Platfoarm foar faagdisplaypeptidebiblioteek

Basearre op faagdisplaytechnology kin Alpha Lifetech klanten tsjinsten leverje foar it bouwen en screenen fan faagdisplaypeptidebibleteken fan hege kwaliteit, ynklusyf lineêre 7-peptidebibleteken, lineêre 9-peptidebibleteken, lineêre 10-peptidebibleteken, lineêre 15-peptidebibleteken, lineêre 12-peptidebibleteken, sykliske 7-peptidebibleteken en oare peptidebibleteken. De ferskaat oan bibleteken, it ynfoegingssifer en it positive taryf kinne mear as 90% berikke, om te foldwaan oan de ferskate behoeften fan ferskate klanten foar faagdisplaypeptidebibleteken.

Faagdisplaybibleteken wurde in soad brûkt yn biomedysk ûndersyk en tapassingen. Bygelyks, yn antistoftechnyk en antistofûntwikkeling kinne faagdisplaybibleteken brûkt wurde om antistoffarianten te screenen en te ferbetterjen; yn medisynscreening en ûntdekking fan medisyndoelen kinne faagdisplaybibleteken brûkt wurde om te sykjen nei aaiwiten of peptiden mei medisynpotinsjeel. Yn faksinûndersyk kin faagdisplaybibleteek brûkt wurde foar faksinantigenseleksje en faksinûntwikkeling. Derneist kinne faagdisplaybibleteken ek brûkt wurde yn in protte fjilden lykas ûndersyk nei aaiwytynteraksje, kankerdiagnoaze en -behanneling.

Faagwerjeftetechnology

Faagdisplaytechnology is in technology dy't it doelproteïnegen fusearret mei it faagoppervlakteproteïnegen, en it doelproteïne oanwêzich makket op it faagoppervlak yn 'e foarm fan in fúzjeproteïne troch genekspresje. Dizze proteïnen dy't werjûn wurde op it faagoppervlak kinne in relative romtlike struktuer en biologyske aktiviteit behâlde, en kinne wurde screene, detektearre en erkend troch ynteraksje mei spesifike antistoffen of oare molekulen. De displayobjekten fan faagdisplaytechnology omfetsje antistoffen, antistoffragmenten, peptidesegminten, cDNA, ensfh.

It systeem fan faagdisplaytechnology omfettet benammen M13-faagdisplaysystemen (lykas PⅢ-displaysystemen, PⅧ-displaysystemen, ensfh.), λ-faagdisplaysystemen, T4-faagdisplaysystemen, T7-faagdisplaysystemen, ensfh. Elk fan dizze systemen hat syn eigen skaaimerken en is geskikt foar ferskate ûndersyksbehoeften. M13-faag, fanwegen syn lysogene eigenskippen, lysearret M13-faag de gasthearsel net nei't er ynfektearre is, wêrtroch't it kontinu frjemde fragminten binnen de gasthearsel kin replikearje en ekspressearje, geskikt foar lange-termyn screening en stabile ekspresje. Fanwegen syn koarte libbensduur en hege replikaasje-effisjinsje kin T7-faag rap in grut oantal neiteamfagen produsearje, wat geskikt is foar hege-trochput screening en rappe ekspresje.

	M13 Faag	T7 Faag
1. Morfologyske struktuer	Filamenteuze faag	Polyhedrale faag
2. Genetysk materiaal	Sirkulêr ienstrengich DNA-molekule	Lineêr, dûbelstrengs, terminaal oerstallich DNA
3. Replikaasje en ynfeksje	Lysogene fagen, gearstald yn periplasma, kinne útskieden wurde út baktearjele membranen sûnder gasthearsellen te lysearjen.	Virulente fagen, neiteam fan fagen dy't yn it baktearjele cytoplasma gearstald binne, wurde frijlitten troch selmembraanlyse.
4. Displaysysteem	In werjeftesysteem waard konstruearre mei pIII- en PVIII-kapsideproteïnen, geskikt foar it werjaan fan frjemde peptiden/proteïnen fan ferskate grutte.	It werjaansysteem is makke mei 10B-kapsideproteïne, dat gjin sekresjeproses fereasket en geskikt is foar it werjaan fan peptiden/proteïnen dy't in remmende effekt hawwe op it sekresjeproses.
5. Foardiel fan tapassing	It is geskikt foar it werjaan en lange-termyn screening fan lytse molekulepeptiden.	It hat foardielen yn 'e rappe ekspresje en hege trochput screening fan makromolekulêre proteïnen.

