Plateforme technologique Hybridome
Alpha Lifetech fournit à ses clients des produits et services d'anticorps et d'anticorps recombinants de qualité garantie.
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Plateforme technologique Hybridome
Alpha Lifetech possède une vaste expérience dans le domaine du développement d'anticorps. Au fil des ans, Alpha Lifetech a mis en place une plateforme complète de développement d'anticorps (incluant le développement d'anticorps monoclonaux, polyclonaux et recombinants, ainsi que d'autres services de préparation et de développement d'anticorps).
Alpha Lifetech fournit à ses clients des anticorps et des anticorps recombinants de qualité garantie, ainsi que des services associés. Les anticorps préparés présentent une forte spécificité et une excellente stabilité. L'entreprise dispose d'une gamme complète d'instruments et d'équipements de purification d'anticorps, permettant de réaliser des services de purification d'anticorps monoclonaux de diverses origines (lapin, mouton, poulet, souris), ainsi que des services de purification par affinité protéine A/G et de séparation d'anticorps.
S'appuyant sur diverses techniques de préparation d'anticorps, telles que la technologie des hybridomes, Alpha Lifetech propose des services personnalisés pour les anticorps monoclonaux et polyclonaux de différentes espèces. De plus, une gamme complète de services est disponible, allant du séquençage à haut débit à la validation des anticorps, en passant par leur préparation, leur purification et leur analyse. La méthode de purification est choisie en fonction des besoins spécifiques du client. Grâce à des plateformes intégrées, notamment une plateforme de développement d'anticorps et une plateforme protéique, Alpha Lifetech couvre l'ensemble de la chaîne de production d'anticorps, de la purification à la validation, en passant par le séquençage à haut débit.
Technologie des hybridomes
La technologie des hybridomes permet de préparer des anticorps monoclonaux. La fusion de cellules spléniques de souris immunisées avec des cellules de myélome humain ou murin donne naissance à des hybridomes qui sécrètent des anticorps spécifiques. Ces anticorps monoclonaux murins peuvent être utilisés en recherche scientifique, notamment pour des tests ELISA, RIA, immunohistochimie, cytométrie en flux et pour la purification de protéines. Parmi les échantillons d'anticorps monoclonaux, on trouve l'ascite et le surnageant d'hybridome. L'ascite est l'échantillon obtenu par injection de cellules d'hybridome dans la cavité abdominale d'animaux, l'environnement physiologique de cette cavité favorisant la production d'anticorps. Les cellules d'hybridome injectées dans la cavité abdominale peuvent proliférer et sécréter des anticorps monoclonaux, qui s'accumulent dans l'ascite. La présence potentielle d'impuretés (protéines animales, hormones, etc.) dans ces anticorps nécessite une purification. Par ailleurs, les anticorps monoclonaux, similaires à ceux des lymphocytes B, sont souvent sécrétés dans le milieu de culture lors de la culture des hybridomes. Le liquide contenant les anticorps monoclonaux présents dans le milieu de culture est appelé surnageant d'hybridome. La pureté des anticorps monoclonaux dans le surnageant est relativement élevée, mais une purification supplémentaire est nécessaire pour une production à grande échelle, car ils sont obtenus par culture in vitro.
La purification d'anticorps permet d'isoler des anticorps de haute pureté à partir de complexes. Actuellement, la purification par affinité et la séparation-purification d'anticorps sont des méthodes couramment utilisées, notamment la purification par protéine A/G, la chromatographie d'échange d'ions, la filtration sur gel, la précipitation et la chromatographie d'interaction hydrophobe. Parmi celles-ci, la purification par affinité protéine A/G est largement répandue dans diverses applications de purification d'anticorps. Le procédé de préparation d'anticorps monoclonaux par Alpha Lifetech, basé sur la technologie des hybridomes, est illustré à la figure 1.
Figure 1. Schéma du processus de préparation d'anticorps monoclonaux basé sur la technologie des hybridomes.
Technologie des conjugués anticorps-médicament et des hybridomes
Un conjugué anticorps-médicament (ADC) est un agent biologique innovant qui associe chimiquement des anticorps à des médicaments cytotoxiques. L'ADC combine la capacité de reconnaissance spécifique des anticorps à la puissante activité cytotoxique des médicaments, et permet une délivrance précise de ces derniers aux cellules tumorales grâce aux anticorps, pour un traitement ciblé. La fraction anticorps des ADC est souvent produite par la technologie des hybridomes ou d'autres techniques de production d'anticorps, comme le génie génétique. La technologie des hybridomes fournit des anticorps de haute qualité, matières premières essentielles à la fabrication des ADC. Les ADC et les anticorps monoclonaux produits par cette technologie jouent un rôle important dans des domaines tels que le traitement du cancer. Ils peuvent être utilisés seuls ou en association pour renforcer l'efficacité thérapeutique.
