Plataforma de desenvolvemento de anticorpos con visualización en fagos

Alpha Lifetech, coa súa ampla experiencia en proxectos de descubrimento de anticorpos, pode proporcionar servizos personalizados de anticorpos monoclonais e policlonais para múltiples especies, así como servizos de construción e cribado de bibliotecas de anticorpos. Alpha Lifetech pode proporcionar aos clientes produtos de anticorpos e anticorpos recombinantes de calidade garantida, así como os servizos correspondentes, para preparar anticorpos eficientes, altamente específicos e estables. Ao utilizar plataformas de anticorpos integrais e enxeñaría de anticorpos, ofrecemos servizos que abarcan as fases anteriores e posteriores da produción de anticorpos, incluíndo servizos técnicos como a preparación, purificación, secuenciación e validación de anticorpos.

Alpha Lifetech ten unha plataforma madura de descubrimento de anticorpos que ofrece aos clientes unha gama de servizos, incluíndo inmunidade animal, construción e cribado de bibliotecas de anticorpos de visualización en fagos, secuenciación de anticorpos, expresión de anticorpos, purificación de anticorpos, validación de anticorpos e etiquetado de anticorpos baseado na tecnoloxía de hibridomas, tecnoloxía de células B individuais, tecnoloxía de visualización en fagos e moito máis. Alpha Lifetech ten unha liña de produción estándar e, ademais dos servizos de preparación de anticorpos, tamén se poden proporcionar servizos de apoio como humanización de anticorpos, maduración por afinidade de anticorpos, deseño e desenvolvemento de fármacos ADC e deseño posterior de secuencias CAR-T. Ao mesmo tempo, Alpha Lifetech construíu unha biblioteca de anticorpos baseada nas plataformas tecnolóxicas de visualización en fagos M13, T4 e T7, cunha capacidade de almacenamento de ata 10^8-10^9. A taxa positiva, a taxa de inserción e a diversidade da biblioteca poden superar o 90 %.

Tecnoloxía de visualización de fagos

A produción de anticorpos monoclonais preparouse inicialmente empregando a tecnoloxía de anticorpos monoclonais de hibridoma para producir anticorpos monoclonais de hibridoma de rato. Especificamente, ao fusionar células do bazo de ratos inmunizados con células de mieloma de humanos ou ratos, fórmanse células de hibridoma que segregan anticorpos monoclonais de hibridoma específicos. Mediante a modificación humanizada dos anticorpos monoclonais de rato e a modificación por enxeñaría xenética dos anticorpos para darlles unha rexión de inmunoglobulina humana constante, pódese reducir a súa inmunoxenicidade. A enxeñaría de anticorpos monoclonais úsase amplamente en aplicacións biomédicas e clínicas.

Alpha Lifetech pode proporcionar servizos integrales de enxeñaría de anticorpos, desde o deseño de protocolos de investigación preclínica ata o descubrimento de conxugados de anticorpos e fármacos (ADC) e a validación en animais. Os conxugados de anticorpos e fármacos (ADC) poden administrar fármacos de quimioterapia ás células cancerosas. Despois de unirse a obxectivos específicos expresados nas células cancerosas, o ADC libera fármacos citotóxicos nas células cancerosas. Alpha Lifetech tamén pode proporcionar aos clientes servizos completos de maduración da afinidade dos anticorpos. Coa tecnoloxía avanzada de optimización de mutacións e cribado de visualización en fagos de alto rendemento, primeiro se criban os anticorpos con certa afinidade e, a continuación, introdúcense mutacións de aminoácidos para xerar diversas variantes. Posteriormente, avaliáronse e cribáronse anticorpos de alta afinidade mediante técnicas de cribado. Despois de múltiples roldas de optimización e análise estrutural, finalmente obtivéronse anticorpos con maior afinidade e maior especificidade.

Alpha Lifetech pode construír varios tipos de bibliotecas de visualización en fagos de anticorpos, incluíndo bibliotecas inmunitarias, bibliotecas nativas, bibliotecas semisintéticas e bibliotecas sintéticas. En función da alta capacidade das bibliotecas de anticorpos, pódense obter anticorpos altamente específicos. Pódense proporcionar múltiples vectores fagémidos como pMECS, pComb3X e pCANTAB 5E, así como cepas como TG1 E. coli, XL1 Blue e ER2738. Ademais dunha capacidade de biblioteca de ata 10^9, a taxa de inserción de fragmentos diana da biblioteca tamén é alta, o que crea condicións suficientes para a detección de anticorpos que satisfagan aos clientes. O diagrama de fluxo do servizo de preparación de anticorpos de Alpha Lifetech baseado na tecnoloxía de visualización en fagos móstrase na Figura 1.

