Aptamer Untwikkelingsplatfoarm

Aptameren binne ienstrengige oligonukleotiden (DNA, RNA of XNA) mei de eigenskip fan hege affiniteit en hege spesifisiteit dy't spesifyk bine oan doelmolekulen lykas antistoffen, en se wurde breed brûkt foar de ûntwikkeling fan biosensors, diagnoaze en terapy.

It aptamerplatfoarm levere troch Alpha Lifetech omfettet twa kategoryen: in aptamersyntezeplatfoarm, dat benammen SELEX aptamerbibleteeksyntezetsjinst en aptamer (DNA, RNA of XNA) ûntwikkelingstsjinst omfettet, en in aptamer-screeningplatfoarm ynklusyf screeningtsjinsten basearre op SELEX-technology foar aaiwiten, peptiden, sellen, lytse molekulen, metaalioanen en oare doelmolekulen, lykas downstream aptameroptimalisaasje en identifikaasje-analysetsjinsten.

Aptamer Synthese Platfoarm

SELEX aptamer bibleteek synteze tsjinst

De SELEX aptamerbibleteeksyntezetsjinst omfettet benammen it bouwen fan in bibleteek mei in grut oantal willekeurige ienstrengige oligonukleotidensekwinsjes troch in vitro gemyske synteze neffens de doelmolekulen. Bibleteekkonstruksje is it útgongspunt fan SELEX-technology, dy't in oerfloed oan kandidaatsekwinsjes leveret foar it folgjende screeningproses troch it bouwen fan enoarme willekeurige bibleteken en de mooglikheid fergruttet fan it screenen fan aptameren mei hege affiniteit.

Biblioteeksynteze is benammen ferdield yn de folgjende stappen:

Stappen	Technologydetails
Identifisearje doelmolekulen	Identifisearje de doelmolekulen dy't screene wurde moatte op aptameren, dy't aaiwiten, nukleïnsoeren, lytse molekulen, metaalioanen, ensfh. kinne wêze.
Untwerp fan willekeurich folchoarder	Willekeurige sekwinsjelingte, basiskomposysje en oare parameters waarden ûntwurpen neffens de skaaimerken fan doelmolekulen en screeningseasken. Typysk binne willekeurige sekwinsjes tusken tsientallen en hûnderten basen lang.
Synteze fan fêste sekwinsjes	Oligonukleotidfragminen mei fêste sekwinsjes (lykas PCR-primersekwinsjes) oan beide úteinen wurde ûntwurpen en synthetisearre, dy't brûkt wurde sille yn it folgjende amplifikaasje- en screeningproses.

De synthetisearre bibleteek moat noch fierder ferwurke wurde foar kwaliteitskontrôle. De konsintraasje fan 'e bibleteek waard bepaald om de tapassing dêrfan yn it folgjende screeningproses te garandearjen. De ferskaat en krektens fan willekeurige sekwinsjes yn 'e bibleteek waarden ferifiearre troch sekwinsjearring en oare metoaden om te soargjen dat de kwaliteit fan 'e bibleteek oan 'e screeningeasken foldie.

Troch de boppesteande stappen kin in heechweardige en tige ferskaat SELEX aptamerbibleteek synthetisearre wurde, dy't in oerfloed oan kandidaatsekwinsjes kin leverje foar it folgjende screeningproses.

Aptamerûntwikkelingstsjinsten (DNA, RNA of XNA)

Aptameren ferwize meastal nei nukleïnezuur-aptameren. Nukleïnezuur-aptameren omfetsje DNA-aptameren, RNA-aptameren, en XNA-aptameren, dat binne gemysk modifisearre nukleïnezuur-aptameren. De SELEX-technyk wurdt breed brûkt foar de ûntwikkeling fan aptameren. De basisworkflow fan aptamer-ûntwikkelingstsjinsten omfettet bibleteekkonstruksje, doelwitbinding, isolaasje en suvering, amplifikaasje, meardere screeningsrûndes, en sekwinsje-identifikaasje. Wy hawwe ús al jierren rjochte op bibleteekkonstruksje en hawwe in rike ûnderfining yn aptamer-ûntwikkeling. Wy binne ynsette om klanten bettere tsjinsten te leverjen.

SELEX Technology Proses

It SELEX-proses bestiet út meardere rûndes, dy't elk út de folgjende wichtige stappen besteane:

Biblioteek- en doelbinding

De konstruearre nukleïnezuurbibleteek wurdt mingd mei spesifike doelmolekulen (lykas aaiwiten, lytse molekuleferbiningen, ensfh.), sadat de nukleïnezuursekwinsjes yn 'e bibleteek de kâns hawwe om te binen oan 'e doelmolekulen.

