Service de construction de bibliothèques d'exposition de levures
Alpha Lifetech est spécialisée dans la construction de banques d'anticorps par criblage de levures, offrant à ses clients du monde entier la possibilité de générer différents types de banques de levures et de les cribler pour identifier des anticorps à haute affinité et spécifiques. Grâce à une équipe de chercheurs experts et à des technologies et équipements de pointe, nous sommes en mesure de construire des banques de levures ciblant un large éventail de protéines impliquées dans diverses maladies.
arrière-plan du système d'affichage de levure
Le système d'affichage sur levure est une technologie d'expression de protéines eucaryotes qui exploite le mécanisme de translocation intracellulaire des protéines (ancrage GPI) pour immobiliser et présenter des anticorps exogènes ou des gènes codant pour des protéines à la surface de la levure. Ce système possède un mécanisme complet de modification post-traductionnelle et de sécrétion des protéines, ce qui le rend particulièrement adapté au repliement, à la modification et au transport des protéines humanisées. Par conséquent, les anticorps produits par ce système sont plus proches des anticorps humains natifs, tant au niveau de leur conformation que de leur fonction, et offrent un potentiel prometteur pour le traitement des maladies.
Le système d'affichage sur levure permet la production d'anticorps spécifiques de protéines, de peptides, de petites molécules et de récepteurs de lymphocytes T. Ces anticorps présentent l'avantage d'être polyvalents, quantifiables et efficaces sur le plan thérapeutique. Les applications de cette technologie sont encore plus vastes : elle peut être utilisée non seulement pour la découverte d'anticorps, mais aussi pour le criblage de banques de protéines, l'évolution dirigée des protéines, la construction de banques d'antigènes, le tri d'anticorps à haute affinité, la maturation d'affinité des anticorps, la production de vaccins, l'immunobiocatalyse et les biocapteurs, etc., offrant ainsi de larges perspectives dans les domaines du diagnostic, du traitement des maladies et de la recherche médicale. De plus, les protéines produites par affichage antigénique à la surface de la levure sont plus proches de leur conformation naturelle, ce qui les rend idéales pour les tests sérologiques tels que l'ELISA.

Figure 1 : Principe d'affichage de la levure
Processus de construction d'une bibliothèque d'affichage de levure
Nos banques de levures présentent une grande capacité et une diversité élevée, ce qui constitue un atout majeur pour le criblage efficace de séquences d'anticorps spécifiques. Nous pouvons construire différents types de banques d'anticorps de levure (IgG, scFv, VHH, Fab), de protéines, de peptides, d'ADNc, etc., selon vos besoins. De plus, nous pouvons également développer des banques d'anticorps aux propriétés variées, notamment des banques d'anticorps immunologiques, naturels, synthétiques, semi-synthétiques et spécifiques de maladies. pYD est notre vecteur d'expression à la surface de levures le plus couramment utilisé.
Nous sommes capables de construire des banques de levures d'une capacité allant jusqu'à 10⁹ cellules, avec un taux d'insertion et une diversité de 100 %. Avant la livraison de chaque banque, nous effectuons une validation rigoureuse afin de garantir la diversité, l'intégrité et la fonctionnalité des gènes d'anticorps. Pour assurer une affinité et une spécificité très élevées des anticorps sélectionnés, nous utilisons une évaluation quantitative en temps réel. Le tri cellulaire par cytométrie en flux (FACS) permet de détecter quantitativement les variations d'expression et d'activité des anticorps, grâce à des marqueurs spécifiques présents sur l'anticorps et l'antigène, afin de déterminer la force de liaison et l'expression de l'anticorps à la surface des cellules de levure. Nous utilisons des tests de liaison par FACS pour sélectionner quantitativement les anticorps présentant une affinité et une sélectivité élevées. L'efficacité d'affichage de notre banque de nanocorps sur levures par FACS est supérieure à 95 %. Le criblage sur levures comprend généralement 3 à 5 cycles de sélection et d'enrichissement, ce qui nous permet d'obtenir des anticorps à haute affinité dans un délai court.
Le système d'affichage sur levure est devenu un outil puissant pour l'évolution dirigée des protéines. Alpha Lifetech propose des services d'expression, de purification et d'analyse cinétique d'expression pour la préparation d'anticorps spécifiques in vitro. Nous sommes en mesure de produire des protéines à grande échelle et d'améliorer efficacement la pureté des protéines recombinantes. Nous offrons un service complet, de la synthèse génique à l'expression et la purification des protéines recombinantes. Grâce à notre système d'affichage sur levure de pointe, nous avons réussi à produire des anticorps présentant une affinité picomolaire (pM) extrêmement élevée, ce qui représente une avancée majeure dans la technologie de préparation d'anticorps recombinants in vitro.

Fig. 2 Processus de construction de la bibliothèque d'affichage de levure
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16/07/2018 