Fig. 1 Diagrama do proceso para a preparación de anticorpos monoclonais baseados na tecnoloxía de visualización en fagos.

Fluxo de traballo de produción de anticorpos con visualización en fagos

Pasos	Contido do servizo	Liña de tempo
Paso 1: Inmunización animal	(1) Vacunación animal 4 veces, inmunización de reforzo 1 dose, un total de 5 doses inmunizadas. (2) Recolléuse soro negativo antes da inmunización e realizouse un ELISA na cuarta dose para detectar o título sérico. (3) Se o título de anticorpos séricos da cuarta dose cumpre os requisitos, administrarase unha dose adicional de inmunización 7 días antes da recollida de sangue. Se non cumpre os requisitos, continuarase coa inmunización de rutina. (4) Potencia cualificada, recollida de sangue e separación de monocitos	10 semanas
Paso 2: Preparación do ADNc	(1) Extracción de ARN total de PBMC (kit de extracción de ARN) (2) Preparación de ADNc por RT-PCR de alta fidelidade (kit de transcrición inversa)	1 día
Paso 3: Construción da biblioteca de anticorpos	(1) Usando o ADNc como molde, os xenes amplificáronse mediante dúas roldas de PCR. (2) Construción e transformación de fagos: empalme de xenes do vector fagémido, transformación por electroporación da bacteria hóspede TG1, construción da biblioteca de anticorpos. (3) Identificación: Seleccionar aleatoriamente 24 clons, taxa de identificación positiva por PCR + taxa de inserción. (4) Preparación asistida de fagos: amplificación e purificación do fago M13. (5) Rescate da biblioteca de visualización en fagos	3-4 semanas
Paso 4: Cribado da biblioteca de anticorpos (3 roldas)	(1) Cribado predeterminado en 3 roldas (cribado en fase sólida): cribado por presión para eliminar anticorpos non específicos na maior medida posible. (2) Amplificación dun só clon con selección de bacteriófagos + expresión inducida por IPTG + detección por ELISA de clons positivos. (3) Seleccionáronse todos os clons positivos para a secuenciación de xenes.	4-5 semanas

Vantaxe da tecnoloxía de visualización de fagos

Alpha Lifetech ten unha ampla experiencia no campo do desenvolvemento de anticorpos. Co paso dos anos, Alpha Lifetech estableceu unha plataforma integral de desenvolvemento de anticorpos.

Servizos de asistencia

Podemos ofrecer diferentes servizos de construción de bibliotecas inmunitarias baseadas en animais e servizos de cribado de bibliotecas de anticorpos naturais segundo as necesidades do cliente.

Múltiples obxectivos

Hai dispoñibles servizos de descubrimento de anticorpos diana múltiple: proteínas, péptidos, moléculas pequenas, virus, proteínas de membrana, ARNm, etc.

Vectores múltiples

Servizo personalizado de construción de bibliotecas. Podemos fornecer varios vectores de bacteriófagos, incluíndo PMECS, pComb3X e pCANTAB 5E, e modificalos segundo as necesidades do cliente.

Plataforma para adultos

A capacidade de almacenamento pode chegar a 10^8-10^9, as taxas de inserción son todas superiores ao 90 % e a afinidade dos anticorpos obtidos mediante cribado é xeralmente do nivel nM pM

SERVIZO relacionado

Estratexias de desenvolvemento de múltiples anticorpos

Servizo de Desenvolvemento de Anticorpos Monoclonais

Plataforma Tecnolóxica de Hibridomas

Plataforma de clasificación de células B individuais

Plataforma de desenvolvemento de anticorpos con visualización en fagos

desenvolvemento de anticorpos monoclonais: Alpha Lifetech

Servizo de Desenvolvemento de Anticorpos Monoclonais

Podemos ofrecer servizos de desenvolvemento de anticorpos monoclonais de alta calidade, alta pureza e alta especificidade, incluíndo a produción de anticorpos monoclonais de rato e anticorpos monoclonais de coello.

Plataforma Tecnolóxica de Hibridomas

Incluíndo programa de inmunización, servizos de preparación de anticorpos, purificación de anticorpos, secuenciación de alto rendemento de anticorpos, validación de anticorpos, etc.

Plataforma de clasificación de células B individuais

Alpha Lifetech ten vantaxes no tempo de cribado e na obtención de anticorpos de alta calidade. Pode proporcionar deseño, síntese e modificación de antíxenos, inmunidade animal, cribado de enriquecemento de células B individuais e secuenciación de células individuais.