdistus on tarpeen. B-lymfosyyttien eritystoiminnan perusteella monoklonaalisia vasta-aineita erittyy usein viljelyalustaan hybridoomasoluja viljeltäessä. Viljelyalustassa olevaa monoklonaalisia vasta-aineita sisältävää nestettä kutsutaan hybridoomanesteeksi. Supernatantin monoklonaalisten vasta-aineiden puhtaus on suhteellisen korkea, mutta laajamittainen valmistus vaatii lisäpuhdistusta, koska ne saadaan in vitro -viljelyllä.

Vasta-aineiden puhdistuksella voidaan eristää erittäin puhtaita vasta-aineita komplekseista. Tällä hetkellä vasta-aineiden affiniteettipuhdistus sekä vasta-aineiden erottelu ja puhdistus ovat yleisesti käytettyjä vasta-aineiden puhdistusmenetelmiä, joihin kuuluvat pääasiassa proteiini A/G -puhdistus, ioninvaihtokromatografia, geelisuodatus, saostus ja hydrofobinen vuorovaikutuskromatografia. Näistä proteiini A/G -affiniteettipuhdistuspalvelu on laajalti suosittu erilaisissa vasta-aineiden puhdistussovelluksissa. Alpha Lifetechin prosessi valmistaa monoklonaalisia vasta-aineita hybridoomateknologian avulla on esitetty kuvassa 1.

Kuva 1. Prosessikaavio monoklonaalisten vasta-aineiden valmistamiseksi hybridoomateknologian avulla.

Vasta-aine-lääkekonjugaatti- ja hybridoomateknologia

Vasta-aine-lääkekonjugaatti (ADC) on uudenlainen biologinen aine, joka kytkee vasta-aineet kemiallisesti sytotoksisiin lääkkeisiin. Vasta-aine-lääkekonjugaatti yhdistää vasta-aineiden spesifisen tunnistuskyvyn sytotoksisten lääkkeiden voimakkaaseen tappavaan vaikutukseen ja toimittaa sytotoksiset lääkkeet tarkasti kasvainsoluihin vasta-aineiden avulla, jolloin saavutetaan tarkka hoito. ADC-lääkkeiden vasta-aineosa valmistetaan usein hybridoomateknologialla tai muilla vasta-aineiden tuotantotekniikoilla, kuten geenitekniikan vasta-aineteknologialla. Hybridoomateknologia tarjoaa korkealaatuisia vasta-aineraaka-aineita ADC-lääkkeille. Hybridoomateknologialla valmistetuilla ADC-lääkkeillä ja monoklonaalisilla vasta-aineilla on tärkeä rooli esimerkiksi syövän hoidossa. Niitä voidaan käyttää yksinään tai yhdistelmänä terapeuttisen tehon parantamiseksi.

Hybridoomateknologialla valmistetuilla monoklonaalisilla vasta-aineilla on korkea spesifisyys, ne pystyvät sitoutumaan ja tunnistamaan tarkasti spesifisiä antigeenejä, ja niitä voidaan tuottaa laajamittaisesti. Hybridoomasekvensointiteknologian avulla hybridoomasolujen vasta-ainegeenit voidaan eristää ja sekvensoida vastaavien sekvenssien saamiseksi, mikä on hyödyllistä vasta-aineiden myöhemmälle ilmentymiselle. Hybridoomateknologialla valmistettuja monoklonaalisia vasta-aineita voidaan käyttää spesifisten tautimerkkiaineiden, kuten kasvainmerkkiaineiden, virusantigeenien jne., havaitsemiseen, mikä tarjoaa vahvan tuen sairauksien varhaiselle diagnosoinnille. Lisäksi sitä voidaan käyttää myös kokeissa, kuten immunoblottauksessa ja immunohistokemiassa, proteiinien ilmentymisen, lokalisaation, rakenteen ja toiminnan tutkimiseksi.

