Faaginäyttövasta-aineiden kehitysalusta
Faaginäyttötekniikka

Faaginäyttövasta-aineiden tuotannon työnkulku
| Askeleet | Palvelun sisältö | Aikajana |
|---|---|---|
| Vaihe 1: Eläinten immunisointi | (1) Eläinten immunisointi 4 kertaa, tehosterokotus 1 annos, yhteensä 5 immunisoitua annosta. (2) Negatiivinen seerumi ennen immunisaatiota kerättiin ja neljännellä annoksella tehtiin ELISA seerumitiitterin havaitsemiseksi. (3) Jos neljännen rokoteannoksen seerumin vasta-ainetiitteri täyttää vaatimukset, annetaan yksi lisärokoteannos 7 päivää ennen verinäytteenottoa. Jos se ei täytä vaatimuksia, rutiininomainen rokotus jatkuu. (4) Monosyyttien pätevä teho, verinäytteenotto ja erottelu | 10 viikkoa |
| Vaihe 2: cDNA:n valmistus | (1) PBMC:n kokonais-RNA:n uutto (RNA-uuttopakkaus) (2) cDNA:n korkearesoluutioinen RT-PCR-valmistelu (käänteiskopiointipakkaus) | 1 päivä |
| Vaihe 3: Vasta-ainekirjaston rakentaminen | (1) Käyttäen cDNA:ta templaattina, geenit monistettiin kahdella PCR-kierroksella. (2) Faagien rakentaminen ja transformaatio: geenien silmukointifagemidivektori, TG1-isäntäbakteerien elektroporaatiotransformaatio, vasta-ainekirjaston rakentaminen. (3) Tunnistus: Valitse satunnaisesti 24 kloonia, PCR-tunnistuksen positiivinen määrä + insertioaste. (4) Avustettu faagien valmistus: M13-faagien monistus + puhdistus. (5) Faaginäyttökirjaston pelastaminen | 3–4 viikkoa |
| Vaihe 4: Vasta-ainekirjaston seulonta (3 kierrosta) | (1) Oletusarvoinen 3-kierrosinen seulonta (kiinteän faasin seulonta): paineseulonta epäspesifisten vasta-aineiden poistamiseksi mahdollisimman tehokkaasti. (2) Yksittäisen kloonin monistus, bakteriofagien valinta + IPTG:n indusoima ilmentyminen + positiivisten kloonien ELISA-detektio. (3) Kaikki positiiviset kloonit valittiin geenisekvensointia varten. | 4–5 viikkoa |
Tukipalvelut
Voimme tarjota erilaisia eläinperäisten immuunikirjastojen rakennuspalveluita ja luonnollisten vasta-aineiden kirjastojen seulontapalveluita asiakkaiden tarpeiden mukaan.
Useita kohteita
Saatavilla on useita kohdevasta-aineiden löytöpalveluita: proteiineja, peptidejä, pieniä molekyylejä, viruksia, kalvoproteiineja, mRNA:ta jne.
Useita vektoreita
Räätälöity kirjastonrakennuspalvelu, tarjoamme erilaisia bakteriofagivektoreita, kuten PMECS, pComb3X ja pCANTAB 5E, ja voimme muokata niitä asiakkaan tarpeiden mukaan.
Aikuisille suunnattu alusta
Varastointikapasiteetti voi olla 10^8-10^9, insertioasteet ovat kaikki yli 90 % ja seulonnalla saatujen vasta-aineiden affiniteetti on yleensä nM pM -tasolla.
Monoklonaalisten vasta-aineiden kehityspalvelu
Voimme tarjota korkealaatuisia, erittäin puhtaita ja erittäin spesifisiä monoklonaalisten vasta-aineiden kehityspalveluita, mukaan lukien hiiren ja kaniinin monoklonaalisten vasta-aineiden tuotanto.
Hybridoma-teknologia-alusta
Sisältää immunisaatio-ohjelman, vasta-aineiden valmistuspalvelut, vasta-aineiden puhdistuksen, vasta-aineiden suuren läpimenon sekvensoinnin, vasta-aineiden validoinnin jne.
Yksittäisen B-solun lajittelualusta
Alpha Lifetechillä on etuja seulonta-ajan lyhentämisessä ja korkealaatuisten vasta-aineiden hankinnassa. Se voi tarjota antigeenien suunnittelua, synteesiä ja modifiointia, eläinten immuniteettia, yksittäisten B-solujen rikastusseulontaa ja yksittäisten solujen sekvensointia.
Faaginäyttövasta-aineiden kehitysalusta
Alpha Lifetech voi tarjota faaginäyttövasta-aineiden kehitysteknisiä palveluita, kuten vasta-aineiden valmistusta, puhdistusta ja sekvensointia.






2018-07-16 

