Service de découverte d'anticorps scFv

Alpha Lifetech Inc.Nous sommes fiers de proposer des services complets de construction de banques scFv afin de répondre aux besoins variés des scientifiques du monde entier. Notre objectif est de comprendre et de satisfaire les exigences de chaque client et de les accompagner face aux difficultés rencontrées dans leurs travaux de recherche.

Qu'est-ce qu'un anticorps scFv (Single Chain Variable Fragment Antibody) ?

Un anticorps à chaîne unique est constitué d'un fragment variable léger (VL) et d'un fragment variable lourd (VH) reliés par un peptide de liaison flexible. Il peut être facilement exprimé sous une forme fonctionnelle à la surface d'un phage et est donc communément appelé fragment variable à chaîne unique (scFv). Le fragment scFv est la plus petite unité de la molécule d'immunoglobuline (à l'exception des nanocorps) impliquée dans la liaison à l'antigène et permet, par ingénierie des protéines, d'améliorer les propriétés du scFv (fragment variable à chaîne unique), telles que l'augmentation de l'affinité et la modification de la spécificité. Chez Alpha Lifetech Inc., les anticorps scFv sont principalement construits à partir d'hybridomes, de cellules spléniques de souris immunisées et de lymphocytes B humains. L'ARN total ou l'ARNm est d'abord isolé à partir d'hybridomes, de cellules spléniques, de lymphocytes et de cellules de moelle osseuse, puis rétrotranscrit en ADNc servant de matrice pour l'amplification du gène de l'anticorps (PCR).

Développement d'anticorps scFv - Technologie du phage display

La diversité d'une banque d'anticorps est déterminée par le nombre de clones indépendants. Pour produire une banque d'anticorps scFv de grande taille, nos scientifiques utilisent une stratégie exclusive en deux étapes. Dans la première étape, les répertoires primaires sont préparés à partir de produits PCR codant pour les domaines VH, Vκ et Vλ, ce qui permet d'obtenir des banques de taille moyenne (1 à 100 millions de clones). Dans la seconde étape, les fragments VH (ou VL) sont isolés par digestion de l'ADN plasmidique purifié à partir des répertoires primaires, puis clonés dans le vecteur phagemide accepteur contenant les répertoires VL (ou VH). Cette innovation augmente considérablement la taille des banques (10⁶).¹⁰-10¹²clones).

Criblage à grande échelle et à haut débit d'anticorps scFv

Pour la production à grande échelle de scFv, il est évident que le choix de la plateforme d'expression influence fortement la conception du procédé, les stratégies de traitement en aval et les coûts. Le choix de la voie de fabrication dépendra de la pertinence des modifications post-traductionnelles, du calendrier de développement clinique et des aspects économiques, qui sont eux aussi fortement dépendants de la plateforme d'expression. Il n'existe pas de système d'expression universel garantissant des niveaux d'expression élevés pour une large gamme d'anticorps, voire de protéines.