hybridoomateknologian tuotanto Vasta-ainepalvelun työnkulku

Askeleet	Palvelun sisältö	Aikajana
Vaihe 1: Eläinten immunisointi	(1) Eläinten immunisointi 4 kertaa, tehosterokotus 1 annos, yhteensä 5 immunisoitua annosta. (2) Negatiivinen seerumi ennen immunisaatiota kerättiin ja neljännellä annoksella tehtiin ELISA seerumitiitterin havaitsemiseksi. (3) Jos neljännen rokoteannoksen seerumin vasta-ainetiitteri täyttää vaatimukset, annetaan yksi lisärokoteannos 7 päivää ennen verinäytteenottoa. Jos se ei täytä vaatimuksia, rutiininomainen rokotus jatkuu. (4) Määritelty teho, pernasolut eristetään solufuusiota varten.	10–12 viikkoa
Vaihe 2: Fuusio ja seulonta	(1) Fuusio: Immunisaation jälkeen hiiren pernasolut kerättiin ja fuusioitiin myeloomasolujen kanssa. (2) Lisääntyminen ja seulonta: Saaduille hybridoomasoluille tehtiin lisääntymis- ja ELISA-seulonta erittäin tehokkaiden kloonien saamiseksi.	6 viikkoa
Vaihe 3: Subklooni	15–25 positiivisen emosolun subkloonaus rajoitetun laimennoksen menetelmällä ja lopuksi 10–15 positiivisen kloonin määrittäminen	3–4 viikkoa
Vaihe 4: Askitesnesteen tuotanto ja vasta-aineiden puhdistus	(1) Askiitin tuotanto: Hiirillä käytetään askiteksen tuotantoon 10–15 hybridoomakantaa (jos saadaan suuri määrä hybridoomakantoja, ne lähetetään solumuodossa) (2) Askiitin tunnistus: Askiitin ELISA-detektio, teho (proteiini/virus > 10 ^ 5, pieni molekyyli/peptidi > 10 ^ 4) jatkopuhdistusta varten (3) Proteiini A/G:n puhdistus: Askitesin puhdistus	3–4 viikkoa
Vaihe 5: Toimitus	(1) Hanki 3–5 monoklonaalisen vasta-aineen hybridoomakantaa. (2) Jokainen hybridoomasolu sisältää 1 mg puhdistettua vasta-ainetta (askitespuhdistus). (3) Kokeellisen prosessiraportin	1 viikko

Hybridooma-teknologian etu

Alpha Lifetechillä on runsaasti kokemusta vasta-aineiden kehittämisestä. Vuosien varrella Alpha Lifetech on rakentanut kattavan vasta-aineiden kehitysalustan.

Useita lajeja

Immuniteetin voidaan antaa useille eläimille, mukaan lukien, mutta ei rajoittuen, hiiret, kanit, lampaat jne.

Useita kohteita

Hybridoomateknologiaan perustuen on saatavilla useita kohdevasta-aineiden löytöpalveluita: proteiineja, peptidejä, pieniä molekyylejä, viruksia, kalvoproteiineja, mRNA:ta jne.

Jäljitettävyystiedot

Laadunvalvonnan laatustandardit (immunoteho, PBMC-laadunvalvonta, kirjaston laadunvalvonta ja seulonnan validoinnin laadunvalvonta), englanninkieliset kokeelliset raportit, alkuperäiset kokeelliset tiedot

Henkilökohtainen ohjelma

Yksilöllinen ohjelman räätälöinti erilaisten asiakkaiden tutkimusprojektien tarpeisiin

Aiheeseen liittyvä PALVELU

Useita vasta-aineiden kehitysstrategioita

Monoklonaalisten vasta-aineiden kehityspalvelu

Hybridoma-teknologia-alusta

Yksittäisen B-solun lajittelualusta

Faaginäyttövasta-aineiden kehitysalusta

monoklonaalisten vasta-aineiden kehitys - Alpha Lifetech

Monoklonaalisten vasta-aineiden kehityspalvelu

Voimme tarjota korkealaatuisia, erittäin puhtaita ja erittäin spesifisiä monoklonaalisten vasta-aineiden kehityspalveluita, mukaan lukien hiiren ja kaniinin monoklonaalisten vasta-aineiden tuotanto.