scFv-antistofûntdekkingstsjinst

Alpha Lifetech Inc.is grutsk om wiidweidige SCFV-biblioteekboutsjinsten oan te bieden om te foldwaan oan 'e ferskate behoeften fan wrâldwide wittenskippers. Us doel is om te begripen en te foldwaan oan 'e easken fan ferskate klanten en om te helpen mei alle kommende en opkommende problemen yn ûndersykswurk.

Wat is scFv - Single Chain Variable Fragment Antibody?

In ienkettige antistof bestiet út in antistoffariabele ljochte (VL) en swiere (VH) fragmint dy't ferbûn binne troch in fleksibele peptidelinker, dy't maklik útdrukt wurde kin yn in funksjonele foarm op it oerflak fan in faag en dêrom algemien bekend is as in ienkettige fariabele fragmint (scFv). It scFv-fragment is de lytste ienheid fan immunoglobulinemolekule (útsein nanobodies) mei funksje yn antigeen-binende aktiviteiten en makket proteïne-engineering mooglik om de eigenskippen fan scFv (ienkettige fragmintfariabele) te ferbetterjen, lykas ferheging fan affiniteit en feroaring fan spesifisiteit. Yn Alpha Lifetech Inc. binne scFv-antistoffen benammen konstruearre út hybridoma, miltsellen fan immunisearre mûzen en B-lymfocyten fan minsken. Totaal RNA of mRNA wurdt earst isolearre út hybridoma, milt, lymfsellen en bienmergsellen, folge troch reverse transkribearre yn cDNA om te tsjinjen as in sjabloan foar antistofgenamplifikaasje (PCR).

scFv-antistofûntwikkeling-faagdisplaytechnology

De ferskaat fan in bibleteek wurdt bepaald troch it oantal ûnôfhinklike klonen. Om in grutte scFv-antistofbibleteek te produsearjen, sille ús wittenskippers ús eigen twa-stap strategy brûke foar bibleteekgeneraasje. Yn 'e earste stap fan' e beskreaune proseduere wurde primêre repertoires taret út PCR-produkten dy't kodearje foar de VH-, Vκ- en Vλ-domeinen, wêrtroch typyske middelgrutte bibleteken (1 - 100 miljoen klonen) ûntsteane. Yn 'e twadde stap wurde VH (of VL)-fragminten isolearre troch spiisfertarring fan plasmide-DNA dat suvere is út 'e primêre repertoires en kloond yn' e akseptorfagemidvektor dy't de VL (of VH)-repertoires befettet. Dizze ynnovaasje fergruttet de grutte fan 'e bibleteken dramatysk (10¹⁰-10¹²klonen).

Grutskalige en hege trochputscreening fan scFv-antistoffen

Foar grutskalige tarieding fan scFv is it dúdlik dat de kar fan ekspresjegasthear in wichtige ynfloed sil hawwe op prosesûntwerp, downstream-ferwurkingsstrategyen en proseskosten. De kar fan produksjerûte sil ôfhinklik wêze fan 'e relevânsje fan post-translasjonele modifikaasje en tiidline foar klinyske ûntwikkeling en ekonomy, dy't ek yn essinsje ôfhinklik binne fan it 'gasthearsysteem'. Der is gjin universeel ekspresjesysteem dat hege produktekspresjenivo's garandearret foar in breed skala oan ferskillende antistoffen of sels proteïnen.