Introduction aux banques d'anticorps synthétisés

La bibliothèque d'anticorps synthétisés, également connue sous le nom de bibliothèque De novo, est une méthode synthétique qui utilise des techniques telles que la synthèse d'ADN ou le phage display pour concevoir et synthétiser des régions variables complètes d'anticorps, y compris les régions de structure et les CDR, sans recourir à des bibliothèques d'anticorps naïfs.

Une banque d'anticorps semi-synthétiques est créée en combinant des banques d'anticorps naturels avec une diversité synthétique. Elle implique généralement la synthèse d'oligonucléotides d'ADN pour produire un ensemble de régions déterminant la complémentarité (CDR) différentes, qui sont ensuite combinées à une structure d'anticorps constante dérivée de sources naturelles telles que les lymphocytes B humains ou animaux. Les CDR synthétisées introduisent de la diversité dans la banque, permettant ainsi d'obtenir des anticorps ciblant un large éventail d'épitopes. La banque d'anticorps semi-synthétiques offre un compromis entre la diversité naturelle du système immunitaire et la diversité contrôlée obtenue par des méthodes de synthèse.

La distinction entre les banques d'anticorps naïfs et synthétiques repose sur l'origine des gènes d'immunoglobulines. Par ailleurs, la différence entre une banque d'anticorps semi-synthétisée et une banque d'anticorps synthétisée réside dans le fait que la première est constituée d'une partie de segments d'anticorps naïfs, tels que la chaîne légère ou la chaîne lourde, dont un seul est synthétisé in vitro ; tandis que la banque d'anticorps synthétisée est entièrement issue d'une synthèse artificielle par PCR in vitro.

Alpha Lifetech peut fournir

Alpha Lifetech Inc.Nous proposons une bibliothèque d'anticorps semi-synthétisés/synthétisés d'origine animale et humaine, grâce à notre plateforme professionnelle de découverte d'anticorps. Forts de plusieurs années d'expérience en modification génétique et en construction de bibliothèques, nous sommes en mesure de concevoir des bibliothèques synthétiques capables de produire des anticorps synthétiques dont l'affinité et la spécificité dépassent celles des anticorps naturels.Alpha LifetechNos experts sont fiers d'annoncer que nous pouvons garantir un taux de réussite élevé dans la construction d'une bibliothèque d'anticorps contenant 10^8 – 10^10 clones indépendants.

Alpha Lifetech Inc.Nous sommes fiers de proposer des services complets de construction de banques d'anticorps afin de répondre aux besoins variés des chercheurs du monde entier, notamment les anticorps scFv, Fab, VHH et les banques personnalisées. Notre objectif est de comprendre et de satisfaire les exigences de chaque client et de les accompagner face aux difficultés rencontrées dans leurs travaux de recherche.

Processus de construction de banques d'anticorps synthétisées

Conception
La phase de conception consiste à sélectionner les structures des anticorps et les régions déterminant la complémentarité (CDR) à partir de séquences d'anticorps existantes ou de données structurales. Des anticorps à CDR synthétiques peuvent également être conçus pour introduire des fonctionnalités spécifiques ou améliorer les propriétés de liaison.

Synthèse
L'ADN synthétique codant les séquences d'anticorps conçues, y compris les régions de structure et les CDR, est synthétisé à l'aide de méthodes chimiques ou enzymatiques.

Assemblée
Les fragments d'ADN synthétisés sont assemblés en vecteurs d'expression d'anticorps par des techniques telles que la PCR, la ligation ou l'assemblage de Gibson. Ces vecteurs peuvent ensuite être introduits dans des systèmes d'expression, comme des cellules bactériennes, de levure ou de mammifères, pour la production d'anticorps.

Sélection et examen
Les banques d'anticorps ainsi construites sont criblées et sélectionnées pour leurs propriétés recherchées grâce à des méthodes de criblage à haut débit. Selon le format de la banque et l'application, il peut s'agir de techniques telles que le phage display, le yeast display ou le ribosome display.

Service de construction de bibliothèques d'anticorps synthétisés

Alpha Lifetech Inc.Nous proposons à nos clients un service complet de conception et de synthèse de banques d'anticorps. Ce service repose sur la ligation des répertoires de gènes V des chaînes lourdes et légères dans un vecteur phagique grâce au système de recombinaison site-spécifique Cre-lox, créant ainsi un répertoire de fragments Fab présentés sur phage, comprenant 6,5 × 10^10 clones. La banque ainsi obtenue produit des anticorps dirigés contre de nombreux antigènes, certains présentant des affinités nanomolaires. La génération de cette banque d'anticorps humains est basée sur la technologie de présentation sur phage M13 (illustrée ci-dessous).