Plateforme de bibliothèque de peptides à présentation de phages

S'appuyant sur la technologie du phage display, Alpha Lifetech propose à ses clients des services de construction et de criblage de bibliothèques de peptides de haute qualité, notamment des bibliothèques de peptides linéaires à 7, 9, 10, 15 et 12 chaînons, des bibliothèques de peptides cycliques à 7 chaînons, et d'autres bibliothèques de peptides. La diversité, le taux d'insertion et le taux de positivité de ces bibliothèques peuvent atteindre plus de 90 %, afin de répondre aux différents besoins des clients en matière de bibliothèques de peptides pour phage display.

Les banques de phages sont largement utilisées en recherche et applications biomédicales. Par exemple, en ingénierie et développement d'anticorps, elles permettent de cribler et d'améliorer les variants d'anticorps. En criblage de médicaments et découverte de cibles thérapeutiques, elles servent à identifier des protéines ou des peptides à potentiel thérapeutique. En recherche vaccinale, elles sont utilisées pour la sélection d'antigènes vaccinaux et le développement de vaccins. Enfin, les banques de phages trouvent également des applications dans de nombreux domaines, tels que l'étude des interactions protéiques, le diagnostic et le traitement du cancer.

Technologie d'affichage des phages

La technologie du phage display consiste à fusionner le gène de la protéine cible avec le gène de la protéine de surface du phage, ce qui permet d'exprimer la protéine cible à la surface du phage sous forme de protéine de fusion. Ces protéines conservent leur structure spatiale et leur activité biologique, et peuvent être criblées, détectées et reconnues par interaction avec des anticorps spécifiques ou d'autres molécules. Parmi les molécules pouvant être présentées par cette technologie, on trouve les anticorps, les fragments d'anticorps, les segments peptidiques, les ADNc, etc.

La technologie du phage display comprend principalement le système de phage display M13 (tel que les systèmes PIII et PVI), le système de phage display λ, le système de phage display T4 et le système de phage display T7. Chaque système possède ses propres caractéristiques et convient à différents besoins de recherche. Le phage M13, grâce à ses propriétés lysogènes, ne lyse pas la cellule hôte après infection, ce qui lui permet de se répliquer et d'exprimer des fragments étrangers de manière continue au sein de cette cellule. Il est donc adapté au criblage à long terme et à l'expression stable. Le phage T7, quant à lui, grâce à son cycle de vie court et à son efficacité de réplication élevée, peut produire rapidement un grand nombre de phages descendants, ce qui le rend adapté au criblage à haut débit et à l'expression rapide.

	Phage M13	Phage T7
1. Structure morphologique	phage filamenteux	phage polyédrique
2. Matériel génétique	Molécule d'ADN circulaire simple brin	ADN linéaire, double brin, superflu à l'extrémité
3. Réplication et infection	Les phages lysogènes, assemblés dans le périplasme, peuvent être sécrétés à partir des membranes bactériennes sans lyser les cellules hôtes.	Les phages virulents, descendants des phages assemblés dans le cytoplasme bactérien, sont libérés par lyse de la membrane cellulaire.
4. Système d'affichage	Un système d'affichage a été construit à l'aide de protéines de capside pIII et PVIII, adapté à l'affichage de peptides/protéines étrangers de différentes tailles.	Le système d'affichage est construit avec la protéine de capside 10B, qui ne nécessite pas de processus de sécrétion et convient à l'affichage de peptides/protéines ayant un effet inhibiteur sur le processus de sécrétion.
5. Avantage de l'application	Il convient à l'affichage et au criblage à long terme de peptides à petites molécules.	Elle présente des avantages en termes d'expression rapide et de criblage à haut débit des protéines macromoléculaires.

Types de bibliothèques de peptides à présentation de phages

Alpha Lifetech possède une grande expérience dans la construction et le criblage de banques de peptides par la technique du phage display et propose différents types de banques. Selon la longueur des peptides, on distingue les banques à 7, 9, 10, 12 et 15 peptides. Selon la conformation spatiale des polypeptides, on distingue les banques de peptides linéaires et les banques de peptides cycliques.

Bibliothèque de peptides de phages linéaires

Le gène du peptide est inséré dans la région codante de la protéine de capside du génome du phage, généralement pIII ou PVIII, et se présente sous la forme d'une chaîne linéaire. Les peptides à chaîne linéaire sont susceptibles de se dégrader facilement in vivo, ce qui peut affecter leur capacité de liaison et leur stabilité.

bibliothèque de peptides de phages cycliques

Le peptide cyclique modifié formera une conformation fixe sous l'action de ponts disulfure ou d'autres liaisons de liaison, ce qui améliorera considérablement la stabilité métabolique et la biodisponibilité, et répondra également mieux aux exigences de liaison de la conformation récepteur-ligand (anticorps-antigène).

Procédé de sélection de bibliothèques de peptides par phage display

Sélection de phages

On choisit généralement comme vecteurs des phages de type M13 ou T7.

Construction d'une bibliothèque de peptides par présentation de phages

On construit un vecteur phagique capable de contenir la séquence codante d'une protéine ou d'un polypeptide étranger, comprenant généralement un promoteur, des marqueurs de sélection et les éléments régulateurs appropriés. L'insertion de la séquence codante de la protéine ou du peptide étranger dans le vecteur phagique se fait généralement par digestion enzymatique et ligation. Le vecteur phagique ainsi construit est transformé dans la cellule hôte, permettant au phage de se répliquer et d'exprimer les protéines ou peptides étrangers au sein de cette cellule. Des banques de phages contenant plusieurs protéines ou peptides étrangers différents sont préparées par transformation et amplification à grande échelle.

criblage de banques de peptides par phage display

Fixez les molécules cibles (protéines, récepteurs ou anticorps) sur un support en phase solide. Incubez la banque de peptides présentée sur phage avec la cible fixée afin de permettre la liaison des peptides à la molécule cible. Au cours de ce processus, les bactériophages non liés sont éliminés par lavage, tandis que ceux liés à la cible sont conservés. Les bactériophages présentant une forte affinité sont ensuite élués. Les bactériophages récupérés sont amplifiés par infection d'Escherichia coli, puis soumis à un nouveau cycle de criblage. Trois à cinq cycles de criblage sont généralement nécessaires pour obtenir des peptides à forte affinité de liaison.

Conception et synthèse de peptides

Synthétiser des peptides à partir de sites de criblage.

Bibliothèque de peptides - Alpha Lifetech

Figure 1. Processus de construction et de criblage d'une banque de peptides par phage display

Plateforme associée

Alpha Lifetech peut fournir à ses clients des services de construction et de criblage de bibliothèques de peptides par phage display de haute qualité

Bibliothèque d'anticorps par présentation de phages - Alpha Lifetech

Plateforme de construction de bibliothèques de peptides par phage display

Alpha Lifetech dispose de plusieurs technologies de construction de banques de peptides. Nous proposons principalement des services de construction de banques de peptides T7 et M13, adaptés aux différents types de phages.

Criblage par affichage de phages - Alpha Lifetech

Plateforme de criblage de bibliothèques de peptides par phage display

Alpha Lifetech possède une riche expérience dans le criblage de banques de phages peptidiques, offrant un soutien technique solide pour la découverte de médicaments à petites molécules, le diagnostic clinique, le traitement des maladies et la recherche biologique.

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Alpha Lifetech peut fournir à ses clients un service de construction et de criblage de bibliothèques de peptides par affichage de phages de haute qualité.