Système d'affichage de phages
Alpha Lifetech a mis au point un système de phage display parfaitement stable qui permet de gagner du temps pour la recherche scientifique ou les projets de recherche et facilite la production ultérieure.
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Système d'affichage de phages
Alpha Lifetech est spécialisée depuis de nombreuses années dans la technologie du phage display. Nous avons développé une plateforme technologique de phage display stable et performante, permettant un gain de temps précieux pour la recherche scientifique et les projets de développement, et facilitant la production ultérieure. Nous proposons plusieurs systèmes de phage display, notamment pour les phages M13, T7, T4 et λ. En fonction de vos besoins expérimentaux, vous pouvez sélectionner le système le plus adapté. Alpha Lifetech propose également des services de production d'anticorps VHH, SCFV et Fab.
Introduction au phage display
La technologie du phage display est une technique qui utilise des phages (virus infectant les bactéries) pour identifier des molécules fonctionnelles se liant à des protéines ou des peptides spécifiques. Les techniques de construction de banques d'anticorps par phage comprennent les banques d'anticorps Fab, scFv et vhh. Selon le type de bactériophage, on distingue les bactériophages m13, T7, T4, λ et d'autres. Selon le type de banque, on distingue les banques de peptides aléatoires, les banques d'ADNc, les banques d'anticorps et les banques de protéines. La technologie du phage display est simple et peu coûteuse ; elle inclut les techniques Fab, scFv et vhh. Cependant, cette technique limite la diversité génétique moléculaire des banques, car elle ne permet pas l'expression de séquences trop longues.
La technologie d'affichage de phages est capable de former un lien physique entre la molécule affichée et la séquence d'ADN codant pour cette molécule, et la séquence d'acides aminés d'un conjugué spécifique peut être déterminée instantanément par séquençage d'ADN du fragment souhaité dans le génome du phage.
Actuellement, la technologie du phage display est largement utilisée. Elle a notamment permis des avancées significatives dans la recherche et le développement de nouveaux vaccins (vaccins synthétiques peu coûteux et efficaces), le développement de médicaments à base d'anticorps (criblage d'inhibiteurs enzymatiques), la transduction du signal cellulaire (criblage d'épitopes simulés) et la recherche sur les épitopes antigéniques (préparation d'anticorps monoclonaux).
Principe du phage display
Le phage display est une technologie moléculaire basée sur la modification génétique de l'ADN du phage. Cette modification permet de lier un fragment d'ADN cible à la protéine de capside du phage et de l'exprimer ainsi à sa surface. La séquence d'ADN étrangère est insérée à un emplacement précis de la séquence nucléotidique du génome du phage codant pour une protéine de capside (Fig. 1).
Lorsqu'une infection par un phage se produit, le gène du phage commence à s'exprimer au sein de l'hôte bactérien, et le fragment cible inséré est affiché à la surface du phage sous forme d'une combinaison du gène apparenté codant pour la protéine de capside et de la séquence clonée.
Fig.1 Architecture du virion du bactériophage M13 et principe de la technologie d'affichage des phages.(Source de référence : Présentation de phages et autres technologies de présentation de peptides | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Systèmes de présentation de phages
Les phages filamenteux constituent le système de présentation de phages le plus couramment utilisé, mais il est possible de construire des systèmes similaires avec d'autres phages. Ces systèmes permettent de présenter des peptides relativement longs ou de cribler des banques d'ADNc plus efficacement que les systèmes basés sur les phages filamenteux.
Fig.2 Types de bactériophages utilisés dans le phage display.(Source de référence : Présentation de phages et autres technologies de présentation de peptides | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Avantage du système de présentation de phages
Les systèmes de phage display utilisent généralement des phages filamenteux, notamment M13, fd et f1. Contrairement aux phages M13, les bactériophages T7 sont composés d'ADN double brin, ce qui leur confère une plus grande stabilité et les rend moins sujets aux mutations lors de la réplication. Utilisé comme vecteur, le phage T7 se multiplie rapidement et peut former des plages de lyse en 3 heures, ce qui permet un gain de temps considérable pour le clonage et le criblage.
La construction de banques de phages T7 a été utilisée pour l'expression de gènes de surface et non de surface, ainsi que pour la construction de banques d'affichage de peptides, d'ADNc, d'ADN génomique et d'anticorps. Ceci permet d'utiliser le phage T7 non seulement comme agent antimicrobien, mais aussi pour le criblage de cibles thérapeutiques dans des organes cibles (tels que le cerveau, le foie et les poumons), le criblage de cibles de reconnaissance d'anticorps, la recherche de mécanismes physiologiques, etc. Il peut également être utilisé pour le diagnostic et le traitement de diverses maladies.
Autres formes de bactériophages
phage à infectiosité sélective
Contrairement à la présentation de phages traditionnelle, le phage infectieux sélectif (SIP) relie directement les interactions protéine-ligand de production à l'infection et à l'expansion du phage sans avoir besoin d'étapes d'élution.
Fig.3 Phage à infection sélective (SIP).(Source de référence : Présentation de phages et autres technologies de présentation de peptides | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
phages du paysage
Les phages paysagers sont causés par des milliers de copies de peptides étrangers disposées autour de capsides tubulaires selon des motifs répétitifs extrêmement serrés, et l'affichage polyvalent sur les phages paysagers induit une sélection à haute affinité, de sorte qu'il est impossible de distinguer entre les ligands peptidiques à haute et basse affinité.
Fig. 4 Le concept de phages paysagers. (Source de référence : Présentation de phages et autres technologies de présentation de peptides | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Systèmes d'affichage de phages multiples
Système d'affichage des phages M13, T7, T4 et λ au choix des clients.
capacité de criblage à haut débit
Nous pouvons utiliser des systèmes de présentation de phages pour construire rapidement des banques de phages à grande échelle et réaliser des expériences de criblage à haut débit.
Service de phage display personnalisé
Les clients peuvent personnaliser des services complets en fonction des exigences de leur projet, tels que le criblage d'anticorps à haute affinité, etc.
Large gamme d'applications
Utilisée dans des domaines tels que l'ingénierie des anticorps, l'ingénierie des peptides et des protéines, la découverte et le développement de médicaments, la recherche sur les interactions protéiques, etc.
Si vous avez des questions, n'hésitez pas à nous contacter à tout moment.
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16/07/2018 
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