Typen fan Phage Display Peptide Library

Alpha Lifetech hat ûnderfining mei it bouwen en screenen fan faagdisplay-peptidebibleteken en hat in ferskaat oan peptidebibleteektypen om út te kiezen. Neffens de lingte fan it peptide kin it wurde ferdield yn 7 peptidebibleteken, 9 peptidebibleteken, 10 peptidebibleteken, 12 peptidebibleteken en 15 peptidebibleteken. Neffens de romtlike konformaasje fan polypeptiden kin it wurde ferdield yn lineêre faagpeptidebibleteken en sykliske faagpeptidebibleteken.

Lineêre faagpeptidebibleteek

It peptidegen wurdt ynfoege yn 'e kodearjende regio foar de mantelproteïne fan it faaggenoom, meastentiids pIII of PVIII, en wurdt werjûn as in lineêre rjochte keten. Lineêre lineêre ketenpeptiden kinne maklik yn vivo ôfbrekke, en har bindingsfermogen en stabiliteit kinne beynfloede wurde.

sykliske faagpeptidebibleteek

It modifisearre ringpeptide sil in fêste konformaasje foarmje ûnder de aksje fan disulfidebiningen of oare binende biningen, dy't net allinich de metabolike stabiliteit en biobeskikberens sterk ferbetterje, mar ek better foldogge oan de binende easken fan reseptor-ligand (antistof-antigen) konformaasje.

Proses fan faagdisplaypeptidebiblioteek

Seleksje fan fagen

M13-type fagen of T7-type fagen wurde meastentiids selektearre as dragers.

Konstruksje fan faagdisplaypeptidebibleteek

Konstruearje in faagvektor dy't in kodearjende sekwinsje foar in frjemd proteïne of polypeptide befetsje kin, dy't meastentiids in promotor, selektive markers en passende regeljouwingseleminten omfettet. It ynfoegjen fan 'e kodearjende sekwinsje fan in frjemd proteïne of peptide yn in faagdrager, meastentiids troch metoaden foar it snijen en ligearjen fan beheiningen mei in enzyme. De konstruearre faagvektor wurdt transformearre yn 'e gasthearsel, wêrtroch't de faag frjemde proteïnen of peptiden binnen de sel replikearje en ekspressearje kin. Faagbibleteken mei meardere ferskillende frjemde proteïnen of peptiden wurde taret troch wiidweidige transformaasje en amplifikaasje.

screening fan faagdisplay-peptidebibleteek

Befestigje doelmolekulen (lykas proteïnen, reseptors of antistoffen) op in fêste-faze drager. Ynkubearje de konstruearre faagdisplaypeptidebibleteek mei in fêst doelwyt om de peptiden op 'e faag te litten bine oan it doelmolekule. Tidens dit proses wurde net-bûne bakteriofagen fuorthelle troch waskjen, wylst bakteriofagen dy't oan it doelwyt bine, bewarre bliuwe, en wurde bakteriofagen mei hege affiniteit eluearre. De weromwûne bakteriofagen wurde amplifisearre troch Escherichia coli te ynfektearjen en dan ûnderwurpen oan de folgjende screeningsronde. It duorret meastal 3-5 screeningsrondes om peptiden mei hege bindingseffisjinsje te krijen.

Peptide-ûntwerp en synteze

Peptiden synthetisearje op basis fan screeningsites.

Fig.1 Konstruksje en screeningproses fan faagdisplaypeptidebibleteek

Relatearre platfoarm

Alpha Lifetech kin klanten tsjinsten foar de bou en screening fan heechweardige faagdisplaypeptidebibleteken leverje.

faagdisplay-antistofbibleteek - Alpha Lifetech

Platfoarm foar de bou fan in faagdisplay-peptidebibleteek

Alpha Lifetech hat in oantal technologyen foar it bouwen fan peptidebibleteken. Wy leverje benammen T7-peptidebibleteekboutsjinsten en M13-peptidebibleteekboutsjinsten neffens faagtypen.

LÊS MEAR

screening fan faagdisplay-Alpha Lifetech screening fan faagdisplay-Alpha Lifetech

Platfoarm foar screening fan faagdisplaypeptidebibleteek

Alpha Lifetech hat rike ûnderfining yn screening fan peptidefagebibleteken, en biedt sterke technyske stipe foar it ûntdekken fan medisinen mei lytse molekulen, klinyske diagnoaze, syktebehanneling en biologysk ûndersyk.

LÊS MEAR