Introdución ás bibliotecas de anticorpos sintetizados

Unha biblioteca de anticorpos sintetizada, tamén coñecida como biblioteca de novo, é un método sintético que utiliza técnicas como a síntese de ADN ou a presentación en fagos para deseñar e sintetizar rexións variables completas de anticorpos, incluíndo rexións estruturais e CDR, sen depender de bibliotecas de anticorpos naive.

Unha biblioteca de anticorpos semisintéticos créase combinando bibliotecas de anticorpos naturais con diversidade sintética. Normalmente implica a síntese de oligonucleótidos de ADN para producir un conxunto de diferentes rexións determinantes complementarias (CDR), que logo se combinan cunha estrutura de anticorpos constante derivada de fontes naturais como células B humanas ou animais. A CDR sintetizada introduce diversidade na biblioteca, o que resulta en anticorpos dirixidos a unha ampla gama de epítopos. A biblioteca de anticorpos semisintéticos proporciona un compromiso entre a diversidade natural do sistema inmunitario e a diversidade controlada conseguida mediante métodos sintéticos.

A distinción entre bibliotecas de anticorpos naive e sintéticas depende da fonte dos xenes das inmunoglobulinas. Mentres tanto, a diferenza entre unha biblioteca de anticorpos semisintetizada e unha sintetizada reside en que a primeira consiste nunha parte de segmentos de anticorpos naive, como a cadea lixeira ou a cadea pesada, e só un deles se sintetiza in vitro; mentres que a sintetizada deriva totalmente dunha síntese artificial por PCR in vitro.

Alpha Lifetech pode proporcionar

Alpha Lifetech Inc.pode ofrecer unha biblioteca de anticorpos semisintetizados/sintetizados de animais e humanos baseada na nosa plataforma profesional de descubrimento de anticorpos. Con anos de experiencia en modificación xenética e construción de bibliotecas, pódense construír bibliotecas sintetizadas que sexan capaces de producir anticorpos sintéticos con afinidade e especificidade máis alá da capacidade dos anticorpos naturais.Alpha LifetechOs expertos están orgullosos de anunciar que podemos garantir unha alta taxa de éxito na construción dunha biblioteca de anticorpos que contén entre 10^8 e 10^10 clons independentes.

Alpha Lifetech Inc.está orgullosa de ofrecer servizos completos de construción de bibliotecas de anticorpos para satisfacer as diversas necesidades dos investigadores globais, incluíndo scFv, Fab, anticorpos VHH e bibliotecas personalizadas. O noso obxectivo é comprender e satisfacer as demandas dos diferentes clientes e axudar con calquera problema emerxente no traballo de investigación.

Proceso do servizo de construción de bibliotecas de anticorpos sintetizados

Deseño
A fase de deseño implica a selección de estruturas de anticorpos e rexións determinantes da complementariedade (CDR) baseadas en secuencias de anticorpos existentes ou datos estruturais. Os anticorpos CDR sintéticos tamén poden deseñarse para introducir funcionalidades específicas ou mellorar as propiedades de unión.

Síntese
O ADN sintético que codifica as secuencias de anticorpos deseñadas, incluíndo tanto as rexións estruturais como as CDR, sintetízase mediante métodos químicos ou encimáticos.

Asemblea
Os fragmentos de ADN sintetizados ensámblanse en vectores de expresión de anticorpos empregando técnicas como a PCR, a ligación ou a ensamblaxe de Gibson. Estes vectores pódense introducir despois en sistemas de expresión como células bacterianas, de lévedos ou de mamíferos para a produción de anticorpos.

Selección e selección
As bibliotecas de anticorpos construídas son examinadas e seleccionadas para atopar anticorpos coas propiedades desexadas empregando métodos de selección de alto rendemento. Isto pode implicar técnicas como a visualización en fagos, a visualización en lévedos ou a visualización en ribosomas, dependendo do formato e da aplicación da biblioteca.

Servizo de Construción de Bibliotecas de Anticorpos Sintetizados

Alpha Lifetech Inc.ofrece aos clientes un servizo integral de deseño e síntese de bibliotecas de anticorpos mediante a ligación dos repertorios de xenes V de cadeas pesadas e lixeiras nun vector de fago usando o sistema de recombinación específica do sitio Cre-lox para crear un repertorio de Fabs mostrados no fago que comprende 6,5 × 10^10 clons. A biblioteca produciu Abs contra numerosos antíxenos, algúns con afinidades nanomolares. A xeración da biblioteca de anticorpos humanos baséase na tecnoloxía de visualización de fagos M13 (mostrada na figura seguinte).