Dè a th’ ann an Innleadaireachd Antibody?

Le cuideachadh bho innleadaireachd antibody, tha e air a bhith comasach meud moileciuil, cungaidh-leigheis, dìonachd, dlùth-cheangal, sònrachas agus gnìomh èifeachd antibody atharrachadh. Às deidh antibody a cho-chur, tha an ceangal sònraichte aig antibody gan dèanamh glè luachmhor ann an breithneachadh agus làimhseachadh clionaigeach. Tro innleadaireachd antibody, faodaidh iad coinneachadh ri feumalachdan leasachadh tràth dhrogaichean agus breithneachaidh.

Is e adhbhar innleadaireachd antibody gnìomhan seasmhach, sònraichte a dhealbhadh agus a thoirt gu buil nach urrainn do antibodies nàdarra a choileanadh, a’ leagail na bunait airson cinneasachadh antibodies leigheasach.

Leis an eòlas farsaing a th’ aige ann an innleadaireachd phròiseactan antibody, is urrainn dha Alpha Lifetech seirbheisean antibody monoclonal agus polyclonal gnàthaichte a thoirt seachad airson iomadh gnè, a bharrachd air seirbheisean togail is sgrìonaidh leabharlann antibody taisbeanaidh phage. Is urrainn dha Alpha Lifetech antibody biosimilar càileachd agus toraidhean pròtain ath-chuingealaichte a thoirt do luchd-ceannach, a bharrachd air seirbheisean co-fhreagarrach, gus antibody èifeachdach, gu math sònraichte agus seasmhach a thoirt gu buil. Le bhith a’ cleachdadh antibody coileanta, àrd-ùrlaran pròtain agus siostaman taisbeanaidh phage, bidh sinn a’ toirt seachad seirbheisean a’ còmhdach suas is sìos cinneasachadh antibody, a’ gabhail a-steach seirbheisean teicnigeach leithid daonnachadh antibody, glanadh antibody, sreath antibody, agus dearbhadh antibody.

Tha an ìre ùr-ghnàthach ann an innleadaireachd antibody co-cheangailte ri dà theicneòlas:

--Teicneòlas DNA ath-chuingealaichte

--Teicneòlas Hybridoma

Tha leasachadh luath innleadaireachd antibody co-cheangailte ri trì teicneòlasan cudromach:

--Teicneòlas clònaidh gine agus ath-bhualadh slabhraidh polymerase

--Abairt pròtain: Bidh pròtainean ath-chuingealaichte air an dèanamh le siostaman abairteachaidh leithid beirm, bhìorasan slat-chruthach, agus lusan

--Dealbhadh structarail le taic coimpiutair

Chaidh a’ chiad ghinealach de antibodies a dhèanamh daonnaichte airson cinneasachadh antibodies chimeric, far an deach an roinn caochlaideach de antibodies monoclonal luchaige a cheangal ris an roinn sheasmhach de mholacilean IgG daonna. Chaidh an roinn ceangail antigen (CDR) den antibody monoclonal luchaige den dàrna ginealach a thar-phlanntachadh a-steach do IgG daonna. A bharrachd air an roinn CDR, tha a h-uile antibody eile cha mhòr nan antibodies daonna, agus chaidh oidhirpean a dhèanamh gus freagairtean antibody luchaige daonna (HAMA) a sheachnadh nuair a bha antibodies clòn luchaige gan cleachdadh airson làimhseachadh daonna.

 

Gus leabharlann taisbeanaidh phage a thogail, is e a’ chiad cheum na ginean a tha a’ còdachadh antibodies fhaighinn, agus faodar an sgaradh bho cheallan-B bheathaichean a chaidh a bhanachdach (togail leabharlann dìonachd), an toirt a-mach gu dìreach bho bheathaichean nach deach a bhanachdach (togail leabharlann nàdarra), no eadhon an cruinneachadh in vitro le pìosan gine antibody (togail leabharlann sintéiseach). An uairsin, thèid na ginean a mheudachadh le PCR, an cur a-steach do phlasmaidean, agus an cur an cèill ann an siostaman aoigheachd freagarrach (abairt beirm (mar as trice Pichia pastoris), abairt prokaryotic (mar as trice E. coli), abairt cealla mamalan, abairt cealla planntrais, agus abairt cealla bhiastagan air a bheil bhìorasan slat-chruthach). Is e an siostam abairt E. coli as cumanta, a bhios ag amalachadh sreath antibody còdaidh sònraichte air a’ phage agus a’ còdachadh aon de na pròtainean slige phage (pIII no pVIII). Tha an co-aonadh gine de, agus air a thaisbeanadh air uachdar bacteriophages. Is e cridhe na teicneòlais seo leabharlann taisbeanaidh phage a thogail, aig a bheil a’ bhuannachd thairis air leabharlannan nàdarra leis gum faod ceangal sònraichte a bhith aige. Às dèidh sin, thèid antibodies le sònrachas antigen a sgrìonadh tro phròiseas taghaidh bith-eòlasach, thèid antigens targaid a shocrachadh, thèid fages neo-cheangailte a nighe air falbh a-rithist is a-rithist, agus thèid fages ceangailte a nighe air falbh airson tuilleadh beairteachaidh. Às dèidh trì cuairtean no barrachd de ath-aithris, thèid antibodies le sònrachas àrd agus dlùth-chàirdeas àrd a sgaradh a-mach.

Figear 3: Togail agus Sgrìonadh Leabharlann Antibodies

Faodar teicneòlas DNA ath-chuingealaichte a chleachdadh gus pìosan antibody a chruthachadh. Chan urrainnear antibodies Fab a hydrolysis an toiseach ach le protease gastric gus pìosan (Fab')2 a thoirt gu buil, agus an uairsin thèid an cnàmh le papain gus pìosan Fab fa leth a chruthachadh. Tha am pìos Fv air a dhèanamh suas de VH agus VL, aig a bheil droch sheasmhachd air sgàth dìth cheanglaichean disulfide. Mar sin, tha VH agus VL ceangailte ri chèile tro pheaptaid ghoirid de 15-20 amino-aigéid gus antibody pìos caochlaideach slabhraidh singilte (scFv) a chruthachadh le cuideam moileciuil de mu 25KDa.

Tha sgrùdadh air structar nan antibodies ann an Camelidae (Camel, Liama, agus Alpaca) air soilleireachadh nach eil ach slabhraidhean troma aig antibodies agus gun slabhraidhean aotrom, agus mar sin canar antibodies slabhraidh throm (hcAb) riutha. Canar antibodies aon-raoin no nanobodies no VHH ris an raon caochlaideach de antibodies slabhraidh throm, le meud 12-15 kDa. Mar monomers, chan eil ceanglaichean disulfide aca agus tha iad gu math seasmhach, le dlùth-cheangal gu math àrd ri antigens.

Figear 5: Antibody Slabhraidh Throm agus VHH/Nanobody

Bidh gnìomhachd saor-chealla a’ cleachdadh gnìomhachd DNA nàdarra no synthetigeach gus co-chur pròtain in vitro a choileanadh, mar as trice a’ cleachdadh siostam gnìomhachd E. coli. Bidh e a’ dèanamh phròtainean gu sgiobalta agus a’ seachnadh an eallach metabolach agus cytotoxic air ceallan nuair a bhios iad a’ dèanamh meudan mòra de phròtainean ath-chuingealaichte in vivo. Faodaidh e cuideachd pròtainean a dhèanamh a tha duilich an co-chur, leithid an fheadhainn a tha duilich an atharrachadh às deidh eadar-theangachadh no pròtainean membran a cho-chur.