Introdución ás bibliotecas de anticorpos sintetizados

A biblioteca de anticorpos sintetizados, tamén coñecida como biblioteca De novo, é un método sintético que utiliza técnicas como a síntese de ADN ou a exhibición de fagos para deseñar e sintetizar rexións variables de anticorpos completas, incluíndo rexións marco e CDR, sen depender de bibliotecas de anticorpos inxenuos.

A biblioteca de anticorpos semisintéticos créase combinando bibliotecas de anticorpos de orixe natural con diversidade sintética. Normalmente implica a síntese de oligonucleótidos de ADN para producir un conxunto de rexións determinantes complementarias (CDR) diferentes, que logo se combinan cun marco de anticorpos constante derivado de fontes naturais como células B humanas ou animais. A CDR sintetizada introduce diversidade na biblioteca, dando lugar a anticorpos dirixidos a unha ampla gama de epítopos. A biblioteca de anticorpos semisintéticos proporciona un compromiso entre a diversidade natural do sistema inmunitario e a diversidade controlada conseguida mediante métodos sintéticos.

A distinción entre bibliotecas de anticorpos inxenuos e sintéticos depende da fonte dos xenes da inmunoglobulina. Mentres tanto, a diferenza entre unha biblioteca de anticorpos semisintetizados e sintetizados radica en que a primeira consiste en parte de segmentos de anticorpos inxenuos, como a cadea lixeira ou a cadea pesada, e só un deles se sintetiza in vitro; mentres que o sintetizado deriva totalmente dunha síntese artificial por PCR in vitro.

Alpha Lifetech pode proporcionar

Alpha Lifetech Inc.pode ofrecer unha biblioteca de anticorpos semisintetizados/sintetizados de animais e humanos baseada na nosa plataforma profesional de descubrimento de anticorpos. Con anos de experiencia en modificación xenética e construción de bibliotecas, pódense construír bibliotecas sintetizadas que sexan capaces de producir anticorpos sintéticos cunha afinidade e especificidade máis aló da capacidade dos anticorpos naturais.Alpha Lifetech'sOs expertos teñen o orgullo de anunciar que podemos garantir unha alta taxa de éxito na construción dunha biblioteca de anticorpos que conteña 10^8 - 10^10 clons independentes.

Alpha Lifetech Inc.ten o orgullo de ofrecer servizos completos de construción de bibliotecas de anticorpos para satisfacer as diversas necesidades dos investigadores globais, incluíndo scFv, Fab, anticorpos VHH e bibliotecas personalizadas. O noso obxectivo é comprender e satisfacer as demandas dos diferentes clientes e axudar con calquera problema próximo e emerxente no traballo de investigación.

Proceso do servizo de construción de bibliotecas de anticorpos sintetizados

Deseño
A fase de deseño implica seleccionar marcos de anticorpos e rexións que determinan a complementariedade (CDR) en función das secuencias de anticorpos existentes ou dos datos estruturais. Os anticorpos CDR sintéticos tamén se poden deseñar para introducir funcionalidades específicas ou mellorar as propiedades de unión.

Síntese
O ADN sintético que codifica as secuencias de anticorpos deseñadas, incluíndo tanto as rexións marco como as CDR, sintetízase mediante métodos químicos ou enzimáticos.

Asemblea
Os fragmentos de ADN sintetizados reúnense en vectores de expresión de anticorpos mediante técnicas como a PCR, a ligadura ou o ensamblaxe de Gibson. Estes vectores pódense introducir entón en sistemas de expresión como células bacterianas, lévedas ou de mamíferos para a produción de anticorpos.

Proxección e selección
As bibliotecas de anticorpos construídas son cribadas e seleccionadas para os anticorpos coas propiedades desexadas mediante métodos de cribado de alto rendemento. Isto pode implicar técnicas como exhibición de fagos, exhibición de lévedos ou exhibición de ribosomas, dependendo do formato da biblioteca e da aplicación.

Servizo de Construción de Bibliotecas de Anticorpos Sintetizados

Alpha Lifetech Inc.ofrece aos clientes un deseño único e un servizo sintetizado de bibliotecas de anticorpos ligando os repertorios de xenes V da cadea pesada e lixeira nun vector de fagos mediante o sistema de recombinación específico do sitio Cre-lox para crear un repertorio de Fabs mostrados no fago que comprende 6,5 × 10^10 clons. A biblioteca produciu Abs contra numerosos antíxenos, algúns con afinidades nanomolares. A xeración da biblioteca de anticorpos humanos baséase na tecnoloxía de visualización de fagos M13 (mostrada na figura a continuación).