Plataforma de desenvolvemento de anticorpos de visualización de fagos
Tecnoloxía de visualización de fagos

Fluxo de traballo de produción de anticorpos Phage Display
Pasos | Contido do servizo | Cronoloxía |
---|---|---|
Paso 1: Inmunización dos animais | (1) Inmunización animal 4 veces, inmunización de refuerzo 1 dose, un total de 5 doses inmunizadas. (2) Se recolleu soro negativo antes da inmunización e realizouse ELISA na cuarta dose para detectar o título do soro. (3) Se o título de anticorpos séricos da cuarta dose cumpre os requisitos, administrarase unha dose adicional de inmunización 7 días antes da recollida de sangue. Se non cumpre os requisitos, continuará a vacinación rutineira. (4) Potencia cualificada, recollida de sangue e separación de monocitos | 10 semanas |
Paso 2: Preparación do cDNA | (1) Extracción de ARN total PBMC (kit de extracción de ARN) (2) Preparación de RT-PCR de alta fidelidade de ADNc (kit de transcrición inversa) | 1 día |
Paso 3: construción da biblioteca de anticorpos | (1) Usando cDNA como modelo, os xenes foron amplificados por dúas roldas de PCR. (2) Construción e transformación de fagos: vector de fagémidos de empalme xenético, transformación por electroporación de bacterias hóspedes TG1, construción de biblioteca de anticorpos. (3) Identificación: seleccione aleatoriamente 24 clons, taxa de identificación positiva por PCR + taxa de inserción. (4) Preparación asistida de fagos: amplificación + purificación de fagos M13. (5) Rescate da biblioteca de exhibición de fagos | 3-4 semanas |
Paso 4: detección da biblioteca de anticorpos (3 roldas) | (1) Cribado predeterminado de 3 roldas (cribado en fase sólida): cribado de presión para eliminar anticorpos non específicos na medida do posible. (2) Selección de bacteriófagos de amplificación de clon único + expresión inducida por IPTG + detección ELISA de clons positivos. (3) Seleccionáronse todos os clons positivos para a secuenciación de xenes. | 4-5 semanas |

Servizos de apoio
Podemos proporcionar diferentes servizos de construción de bibliotecas inmunes a base de animais e servizos de selección de bibliotecas de anticorpos naturais segundo as necesidades do cliente

Obxectivo múltiple
Hai dispoñibles varios servizos de descubrimento de anticorpos diana: proteínas, péptidos, moléculas pequenas, virus, proteínas de membrana, ARNm, etc.

Vectores múltiples
Servizo de construción de bibliotecas personalizado, podemos proporcionar varios vectores de bacteriófagos, incluíndo PMECS, pComb3X e pCANTAB 5E, e modificalos segundo as necesidades do cliente.

Plataforma madura
A capacidade de almacenamento pode chegar a 10 ^ 8-10 ^ 9, as taxas de inserción son todas por riba do 90 % e a afinidade dos anticorpos obtidos a través do cribado é xeralmente no nivel nM pM
Servizo de Desenvolvemento de Anticorpos Monoclonais
Podemos proporcionar servizos de desenvolvemento de anticorpos monoclonais de alta calidade, pureza e moi específicos, incluíndo a produción de anticorpos monoclonais de rato e anticorpos monoclonais de coello.
Plataforma Tecnolóxica Hybridoma
Incluíndo o programa de inmunización, os servizos de preparación de anticorpos, a purificación de anticorpos, a secuenciación de alto rendemento de anticorpos, a validación de anticorpos, etc.
Plataforma de clasificación de células B única
Alpha Lifetech ten vantaxes no tempo de cribado e na obtención de anticorpos de alta calidade. Pode proporcionar deseño, síntese e modificación de antíxenos, inmunidade animal, cribado de enriquecemento de células B únicas, secuenciación de células únicas.

Plataforma de desenvolvemento de anticorpos de visualización de fagos
Alpha Lifetech pode proporcionar servizos técnicos de desenvolvemento de anticorpos de exhibición de fagos desde a preparación de anticorpos, a purificación de anticorpos, a secuenciación de anticorpos, etc.