Cad is Innealtóireacht Antashubstaintí ann?

Le cabhair ó innealtóireacht antashubstaintí, bhí sé indéanta méid móilíneach, cógaschinéitic, imdhíonacht, gaol ceangailteach, sainiúlacht agus feidhm éifeachtóra antashubstaintí a mhodhnú. Tar éis antashubstaintí a shintéisiú, déanann an ceangal sonrach atá ag antashubstaintí an-luachmhar i ndiagnóis agus i gcóireáil chliniciúil. Trí innealtóireacht antashubstaintí, is féidir leo freastal ar riachtanais luathfhorbartha drugaí agus diagnóiseacha.

Is é cuspóir na hinnealtóireachta antashubstaintí feidhmeanna an-shonracha, cobhsaí a dhearadh agus a tháirgeadh nach féidir le hantashubstaintí nádúrtha a bhaint amach, ag leagan an bhunchloch do tháirgeadh antashubstaintí teiripeacha.

Le taithí fhairsing tionscadail in innealtóireacht antashubstaintí, is féidir le Alpha Lifetech seirbhísí antashubstaintí monachlónacha agus polachlónacha saincheaptha a sholáthar do speicis éagsúla, chomh maith le seirbhísí tógála agus scagthástála leabharlann antashubstaintí taispeána fagaí. Is féidir le Alpha Lifetech antashubstaintí bithchosúla ardchaighdeáin agus táirgí próitéine athchuingreacha a sholáthar do chustaiméirí, chomh maith le seirbhísí comhfhreagracha, chun antashubstaintí éifeachtúla, an-shonracha agus cobhsaí a tháirgeadh. Trí úsáid a bhaint as ardáin chuimsitheacha antashubstaintí, ardáin próitéine agus córais taispeána fagaí, soláthraímid seirbhísí a chlúdaíonn an réamhtheacht agus an iartheacht de tháirgeadh antashubstaintí, lena n-áirítear seirbhísí teicniúla amhail daonnachtú antashubstaintí, íonú antashubstaintí, seicheamhú antashubstaintí, agus bailíochtú antashubstaintí.

Tá céim cheannródaíoch innealtóireachta antashubstaintí bainteach le dhá theicneolaíocht:

--Teicneolaíocht DNA athchuingreach

--Teicneolaíocht hibridóma

Tá forbairt thapa innealtóireachta antashubstaintí bainteach le trí theicneolaíocht thábhachtacha:

--Teicneolaíocht clónála géine agus imoibriú slabhra polaiméaráise

--Léiriú próitéine: Déantar próitéiní athchuingreacha a tháirgeadh ag córais léirithe amhail giosta, víris slat-chruthacha, agus plandaí

--Dearadh struchtúrach ríomhchuidithe

Rinneadh an chéad ghlúin d’antasubstaintí a dhaonnú chun antasubstaintí ciméireacha a tháirgeadh, áit a raibh réigiún athraitheach antashubstaintí monachlónacha lucha nasctha leis an réigiún tairiseach de mhóilíní IgG daonna. Rinneadh réigiún ceangailteach antaigin (CDR) den dara glúin d’antasubstaint monachlónach lucha a thrasphlandú isteach in IgG daonna. Seachas an réigiún CDR, is beagnach antashubstaintí daonna iad na hantashubstaintí eile go léir, agus rinneadh iarrachtaí chun freagairtí frith-antasubstaintí lucha daonna (HAMA) a sheachaint agus antashubstaintí clónacha lucha á n-úsáid le haghaidh cóireála daonna.

