Dè a th’ ann an Innleadaireachd Antibody?

Le cuideachadh bho innleadaireachd antibody, chaidh a dhèanamh comasach atharrachadh a dhèanamh air meud moileciuil, pharmacokinetics, immunogenicity, dàimh ceangail, sònrachas agus gnìomh buaidh antibodies. Às deidh antibodies a cho-chur, tha an ceangal sònraichte de antibodies gan dèanamh air leth luachmhor ann am breithneachadh agus làimhseachadh clionaigeach. Tro innleadaireachd antibody, is urrainn dhaibh coinneachadh ri feumalachdan leasachadh tràth dhrogaichean is breithneachaidh.

Is e adhbhar innleadaireachd antibody gnìomhan fìor shònraichte, seasmhach a dhealbhadh agus a thoirt gu buil nach urrainn antibodies nàdurrach a choileanadh, a’ suidheachadh bunait airson cinneasachadh antibodies teirpeach.

Faodaidh Alpha Lifetech, leis an eòlas pròiseict farsaing aige ann an innleadaireachd antibody, seirbheisean antibody monoclonal agus polyclonal gnàthaichte a thoirt seachad airson ioma-ghnèitheachd, a bharrachd air togail leabharlann antibody taisbeanaidh phage agus seirbheisean sgrìonaidh. Faodaidh Alpha Lifetech antibodies biosimilar càileachd agus toraidhean pròtain ath-chuingealaichte a thoirt do luchd-ceannach, a bharrachd air seirbheisean co-fhreagarrach, gus antibodies èifeachdach, fìor shònraichte agus seasmhach a thoirt gu buil. Le bhith a’ cleachdadh antibody coileanta, àrd-ùrlaran pròtain agus siostaman taisbeanaidh phage, bidh sinn a’ toirt seachad seirbheisean a’ còmhdach suas an abhainn agus sìos an abhainn de chinneasachadh antibody, a’ toirt a-steach seirbheisean teignigeach leithid daonnachadh antibody, glanadh antibody, sreath antibody, agus dearbhadh antibody.

Tha an ìre ùr-ghnàthach de innleadaireachd antibody co-cheangailte ri dà theicneòlas:

--Teicneòlas DNA ath-leasaichte

--Teicneòlas hibridoma

Tha leasachadh luath innleadaireachd antibody co-cheangailte ri trì teicneòlasan cudromach:

- Teicneòlas clonadh gine agus freagairt slabhraidh polymerase

--Facal pròtain: Tha pròtanan ath-chuimseach air an toirt a-mach le siostaman faireachdainn leithid beirm, bhìorasan ann an cumadh slat, agus planntaichean

-- Dealbhadh structarail le taic coimpiutair

Chaidh a’ chiad ghinealach de antibodies a chinne-daonna airson cinneasachadh antibodies chimeric, far an robh an roinn caochlaideach de antibodies monoclonal lucha ceangailte ris an roinn sheasmhach de mholacilean IgG daonna. Chaidh an roinn ceangail antigen (CDR) den antibody monoclonal luchag dàrna ginealach a thar-chuir a-steach do IgG daonna. A bharrachd air an roinn CDR, tha a h-uile antibodies eile cha mhòr mar antibodies daonna, agus chaidh oidhirpean a dhèanamh gus freagairtean antibody daonna an-aghaidh luchag (HAMA) a sheachnadh nuair a bhios iad a’ cleachdadh antibodies clone luchag airson làimhseachadh daonna.

 

Gus leabharlann taisbeanaidh phage a thogail, is e a ’chiad cheum na ginean fhaighinn a’ còdachadh antibodies, a dh’ fhaodar a sgaradh bho cheallan B de bheathaichean le banachdach (togail leabharlann dìonachd), air an toirt a-mach gu dìreach bho bheathaichean neo-bhanachdach (togail leabharlann nàdarra), no eadhon air an cruinneachadh ann an vitro le mìrean gine antibody (togail leabharlann synthetach). An uairsin, tha na ginean air an leudachadh le PCR, air an cuir a-steach do plasmids, agus air an cur an cèill ann an siostaman aoigheachd iomchaidh (abairt beirm (mar as trice Pichia pastoris), abairt prokaryotic (E. coli mar as trice), faireachdainn cealla mamail, faireachdainn cealla planntrais, agus faireachdainn cealla meanbh-bhiastagan air an galar le bhìorasan cumadh slat). Is e an siostam abairt E. coli am fear as cumanta, a tha a’ fighe a-steach sreath sònraichte de chòdachadh antibody a-steach don phage agus a’ còdachadh aon de na pròtanan slige phage (pIII no pVIII). Am measgachadh gine de, Agus air a thaisbeanadh air uachdar bacteriophages. Is e cridhe an teicneòlais seo leabharlann taisbeanaidh phage a thogail, aig a bheil buannachd thairis air leabharlannan nàdarra leis gum faod ceangal sònraichte a bhith aige. Mar thoradh air an sin, bidh antibodies le sònrachas antigen air an sgrìobadh tro phròiseas taghaidh bith-eòlasach, tha antigens targaid air an suidheachadh, bidh phages neo-cheangailte air an nighe air falbh a-rithist agus a-rithist air an nighe air falbh airson tuilleadh beairteachaidh. Às deidh trì cuairtean ath-aithris no barrachd, tha sònraichteachd àrd agus antibodies àrd-dàimh air an dealachadh.

Fig 3: Togail agus Sgrionadh Leabharlann Antibody

Faodar teicneòlas DNA ath-chuingealaichte a chleachdadh gus mìrean antibody a ghineadh. Fab antibodies urrainn an toiseach hydrolyzed a-mhàin le gastric protease a thoirt gu buil (Fab ') 2 pìosan, a tha an uair sin air a chnàmh le papain a ghineadh fa leth Fab criomagan. Tha an criomag Fv air a dhèanamh suas de VH agus VL, aig a bheil droch sheasmhachd air sgàth dìth bannan disulfide. Mar sin, tha VH agus VL ceangailte ri chèile tro peptide goirid de 15-20 amino-aigéid gus antibody criomag caochlaideach slabhraidh singilte (scFv) a chruthachadh le cuideam moileciuil timcheall air 25KDa.

Tha sgrùdadh air structar antibody ann an Camelidae (Camel, LIama, agus Alpaca) air soilleireachadh nach eil ach slabhraidhean trom agus gun slabhraidhean aotrom aig antibodies, agus mar sin canar antibodies slabhraidh trom orra (hcAb). Is e an raon caochlaideach de antibodies slabhraidh trom a chanar ri antibodies fearainn singilte no nanobodies no VHH, le meud 12-15 kDa. Mar monomers, chan eil bannan disulfide aca agus tha iad gu math seasmhach, le dàimh fìor àrd airson antigens.

Fig 5: Antibody slabhraidh trom agus VHH / Nanobody

Bidh faireachdainn gun cheallan a’ cleachdadh an abairt DNA nàdarrach no synthetigeach gus synthesis pròtain in vitro a choileanadh, mar as trice a’ cleachdadh siostam faireachdainn E. coli. Bidh e a’ toirt a-mach pròtanan gu sgiobalta agus a’ seachnadh an eallach mheatabolaig agus cytotoxic air ceallan nuair a bhios e a’ toirt a-mach mòran de phròtainean ath-chuingealaichte in vivo. Faodaidh e cuideachd pròtanan a thoirt gu buil a tha duilich an co-chur, leithid an fheadhainn a tha duilich atharrachadh às deidh eadar-theangachadh no synthesis pròtainean membran.