Introduction aux bibliothèques d'anticorps synthétisés

La bibliothèque d'anticorps synthétisés, également connue sous le nom de bibliothèque de novo, est une méthode synthétique qui utilise des techniques telles que la synthèse d'ADN ou l'affichage de phages pour concevoir et synthétiser des régions variables d'anticorps complètes, y compris des régions de charpente et des CDR, sans s'appuyer sur des bibliothèques d'anticorps naïves.

Une banque d'anticorps semi-synthétiques est créée en combinant des banques d'anticorps naturels avec une diversité synthétique. Elle implique généralement la synthèse d'oligonucléotides d'ADN pour produire un ensemble de régions déterminantes complémentaires (CDR), qui sont ensuite combinées à une structure d'anticorps constante issue de sources naturelles telles que les lymphocytes B humains ou animaux. Les CDR synthétisées apportent de la diversité à la banque, produisant des anticorps ciblant un large éventail d'épitopes. La banque d'anticorps semi-synthétiques offre un compromis entre la diversité naturelle du système immunitaire et la diversité contrôlée obtenue par des méthodes synthétiques.

La distinction entre les bibliothèques d'anticorps naïfs et synthétiques dépend de la source des gènes d'immunoglobulines. La différence entre une bibliothèque d'anticorps semi-synthétisés et synthétisés réside dans le fait que la première est constituée d'une partie de segments d'anticorps naïfs, tels que des chaînes légères ou lourdes, et qu'un seul d'entre eux est synthétisé in vitro ; tandis que la bibliothèque synthétisée est entièrement issue d'une synthèse artificielle par PCR in vitro.

Alpha Lifetech peut fournir

Alpha Lifetech Inc.Nous proposons une bibliothèque d'anticorps semi-synthétisés/synthétisés d'origine animale et humaine, basée sur notre plateforme professionnelle de découverte d'anticorps. Forts de nombreuses années d'expérience en modification génétique et en construction de bibliothèques, nous pouvons créer des bibliothèques synthétisées capables de produire des anticorps synthétiques dont l'affinité et la spécificité dépassent celles des anticorps naturels.Alpha LifetechLes experts sont fiers d’annoncer que nous pouvons garantir un taux de réussite élevé dans la construction d’une bibliothèque d’anticorps contenant 10^8 – 10^10 clones indépendants.

Alpha Lifetech Inc.est fier de proposer des services complets de constitution de bibliothèques d'anticorps pour répondre aux divers besoins des chercheurs du monde entier, notamment des bibliothèques d'anticorps scFv, Fab, VHH et personnalisées. Notre objectif est de comprendre et de satisfaire les exigences de nos clients, et de les accompagner dans la résolution de tout problème émergent lié à la recherche.

Processus de service de construction de bibliothèques d'anticorps synthétisés

Conception
La phase de conception consiste à sélectionner les structures d'anticorps et les régions déterminant la complémentarité (CDR) en fonction des séquences d'anticorps existantes ou de données structurales. Des anticorps CDR synthétiques peuvent également être conçus pour introduire des fonctionnalités spécifiques ou améliorer les propriétés de liaison.

Synthèse
L'ADN synthétique codant les séquences d'anticorps conçues, y compris les régions de structure et les CDR, est synthétisé à l'aide de méthodes chimiques ou enzymatiques.

Assemblée
Les fragments d'ADN synthétisés sont assemblés en vecteurs d'expression d'anticorps par des techniques telles que la PCR, la ligature ou l'assemblage Gibson. Ces vecteurs peuvent ensuite être introduits dans des systèmes d'expression tels que des cellules bactériennes, de levure ou de mammifères pour la production d'anticorps.

Sélection et filtrage
Les bibliothèques d'anticorps construites sont criblées et sélectionnées pour les anticorps possédant les propriétés souhaitées à l'aide de méthodes de criblage à haut débit. Ces méthodes peuvent impliquer des techniques telles que l'affichage sur phage, sur levure ou sur ribosome, selon le format de la bibliothèque et son application.

Service de construction de bibliothèques d'anticorps synthétisés

Alpha Lifetech Inc.offre à ses clients un service complet de conception et de synthèse de bibliothèques d'anticorps en ligaturant les répertoires de gènes V des chaînes lourdes et légères dans un vecteur phagique à l'aide du système de recombinaison site-spécifique Cre-lox. Ce système crée ainsi un répertoire de Fabs affichés sur un phage comprenant 6,5 × 10^10 clones. La bibliothèque a produit des anticorps dirigés contre de nombreux antigènes, dont certains présentent des affinités nanomolaires. La génération de la bibliothèque d'anticorps humains repose sur la technologie d'affichage sur phage M13 (illustrée dans la figure ci-dessous).