 

Chun leabharlann taispeána fagaí a thógáil, is é an chéad chéim ná na géinte a chódálann antasubstaintí a fháil, ar féidir iad a leithlisiú ó chealla B ainmhithe imdhíonta (tógáil leabharlainne imdhíonachta), a bhaint go díreach ó ainmhithe neamh-imdhíonta (tógáil leabharlainne nádúrtha), nó fiú iad a chur le chéile in vitro le blúirí géine antasubstainte (tógáil leabharlainne sintéiseach). Ansin, déantar na géinte a aimpliú trí PCR, a chur isteach i bplasmaidí, agus a chur in iúl i gcórais óstacha oiriúnacha (léiriú giosta (de ghnáth Pichia pastoris), léiriú procarótach (de ghnáth E. coli), léiriú cealla mamaigh, léiriú cealla plandaí, agus léiriú cealla feithidí atá ionfhabhtaithe le víris slat-chruthach). Is é an ceann is coitianta ná an córas léirithe E. coli, a chomhtháthaíonn seicheamh antasubstainte ionchódaithe sonrach ar an bhfag agus a chódálann ceann de na próitéiní bhlaosc fagaí (pIII nó pVIII). Déantar comhleá géine de bhaictéarfagaí a thaispeáint ar dhromchla na mbaictéarfag. Is é croílár na teicneolaíochta seo leabharlann taispeána fagaí a thógáil, a bhfuil an buntáiste aici thar leabharlanna nádúrtha sa mhéid is gur féidir léi ceangal sonrach a bheith aici. Ina dhiaidh sin, déantar scagadh ar antasubstaintí a bhfuil sainiúlacht antaigin acu trí phróiseas roghnúcháin bhitheolaíoch, socraítear antaiginí sprice, nitear fagaí neamhcheangailte arís agus arís eile, agus nitear fagaí ceangailte le haghaidh saibhrithe breise. Tar éis trí bhabhta athrá nó níos mó, leithlisítear antasubstaintí ard-shonrachta agus ard-chlaontachta.

Figiúr 3: Tógáil agus Scagadh Leabharlann Antashubstaintí

Is féidir teicneolaíocht DNA athchuingreach a úsáid chun blúirí antashubstainte a ghiniúint. Ní féidir antashubstaintí Fab a hidrealú ar dtús ach le próitéáis gastrach chun blúirí (Fab')2 a tháirgeadh, a dhíleáítear ansin ag papain chun blúirí Fab aonair a ghiniúint. Tá VH agus VL sa bhlúire Fv, a bhfuil drochchobhsaíocht acu mar gheall ar easpa bannaí disulfíde. Dá bhrí sin, tá VH agus VL nasctha le chéile trí pheiptíd ghearr de 15-20 aimínaigéad chun antashubstaint blúire athraitheach slabhra aonair (scFv) a fhoirmiú le meáchan móilíneach de thart ar 25KDa.

Tá sé soiléirithe ag staidéar ar struchtúr antashubstaintí i gCaiméilíde (Caiméil, Liama, agus Alpaca) nach bhfuil ach slabhraí troma agus gan aon slabhraí éadroma ag antashubstaintí, agus dá bhrí sin tugtar antashubstaintí slabhra trom (hcAb) orthu. Tugtar antashubstaintí fearainn aonair nó nanachoirp nó VHH ar fhearann ​​athraitheach antashubstaintí slabhra trom, agus tá méid 12-15 kDa acu. Mar mhonaiméirí, níl aon naisc déshuilfíde acu agus tá siad an-chobhsaí, le claonadh an-ard d'antaiginí.

Figiúr 5: Antashubstaint Slabhra Trom agus VHH/Nanachorp

Úsáideann saorléiriú cille léiriú DNA nádúrtha nó sintéiseach chun sintéis próitéine in vitro a bhaint amach, ag baint úsáide as an gcóras léirithe E. coli de ghnáth. Táirgeann sé próitéiní go tapa agus seachnaíonn sé an t-ualach meitibileach agus cíteatocsaineach ar chealla agus méideanna móra próitéiní athchuingreacha á dtáirgeadh in vivo. Is féidir leis próitéiní a tháirgeadh freisin atá deacair a shintéisiú, amhail iad siúd atá deacair a mhodhnú tar éis aistriúcháin nó próitéiní membrane a shintéisiú.