Isolaasje fan net-bûne molekulen

Nukleïnezuursekwinsjes dy't net oan it doelmolekule bûn binne, wurde fan it mingsel skieden troch spesifike metoaden lykas affiniteitschromatografy, magnetyske kraalskieding, ensfh.

Amplifikaasje fan bindende molekulen

De nukleïnezuursekwinsje dy't oan in doelmolekule bûn is, wurdt amplifisearre, meastentiids mei help fan polymerasekettingreaksje (PCR)-technology. Foar de folgjende screeningsfaze wurde de amplifisearre sekwinsjes brûkt as de startbibleteek.

Fig. 1: SELEX-screeningproses

Aptamer Screening Platfoarm

Aptamer screeningtsjinst

Alpha Lifetech biedt in ferskaat oan spesjalisearre aptamer-screeningtsjinsten oan dy't ferskate SELEX-metodologyen tapasse foar ferskate soarten fan jo molekulen:

Doeltypen	Technyske details
Proteïne-aptamerscreening troch SELEX	It wichtichste doel fan proteïne-aptamerscreening is it screenen fan aptameren dy't spesifyk kinne bine oan doelproteïnemolekulen. Dizze aptameren binne ienfâldiger te synthetisearjen, stabiler en minder gefoelich foar miljeufaktoaren.
Peptide Aptamer Screening troch SELEX	Peptide-aptameren binne in klasse koarte peptidesekwinsjes mei hege spesifisiteit en affiniteit, dy't spesifyk kinne bine oan doelstoffen en in breed skala oan tapassingspotinsjeel sjen litte yn it biomedyske fjild. Troch in spesifyk screeningsproses wurde peptide-aptameren dy't spesifyk kinne bine oan doelmolekulen screene út in grut oantal willekeurige peptidesekwinsjebibleteken.
Selspesifike Aptamer Screening (Cell-SELEX)	Doelsellen of spesifike molekulen op it seloerflak wurde as doelen taret. Doelen kinne hiele sellen, reseptors op it selmembraan, aaiwiten of oare lytse molekulen wêze.
Screening fan lytse molekule-aptameren troch Capture SELEX	Capture SELEX is in in vitro screeningtechnyk foar it screenen fan lytse molekule-aptameren, in fariant fan SELEX. Capture SELEX is benammen geskikt foar aptamer-screening fan lytse molekule-doelen, dy't typysk minder funksjonele groepen hawwe en lestich direkt op fêste-faze-dragers te immobilisearjen binne.
SELEX-tsjinsten basearre op libbene bisten	In screeningtsjinst op basis fan libbene bisten is in eksperimintele technyk dy't in soad brûkt wurdt yn 'e sektoaren fan biowittenskip, medisinen en biotechnology, wêrby't libbene bisten brûkt wurde as eksperimintele modellen om spesifike molekulen, medisinen, terapeutyske middels of biologyske prosessen te screenen en te evaluearjen. De tsjinsten binne ûntworpen om de fysiologyske omjouwing yn it minsklik lichem te simulearjen om de effektiviteit en feiligens fan eksperimintele resultaten yn it minsklik lichem krekter te foarsizzen en te evaluearjen.

Aptamer-optimalisaasjetsjinst

De hydrofilisiteit, it hege affiniteitsferlies tidens de produksje, en de rappe útskieding fan aptameren beheine har tapassing. Op it stuit binne ferskate optimalisaasjemetoaden ûndersocht om de prestaasjes fan aptameren te ferbetterjen.

Wy hawwe ek ferskate manieren om aptamer te optimalisearjen, besteande út ôfkoarting, modifikaasjes, konjugaasje oan 'e passende groep (thiol, karboksy, amine, fluorofoor, ensfh.).

Aptamer karakterisaasje analysetsjinst

Aptamer-karakterisaasjeanalysetsjinst ferwiist nei de profesjonele tsjinst fan prestaasje-evaluaasje, struktuerresolúsje en funksjonele ferifikaasje fan 'e krigen aptamer om te soargjen dat de aptamer foldocht oan 'e spesifike easken foar bindingsfermogen, stabiliteit en spesifisiteit. It omfettet benammen affiniteits- en spesifisiteitsanalyse, stabiliteitsevaluaasje en ferifikaasje fan biologyske funksje.