Réamhrá ar Sheirbhís Taispeána Fagaí

Tá taispeántas fagaí, mar theicníc mhóilíneach atá bunaithe ar mhodhnú géiniteach DNA fagaí, ina uirlis chumhachtach ó thaobh na móilíneacha de chun tóireadóirí móilíneacha a ghiniúint i gcoinne spriocanna sonracha trí na blúirí seo a chur i láthair ar dhromchla an fhagaí agus ar an gcaoi sin blúirí peiptíde/antasubstaint a bhfuil airíonna ceangailteach sonracha acu a roghnú ó líon mór malairtí (leabharlanna).

Tá deich mbliana de thaithí ag Alpha Lifetech i bhforbairt antashubstaintí taispeána fagaí agus is féidir leo seirbhís ghairmiúil tógála agus scagthástála leabharlann antashubstaintí a sholáthar dár gcliaint. De réir riachtanais na gcustaiméirí, is féidir linn cineálacha éagsúla leabharlann antashubstaintí a sholáthar, amhail leabharlanna imdhíonachta, leabharlanna dúchasacha, leabharlanna sintéiseacha agus leabharlanna leathshintéiseacha. Is í teicneolaíocht leabharlainne taispeána fagaí, a chumascann géinte antashubstaintí le géinte próitéiní cóta fagaí amhail M13, an teicneolaíocht ullmhúcháin antashubstaintí athchuingreach is coitianta agus úsáidtear go forleathan í i bhforbairt antashubstaintí an-shonracha.

Déanfaidh Alpha Lifetech imdhíonadh ar alpaca, llama, alpaca, agus siorcanna, etc., ionas go sroichfidh a n-éifeachtúlacht 10^5. Seolfaimid an tuarascáil tástála éifeachtúlachta chuig an gcustaiméir chun bailíocht agus barántúlacht na sonraí a chinntiú. Tá buntáistí ag baint le leabharlanna dúchasacha maidir le tocsaineacht íseal agus imdhíonacht íseal. Tá líon mór leabharlanna antashubstaintí dúchasacha réamhdhéanta ag Alpha Lifetech, ar féidir iad a úsáid go díreach le haghaidh scagthástála antashubstaintí gan na hainmhithe a imdhíonadh, rud a ghiorraíonn am an tionscadail, a chuireann dul chun cinn thriail an chliaint chun cinn, agus a ráthaíonn sláine fheidhmiúil an antashubstaintí.

fionnachtain antashubstainte-Alpha Lifetech

Figiúr 1: Prionsabal taispeána fagaí

Ár gCóras Taispeána Fagaí

Taispeántar príomhfhaisnéis an chórais taispeána faga M13/T4/T7 i dTábla 1.

Tábla 1 Feithiclí taispeána fág éagsúla agus a dtréithe
	M13	T4	T7
Méid an Ghéanóim	6407 bp	168895 bp	39937 bp
Próitéin Taispeána	pVI, pIII agus pVIII	SOC agus HOC	gp10B
Méid Taispeána	>110 kDa is pIII é
Méid Taispeána
Dlús Taispeána
Dlús Taispeána
Timthriall Saoil	Líosóigineacht	Lític	Lític

Is féidir le Alpha Lfetech soláthar a dhéanamh

Tugann Taispeántas Fagaí an géinitíopa agus an feinitíopa le chéile in aon cheann amháin, ag comhcheangal roghnaíochta agus aimplithe le cumais scagthástála chumhachtacha. Is féidir le Alpha Lifetech réimse leathan seirbhísí a sholáthar le haghaidh forbairt antashubstaintí taispeántais fagaí.
Áirítear ar na príomhsheirbhísí: ardán leabharlainne antashubstaintí VHH, ardán leabharlainne antashubstaintí scFv, ardán leabharlainne antashubstaintí Fab, ardán tógála leabharlainne fagaí, ardán scagthástála leabharlainne fagaí agus seirbhís dhaonnúcháin antashubstaintí agus seirbhísí eile.