Les anticorps monoclonaux produits par la technologie des hybridomes présentent une spécificité élevée, une capacité de liaison et de reconnaissance précise des antigènes spécifiques, et peuvent être produits à grande échelle. Grâce au séquençage des hybridomes, les gènes d'anticorps contenus dans les cellules d'hybridome peuvent être extraits et séquencés afin d'obtenir les séquences correspondantes, ce qui est essentiel pour l'expression ultérieure des anticorps. Ces anticorps monoclonaux peuvent être utilisés pour détecter des marqueurs de maladies spécifiques, tels que des marqueurs tumoraux ou des antigènes viraux, contribuant ainsi fortement au diagnostic précoce. De plus, ils peuvent être utilisés dans des techniques telles que l'immunoblot et l'immunohistochimie pour étudier l'expression, la localisation, la structure et la fonction des protéines.
Flux de travail du service de production d'anticorps par technologie d'hybridome
| Mesures | Contenu du service | Chronologie |
|---|---|---|
| Étape 1 : Immunisation des animaux | (1) Immunisation animale 4 fois, immunisation de rappel 1 dose, un total de 5 doses immunisées. (2) Un sérum négatif avant l'immunisation a été collecté, et un test ELISA a été réalisé sur la quatrième dose pour détecter le titre sérique. (3) Si le titre d'anticorps sériques de la quatrième dose est conforme aux exigences, une dose supplémentaire de vaccin sera administrée 7 jours avant le prélèvement sanguin. Dans le cas contraire, la vaccination de routine se poursuivra. (4) Puissance qualifiée, les cellules de la rate sont isolées pour la fusion cellulaire. | 10 à 12 semaines |
| Étape 2 : Fusion et sélection | (1) Fusion : Après l'immunisation, les cellules spléniques de souris ont été collectées et fusionnées avec des cellules de myélome. (2) Prolifération et sélection : Les cellules d'hybridome obtenues ont été soumises à une prolifération et à une sélection ELISA pour obtenir des clones hautement efficaces. | 6 semaines |
| Étape 3 : Sous-clone | Sous-clonage de 15 à 25 cellules mères positives par la méthode de dilution limitée, et détermination finale de 10 à 15 clones positifs. | 3 à 4 semaines |
| Étape 4 : Production d'ascite et purification des anticorps | (1) Production d'ascite : 10 à 15 souches d'hybridomes sont utilisées pour la production d'ascite chez la souris (si un grand nombre de souches d'hybridomes sont obtenues, elles seront envoyées sous forme cellulaire). (2) Identification de l'ascite : détection par ELISA de l'ascite, puissance (protéine/virus > 10⁵, petite molécule/peptide > 10⁴) pour la purification en aval (3) Purification de la protéine A/G : Purification de l'ascite | 3 à 4 semaines |
| Étape 5 : Livraison | (1) Fournir 3 à 5 souches d'hybridomes d'anticorps monoclonaux. (2) Chaque cellule d'hybridome fournit 1 mg d'anticorps purifié (purification d'ascite). (3) Rapport sur le processus expérimental | 1 semaine |
Espèces multiples
L'immunité peut être conférée à divers animaux, notamment aux souris, aux lapins, aux moutons, etc.
Cibles multiples
S’appuyant sur la technologie des hybridomes, de multiples services de découverte d’anticorps à cibles multiples sont disponibles : protéines, peptides, petites molécules, virus, protéines membranaires, ARNm, etc.
Enregistrements de traçabilité
Normes de contrôle qualité (puissance immunitaire, contrôle qualité des PBMC, contrôle qualité des banques d'ADN et contrôle qualité de la validation du criblage), rapports expérimentaux en anglais, enregistrements expérimentaux originaux
Programme personnalisé
Personnalisation individuelle du programme pour répondre aux besoins des projets de recherche de divers clients
Service de développement d'anticorps monoclonaux
Nous proposons des services de développement d'anticorps monoclonaux de haute qualité, de haute pureté et de haute spécificité, notamment la production d'anticorps monoclonaux de souris et d'anticorps monoclonaux de lapin.
Plateforme technologique Hybridome
Cela inclut les programmes de vaccination, les services de préparation d'anticorps, la purification d'anticorps, le séquençage à haut débit d'anticorps, la validation d'anticorps, etc.
Plateforme de tri de cellules B uniques
Alpha Lifetech présente des avantages en termes de rapidité de criblage et d'obtention d'anticorps de haute qualité. Elle propose la conception, la synthèse et la modification d'antigènes, l'immunodéficience animale, le criblage d'enrichissement de cellules B uniques et le séquençage de cellules uniques.
Plateforme de développement d'anticorps par phage display
Alpha Lifetech peut fournir des services techniques de développement d'anticorps par phage display, allant de la préparation, la purification et le séquençage des anticorps, etc.
Ressources technologiques connexes
Introduction à la technologie des hybridomesVIDÉO
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16/07/2018 
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