Service de purification des protéines membranaires

Alpha Lifetech a préparé avec succès des milliers de protéines recombinantes pour ses clients, notamment des anticorps recombinants, des protéines sécrétées, des protéines transmembranaires et des protéases, avec un taux de réussite élevé. Il suffit aux clients de fournir la séquence protéique, la séquence codante (CDS) ou le nom de la protéine pour qu'Alpha Lifetech élabore rapidement un plan complet d'expression et de purification de la protéine de fusion. Nous proposons des services d'expression protéique personnalisés, basés sur les quatre principaux systèmes d'expression, et adaptons nos stratégies d'expression et de purification aux besoins spécifiques de chaque client.

Alpha Lifetech dispose d'une gamme complète d'instruments et d'équipements de purification de protéines, permettant la purification de protéines naturelles et recombinantes. Parmi ces techniques figurent la purification par affinité, la chromatographie sur tamis moléculaire, la chromatographie d'échange d'ions et la chromatographie hydrophobe. Nous sélectionnons les méthodes de purification les plus adaptées aux besoins spécifiques de nos clients et les combinons à notre plateforme de purification de protéines afin d'obtenir des produits protéiques de haute qualité dans des délais réduits.

Classification des protéines membranaires

Selon la distribution des protéines dans la membrane et la relation entre les protéines membranaires et les lipides membranaires, les protéines membranaires sont divisées en trois catégories : les protéines membranaires périphériques, les protéines membranaires intégrées et les protéines d’ancrage lipidique.

Protéine de canal ionique

La protéine de canal ionique est une protéine membranaire intégrée qui s'insère dans les membranes biologiques pour former des structures de canal spécifiques, permettant sélectivement le transport de certains ions à travers les membranes à l'intérieur et à l'extérieur de la cellule, tout en empêchant le passage d'autres ions. La sélectivité des protéines de canal ionique est cruciale pour le maintien des fonctions vitales cellulaires telles que la différence de concentration ionique entre l'intérieur et l'extérieur de la cellule, le transport des neurotransmetteurs, etc.

récepteurs couplés aux protéines G

Les récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) désignent une vaste classe de récepteurs membranaires, qui constituent les récepteurs de surface cellulaire les plus nombreux chez les eucaryotes. Leur fonction principale est de transmettre l'information extracellulaire à l'intérieur des cellules par interaction avec les protéines G, jouant ainsi un rôle crucial dans la transduction du signal. Les RCPG reconnaissent et se lient à des ligands extracellulaires pour déclencher des voies de signalisation intracellulaires, régulant de ce fait diverses activités physiologiques cellulaires.

Particules de type virus

Une particule pseudo-virale est une particule protéique formée par l'auto-assemblage d'une ou plusieurs protéines structurales d'un virus. Ces particules sont similaires, par leur morphologie et leur structure, aux particules virales naturelles, mais ne contiennent pas le matériel génétique du virus et sont donc non infectieuses.

Les particules pseudo-virales (VLP) peuvent servir de support d'exposition pour les protéines membranaires, simulant leur conformation et leur fonction dans leur environnement naturel grâce à l'exposition de protéines membranaires spécifiques à leur surface. Dans le développement de vaccins, les antigènes protecteurs du virus, généralement des protéines membranaires, peuvent être exposés sur les VLP afin de stimuler la réponse immunitaire de l'organisme. Les vaccins ainsi préparés sont très sûrs et immunogènes.

Purification des protéines membranaires

Il existe différentes méthodes de purification des protéines membranaires. Parmi celles-ci, la chromatographie d'affinité exploite l'affinité des protéines membranaires elles-mêmes ou de leurs étiquettes de fusion, telles que les étiquettes His, pour leurs ligands spécifiques. La chromatographie d'échange d'ions utilise les propriétés de charge des protéines membranaires pour les séparer sur des résines échangeuses d'ions. Cependant, les solutions de protéines membranaires contiennent souvent des détergents, et la résurgence de ces détergents peut affecter l'efficacité de la chromatographie d'échange d'ions. La chromatographie de filtration sur gel exploite la différence de masse moléculaire des protéines membranaires pour les séparer sur une colonne de gel. Cette méthode permet d'obtenir des protéines membranaires de haute pureté. Grâce à leur affinité et à leur hydrophobicité, les protéines membranaires peuvent être séparées sur des colonnes chromatographiques. Cette méthode est efficace, rapide et très sensible, mais son coût est relativement élevé.

Purification des protéines membranaires - Alpha Lifetech

Figure 1. Schéma de principe de la purification des protéines par affinité

Avantages de la purification des protéines membranairesPOURQUOI choisir

Optimisation des codons

Une expression élevée des protéines solubles et une activité protéique élevée peuvent être garanties.

Modes de fermentation protéique à plusieurs échelles : petite échelle (cuves de fermentation de 1 L, 10 L et 30 L), grande échelle (cuves de fermentation de 80 L, 130 L, 250 L et 500 L)

Préparation de protéines recombinantes de haute pureté en milligrammes et en grammes en un court laps de temps

Faible teneur en endotoxines : méthode de détection LAL

Un système complet de documentation conforme aux BPF garantit la traçabilité de tous les matériaux, réactifs et informations de préparation du produit.

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