forbairt antashubstaintí - Alpha Lifetech

Fíor 2: Próiseas seirbhíse forbartha taispeántais phage

Próiseas Forbartha Antashubstaintí Taispeána Fagaí

Is féidir linn ainmhithe a imdhíonadh le próitéiní a chuirtear in iúl inár saotharlann nó a sholáthraíonn ár gcliaint, lena n-áirítear próitéiní macramóilíní éagsúla, peiptídí agus próitéiní membrane. Trí thástáil éifeachtúlachta ELISA, rinne ár dtaighdeoirí aonrú PBMC agus eastóscadh RNA ó fhuil alpacaí leis na torthaí imdhíonta is fearr. Trí thrascríobh droim ar ais agus aimpliú géine, thógamar an géin ar veicteoirí faga pMESC, pComb3XSS nó pCANTAB 5E. Trí leictrea-chlaochlú cealla inniúla TG1 E. coli, is féidir leabharlanna antashubstaintí faga a bhfuil acmhainn leabharlainne níos mó ná 10^9 acu a fháil. Tá éagsúlacht mhaith ag leabharlanna antashubstaintí a bhfuil acmhainn leabharlainne mhór acu agus cabhraíonn siad le hantashubstaintí a bhfuil claonadh acu a aimsiú. Chun cáilíocht na leabharlainne antashubstaintí a chinntiú, déanfaimid tréithriú ar acmhainn na leabharlainne agus ar ráta iontrála na leabharlainne. Ar deireadh déanaimid seicheamhú ar na leabharlanna chun na 30-50 seicheamh riachtanach a sholáthar dár gcliaint. Ansin, déanaimid scagadh ar leabharlann taispeána fagaí. Ar dtús, déantar an antaigin a dhíghluaiseacht ar mhicreaphlátaí polapróipiléine, agus trí 3-5 bhabhta scagthástála, baintear na hantashubstaintí fagaí a bhfuil cumas ceangailteach lag acu, agus coinnítear na clóin shonracha a cheanglaíonn leis an antaigin. Chun taispeántas fagaí a dhéanamh, úsáidtear an modh ELISA chun clón dearfach a fháil, agus i gcás taispeána giosta, úsáidtear an modh FACS chun blúirí antashubstaintí athchuingreacha a thaispeáint sna cealla ag baint úsáide as antaiginí lipéadaithe. Trí scagadh, ullmhaímid antashubstaintí a bhfuil íogaireacht, sainiúlacht agus claonadh ard acu.

Fíor 3 Próiseas sintéise antashubstainte taispeána faga

BUNTÁISTÍ Seirbhíse
Buntáistí SEIRBHÍSE

Tá Alpha Lifetech tiomanta go mór do theicneolaíocht taispeána fagaí, agus is féidir léi seirbhísí fagaí níos leithne agus níos fearr a sholáthar do chustaiméirí.

Tréimhse ama agus éifeachtúlacht ard

Is féidir lenár gcuideachta cuardach a dhéanamh ar antasubstaintí sásúla i mbeagán ama; is féidir linn turgnaimh scagthástála antasubstaintí éagsúla a dhéanamh de réir riachtanais na gcustaiméirí.

Ardchaighdeán táirge

Cuidíonn ár gcuideachta le custaiméirí antashubstaintí a ullmhú a bhfuil sainiúlacht agus cobhsaíocht ard acu, rud a mhéadaíonn aschur thorthaí taighde eolaíoch.

Cuir réimse roghanna ar fáil

Is féidir lenár gcuideachta leabharlanna antashubstaintí ilspeiceas (daonna, luch, coinín, alpaca, srl.) a thógáil agus is féidir leo réimse cineálacha leabharlanna antashubstaintí (scfv, Fab, VHH, srl.) a thógáil.

Cumas Mór

Tá acmhainn mhór ag ár leabharlann antashubstaintí de níos mó ná 10^9 antashubstaint.

Ceisteanna Coitianta - Fadhbanna ginearálta taispeántais phage

Ceisteanna taispeántais phage ◢

C.
Cad is teicneolaíocht taispeána phage ann?

A.
Is éard atá i dteicneolaíocht taispeána fagaí ná an géin sprice coigríche a chur isteach i suíomh sonrach próitéine capsíde an fhagaí, agus an géin coigríche a chur in iúl ar dhromchla an fhagaí gan cur isteach ar ghnáthfheidhm an fhagaí. Tar éis roinnt babhtaí scagthástála, fuarthas an próitéin sprice le sainiúlacht láidir agus gníomhaíocht bhitheolaíoch ard sa deireadh.
C.
Cad iad na buntáistí a bhaineann le teicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Is féidir leabharlanna antashubstaintí ardacmhainne a ghiniúint ag baint úsáide as an teicneolaíocht seo. Tá an timthriall scagthástála gearr, tá an próiseas oibríochta simplí, agus tá raon feidhme fairsing ann, rud a chuireann ar chumas seichimh is fearr a aithint le haghaidh peiptídí nó próitéiní spriocdhírithe. In iarratais a bhaineann le víris, is féidir le taighdeoirí antashubstaintí a aimsiú a cheanglaíonn le heipitóip víreasacha ríthábhachtacha trí leabharlanna móra antashubstaintí a scagadh. Is féidir leis an bpróiseas seo bac a chur ar iontráil, ar mhacasamhlú, nó ar mheicníochtaí imdhíonachta víris, rud a leagann bunús le haghaidh cóireála galair.
C.
Cad é an difríocht idir teicneolaíocht hibridóma agus teicneolaíocht phage?

A.
Úsáidtear teicneolaíocht taispeána fagaí níos forleithne ná teicneolaíocht hibridóma, atá teoranta do chainníocht bheag antashubstaintí a tháirgeadh i gcoinne imdhíonóiginí sonracha. I gcodarsnacht leis sin, is féidir le teicneolaíocht taispeána fagaí leabharlann iomlán antashubstaintí a chur i láthair a dhíorthaítear ó speicis imdhíonachta éagsúla.
C.
Cad iad na feidhmeanna atá ag teicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Tá réimse leathan feidhmchlár ag teicneolaíocht taispeána fagaí, lena n-áirítear scagadh a dhéanamh ar ghabhdóirí miocrorgánach pataigineach, staidéar a dhéanamh ar idirghníomhaíochtaí próitéine, rianú a dhéanamh ar tharchur comharthaí idir cealla, galair ainmhithe a dhiagnóisiú, agus vacsaíní a fhorbairt, i measc réimsí eile.
C.
Ionchas teicneolaíochta taispeána phage?

A.
Tá buntáistí iomadúla ag baint le teicneolaíocht taispeána fagaí agus is féidir í a chur i bhfeidhm i réimsí éagsúla. Mar sin féin, is í an phríomhdhúshlán maidir le hantashubstaintí athchuingreacha a fhorbairt ag baint úsáide as an modh taispeána fagaí ná an chastacht agus an costas a bhaineann leis an bpróiseas. Éilíonn an cur chuige seo comhtháthú teicnící bitheolaíochta móilíní, lena n-áirítear sóchán, clónáil agus léiriú, mar aon le hanailísí imdhíoneolaíocha, bithcheimiceacha agus bithfhisiceacha chun na hantashubstaintí atá ag teastáil a aithint agus a thréithriú.

Ceisteanna a bhaineann le hantaiginí ◢

C.
Cad iad na modhanna cur i láthair antaiginí?

A.
Is nasc an-tábhachtach é cur i láthair antaigin. Áirítear ar na modhanna cur i láthair antaigin go príomha cur i láthair antaigin brataithe go díreach, cur i láthair antaigin brataithe go hindíreach, cur i láthair antaigin trí scagadh cille iomláin, cur i láthair antaigin trí liposóim, dioscaí nana-fhosfailipid agus VLPanna.
C.
Cad iad na difríochtaí idir na cineálacha éagsúla cur i láthair antaigin?

A.
Tá an modh sciath dhíreach réasúnta simplí, ach is furasta comhréireacht an antaigin a athrú, agus tá an oibríocht sciath indíreach casta, ach is féidir leis comhréireacht an antaigin a choinneáil agus éifeachtúlacht an chur i láthair a fheabhsú. Is féidir le scagadh cille an radharc fíor a insamhladh in vivo, ach tá fadhb ann maidir le ceangal neamhshonrach. Tá méid beag, éifeachtúlacht ard seachadta agus dea-chobhsaíocht ag diosca nana-fosfailipid; déantar VLPanna a chumasc le hantaigin nó a fhilleadh le hantaigin, a bhfuil imdhíonacht ard agus sábháilteacht mhaith aige, agus is féidir leis freagairt láidir imdhíonachta a spreagadh.
C.
Cad é an tionchar a bhíonn ag tiúchan antaigin ar thorthaí scagthástála na teicneolaíochta taispeána fagaí?

A.
Má tá an tiúchan ró-íseal, laghdóidh an dóchúlacht go gceanglóidh sé leis an bhfagach, rud a laghdóidh éifeachtúlacht scagthástála. Os a choinne sin, féadfaidh tiúchan thar a bheith ard an dóchúlacht go gceanglófar go neamhshonrach a mhéadú, an comhartha cúlra a ardú, agus bac a chur ar shainaithint clón dearfach.
C.
Conas is féidir linn a chinntiú go gcoinníonn an t-antaigin a chruth nádúrtha le linn an phróisis scagthástála?

A.
Is féidir modh socraithe éadrom a ghlacadh chun teocht ard, aigéad láidir agus alcailí a sheachaint. Baineadh úsáid as modh sciath indíreach agus córas biotin-streptavidin chun an damáiste do struchtúr an antaigin a laghdú. Más próitéin membrane an antaigin, is féidir é a thaispeáint ar dhromchla cealla slána nó a úsáid chun timpeallacht an membrane a insamhladh, amhail nana-dhiosca, chun a chumraíocht nádúrtha próitéine membrane a choinneáil.
C.
Conas sainiúlacht cheangailteach antashubstaintí a scagthástáiltear le teicneolaíocht taispeána faga le hantaiginí a fhíorú?

A.
Chomh maith le turgnaimh ghnáthaimh amhail ELISA, Western Blotting (WB), agus Immunofluorescence (IF), is féidir teicnící braite Athshondais Phlasmóin Dhromchla (SPR) agus Idirfheiriméadracht Bhithchiseal (BLI) a úsáid chun próisis cheangailteach agus dícheangailte antashubstaintí agus antaiginí a mhonatóiriú i bhfíor-am, rud a chuireann ar chumas paraiméadair chlaontachta agus cinéiteacha a chinneadh.

Ceisteanna a Bhaineann leis an Imdhíonacht ◢

C.
Cad iad na freagairtí imdhíonachta ginearálta a bhíonn ag ainmhithe i dteicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Is féidir taispeántas fagaí a úsáid chun antasubstaintí monachlónacha ardchlaontachta a ghiniúint do raon leathan speiceas a tháirgeann antasubstaintí, lena n-áirítear, ach gan a bheith teoranta dóibh, daoine, lucha, francaigh, coiníní, sicíní, camaill, alpacaí, ba, madraí, caoirigh, moncaí agus siorcanna.
C.
Cad iad tréithe agus cásanna infheidhme leabharlanna antashubstaintí a dhíorthaítear ó speicis éagsúla ainmhithe i dteicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Tá teicneolaíocht thógála leabharlanna antashubstaintí lucha seanbhunaithe, cost-éifeachtach, agus tá tréimhse ghearr turgnamhach aici, rud a fhágann go bhfuil sí oiriúnach le haghaidh scagthástála réamh-antasubstaintí agus taighde bunúsach. Taispeánann antashubstaintí coinín claonadh agus sainiúlacht láidir, le raon aitheantais eipitóp níos leithne i gcomparáid le hantashubstaintí lucha. Is féidir antashubstaintí daonna a fháil go díreach ó leabharlanna antashubstaintí daonna, rud a sheachnaíonn imoibrithe imdhíonachta féideartha a d'fhéadfadh tarlú nuair a thugtar antashubstaintí heitrealógacha don chorp daonna. Tá luach suntasach ag an gcur chuige seo i dtaighde agus i bhforbairt drugaí, go háirithe i gcruthú antashubstaintí teiripeacha.
C.
Cad é an t-imdhíonghin ainmhíoch ginearálta a úsáidtear i dteicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Go ginearálta, roinntear imdhíonghiní ainmhithe ina n-antaigin próitéine, antagin polaipeiptíde, antagin aigéid núicléasaigh agus antagin a bhaineann le pataigin, agus ina measc sin áirítear leis an antagin a bhaineann le pataigin antagin víris (cáithnín víris iomlán, próitéin víris, próitéin neamhstruchtúrtha víris, srl.), antagin baictéarach (sliocht baictéarach iomlán, comhpháirt bhalla cealla, próitéin rúnda, tocsain, srl.) agus antagin seadáin.
C.
Conas is féidir linn aghaidh a thabhairt ar cheist na caoinfhulaingthe imdhíonachta in ainmhithe le linn na freagartha imdhíonachta?

A.
Coigeartaigh imdhíonghineacha trí antaiginí imdhíonachta a chur in ionad próitéiní athchuingreacha agus trí cháithníní víris comhraicthe dóiteáin a chur in ionad próitéiní struchtúracha víris. Coigeartaigh an dearadh turgnamhach agus modhnaigh an dáileog imdhíonachta.
C.
Conas is féidir imdhíonacht imdhíonóiginí a fheabhsú i dteicneolaíocht taispeána fagaí?

A.
Is féidir imdhíonacht a fheabhsú trí antaiginí a nascadh le próitéiní iompróra, amhail albaimin séiream bólachta. Ina theannta sin, is féidir cúntóirí imdhíonachta, lena n-áirítear cúntóir Freund agus cúntóir alúmanaim, a úsáid chun an t-am fanachta in vivo a fhadú agus gníomhachtú agus iomadú cealla imdhíonachta a spreagadh, rud a fheabhsaíonn imdhíonacht.

Ceisteanna Tógála Leabharlainne ◢

C.
Cad is leabharlann antashubstaintí faga ann?

A.
Is bailiúchán d'antasubstaintí éagsúla fáige í leabharlann antashubstaintí fáige a chruthaítear trí shraith iomlán géinte réigiúin athraitheacha ó antashubstaintí a chur le chéile i veicteoirí fáige agus iad a chur in iúl ar dhromchlaí fáige. Mar thoradh ar an bpróiseas seo, cruthaítear leabharlann antashubstaintí fáige.
C.
Próiseas chun leabharlann antashubstaintí faga a thógáil

A.
Tá roinnt céimeanna tábhachtacha i gceist leis an bpróiseas ginearálta taispeántais fagaí: cealla monanúicléacha fola imeallacha (PBMC) a bhaint as ainmhithe imdhíonta, RNA iomlán a leithlisiú agus é a thras-scríobh ina DNA comhlántach (cDNA), an géin sprice a aimpliú ag baint úsáide as teicneolaíocht imoibriú slabhra polaiméaráise (PCR), an géin sprice a chlónáil i veicteoir fagaí, agus an veicteoir a chlaochlú ina chill óstach le haghaidh léirithe. Mar thoradh ar an bpróiseas seo, tógtar leabharlann taispeántais fagaí, ar féidir léi antashubstaintí ardchlaontachta a aithint go tapa. Ina dhiaidh sin, is féidir leis an leabharlann seo a bheith ina hacmhainn luachmhar chun vacsaíní, drugaí teiripeacha, agus imoibrithe diagnóiseacha a fhorbairt.
C.
Cad iad na príomhphointí maidir le leabharlann ardchaighdeáin a thógáil?

A.

Cinntigh go bhfuil líon iomlán na PBMC leordhóthanach. Cinntigh cáilíocht an RNA gan díghrádú.

Chun líon iomlán na gclaochlaitheoirí a chinntiú, is gnách go mbíonn acmhainn na leabharlainne 10 go 100 uair níos mó ná an éagsúlacht theoiriciúil.
C.
Cad iad na haicmithe ar leabharlann antashubstaintí faga?

A.
De réir fhoinse na leabharlainne antashubstaintí, is féidir leabharlanna antashubstaintí faga a chatagóiriú i leabharlanna antashubstaintí faga imdhíonachta agus leabharlanna antashubstaintí faga dúchasacha. Is é an príomhdhifríocht idir an dá chineál seo ná cibé an bhfuil na hainmhithe vacsaínithe. Ina theannta sin, is féidir leabharlanna antashubstaintí dúchasacha a ghiniúint trí leathshintéis nó sintéis.
C.
Conas is féidir le duine cáilíocht leabharlann antashubstaintí faga a mheas?

A.
Tá dhá phríomhinnéacs ann chun cáilíocht leabharlann antashubstaintí a mheas: acmhainn stórála agus éagsúlacht. Cinntíonn acmhainn stórála mhór, in éineacht le héagsúlacht ard, scagadh éifeachtach ar antashubstaintí a bhfuil ard-chlaonadh agus sainiúlacht araon acu.

Ceisteanna Scagtha Leabharlainne ◢

C.
Cad é an próiseas chun leabharlann antashubstaintí faga a scagadh?

A.
Le linn an phróisis elutriation bitheolaíoch, déantar an leabharlann taispeána a ghoradh le spriocanna seasta agus ansin nitear go fairsing í chun fagaí neamh-imoibríocha a bhaint. De ghnáth, déantar comhchuingigh a elutáil ag baint úsáide as tuaslagán aigéadach nó ard-salann agus ina dhiaidh sin déantar iad a aimpliú i gcealla óstacha oiriúnacha le haghaidh saibhrithe. Tar éis 3 go 5 bhabhta scagthástála, faightear antashubstaintí a bhfuil ard-chlaonadh acu.
C.
Cad iad na modhanna a úsáidtear chun leabharlanna antashubstaintí faga a scagadh?

A.
Áirítear ar na modhanna scagthástála fagaí go príomha panáil céim sholadaigh, scagthástáil céim leachtach, agus scagthástáil cheallbhunaithe. Ba cheart go gcuirfí tréithe na móilíní sprice, cuspóirí an phróisis scagthástála, agus timpeallacht na saotharlainne san áireamh agus modh scagthástála cuí á roghnú.
C.
Cad iad na scagthástálacha dearfacha agus diúltacha ar fhagaigh?

A.
Is é scagadh dearfach an modh is bunúsaí chun antashubstaintí faga a scagadh a cheanglaíonn le próitéiní sprice. Is é aidhm scagadh diúltach antashubstaintí neamhshonracha a dhíchur. Le linn an phróisis scagthástála antashubstaintí faga, féadfar antashubstaintí neamhshonracha a aithint mar gheall ar chur isteach ón lipéad antaigin sprice, ó ábhair, nó ó antaiginí eile a bhfuil cosúlachtaí struchtúracha acu leis an antaigin sprice. I gcásanna den sórt sin, is féidir le scagadh diúltach éifeachtúlacht an phróisis scagthástála a fheabhsú.
C.
Conas scagthástáil antashubstaintí neamhshonracha a sheachaint?

A.

Is féidir tús áite a thabhairt d’antaiginí atá lipéadaithe le cineálacha éagsúla marcóirí le haghaidh scagthástála tosaigh, nó is féidir scagthástáil dhiúltach a úsáid chun cion na n-antasubstaintí neamhshonracha a laghdú.

Is féidir leat rogha a dhéanamh an sreabhán séalaithe cuí a athsholáthar nó sreabháin séalaithe difriúla a úsáid chun an cás seo a chosc. Má dhéantar scagadh ar an antashubstaint a aithníonn an líne chealla cúlra (CHO nó HEK293), is féidir leat línte cealla cúlra difriúla a chur ina n-ionad chun críocha scagthástála nó scagthástála diúltach.
C.
Conas is féidir le duine na hantashubstaintí a fhaightear a fhíorú agus a anailísiú?

A.
De ghnáth, áirítear ar na modhanna chun antashubstaintí a fhíorú ELISA, Western Blotting (WB), sreabhchítiméadracht, imdhíon-dheascán (IP), imdhíonfhluaraiseacht (IF), imdhíon-histea-cheimic, agus teicnící turgnamhacha éagsúla eile. Tá taithí fhairsing ag Alpha Lifetech i mbraith antashubstaintí agus tá foireann turgnamhach ghairmiúil aici, rud a chinntíonn éifeachtacht na n-antasubstaintí i dturgnaimh ina dhiaidh sin.

Má tá aon cheist agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn am ar bith.

Leave Your Message

Seirbhís Réadmhaoin

Ardán Fionnachtana Antashubstaintí