1960 માં, બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝનો ખ્યાલ પ્રસ્તાવિત કરવામાં આવ્યો હતો. બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ, જેને બાયસ્પેસિફિક મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે, તે આનુવંશિક ઇજનેરી તકનીકનો ઉપયોગ કરીને કૃત્રિમ રીતે સંશ્લેષિત એન્ટિબોડીઝ છે. એક એન્જિનિયર્ડ કૃત્રિમ એન્ટિબોડી તરીકે, બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ સામાન્ય રીતે IgG સબક્લાસના હોય છે અને CD3 સબ્યુનિટને લક્ષ્ય બનાવતો એન્ટિજેન બંધનકર્તા ટુકડો ધરાવે છે. બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝમાં બે ચોક્કસ એન્ટિજેન બંધનકર્તા સાઇટ્સ હોય છે જે એકસાથે બે અલગ અલગ એન્ટિજેન્સ, અથવા એન્ટિજેનના બે અલગ અલગ એપિટોપ્સને બાંધી અને ઓળખી શકે છે. મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝની તુલનામાં, બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝમાં વધારાની ચોક્કસ એન્ટિજેન બંધનકર્તા સાઇટ હોય છે, આમ મજબૂત વિશિષ્ટતા અને લક્ષ્યીકરણ ક્ષમતા ધરાવે છે, જે ગાંઠ કોષોને વધુ સચોટ રીતે લક્ષ્ય બનાવી શકે છે અને લક્ષ્ય ઝેરીતા ઘટાડી શકે છે. બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ એકસાથે બહુવિધ જૈવિક કાર્યો કરી શકે છે, જેમ કે રોગપ્રતિકારક કોષોની ભરતી, સિગ્નલિંગ માર્ગોને અવરોધિત કરવા અને ગાંઠ કોષોને સીધા મારવા. પ્રારંભિક બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ મુખ્યત્વે રાસાયણિક જોડાણ અથવા કોષ સંમિશ્રણ દ્વારા તૈયાર કરવામાં આવતા હતા, પરંતુ રેન્ડમ સંયોજન અને લક્ષ્ય સંયોજનને અલગ કરવામાં મુશ્કેલીને કારણે આ પદ્ધતિ ધીમે ધીમે આગળ વધી હશે. આનુવંશિક ઇજનેરી ટેકનોલોજીના સતત વિકાસ સાથે, ઘણા નવા ટેકનોલોજી પ્લેટફોર્મ વિકસાવવામાં આવ્યા છે, જેમ કે ગાંઠોમાં છિદ્રો (KIH), ક્રોસમેબ, DVD Ig, વગેરે. આ પ્લેટફોર્મ ભારે સાંકળ અને પ્રકાશ સાંકળના મેળ ખાતા ન હોય તેવી સમસ્યાઓને અસરકારક રીતે હલ કરે છે, અને દ્વિ-વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝની એકરૂપતા અને ઉપજમાં સુધારો કરે છે.

બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી ઉત્પાદન માટેની મુખ્ય પદ્ધતિઓમાં રાસાયણિક જોડાણ, ચાર સ્ત્રોત હાઇબ્રિડોમા અને આનુવંશિક ઇજનેરી એન્ટિબોડી તૈયારીનો સમાવેશ થાય છે. તેમાંથી, રાસાયણિક જોડાણ પદ્ધતિ બે અખંડ IgG અથવા બે F (ab ') 2 એન્ટિબોડી ટુકડાઓને phthalimide અને dithioacylbenzoic એસિડ જેવા રાસાયણિક જોડાણ એજન્ટોનો ઉપયોગ કરીને બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝમાં જોડે છે. આ પદ્ધતિ સરળ અને ચલાવવામાં સરળ છે, પરંતુ તે એન્ટિજેન બંધનકર્તા સ્થળને નુકસાન પહોંચાડી શકે છે, એન્ટિબોડી પ્રવૃત્તિ ઘટાડી શકે છે, અને કપલિંગ એજન્ટમાં પણ ચોક્કસ ડિગ્રી કાર્સિનોજેનિસિટી હોય છે. ચાર સ્ત્રોત હાઇબ્રિડોમા પદ્ધતિ બે અલગ અલગ હાઇબ્રિડોમા કોષ રેખાઓમાંથી સોમેટિક કોષોના સંમિશ્રણ પર આધારિત છે જેથી અનુરૂપ માઉસ IgG વ્યક્ત કરી શકાય. આનુવંશિક ઇજનેરી તકનીક દ્વારા, એન્ટિબોડીઝને બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ બનાવવા માટે આનુવંશિક રીતે સુધારી શકાય છે. બે અલગ અલગ મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ બનાવવામાં આવ્યા હતા, અને બે એન્ટિબોડીઝના ફેબ ટુકડાઓ અથવા ભારે સાંકળ અને પ્રકાશ સાંકળ ચલ પ્રદેશોને અલગથી તોડી નાખવામાં આવ્યા હતા. ક્રોસ-લિંકિંગ પ્રતિક્રિયા અથવા સાંકળ પુનઃસંયોજન તકનીક દ્વારા, બે ટુકડાઓને બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી બનાવવા માટે જોડવામાં આવ્યા હતા. આનુવંશિક ઇજનેરી તકનીકની જટિલતા પ્રમાણમાં ઊંચી હોવા છતાં, તે હાલમાં એન્ટિબોડીઝની રચના અને કાર્યને સમાયોજિત કરવા માટે બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી ઉત્પાદન માટે સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ છે. બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી ડિઝાઇન કરતી વખતે, એન્ટિબોડી ક્રોસ રિએક્ટિવિટીના સિદ્ધાંતનો ઉપયોગ કરી શકાય છે, પરંતુ એન્ટિબોડી ક્રોસ રિએક્ટિવિટી બિન-વિશિષ્ટ પ્રતિક્રિયાઓનું કારણ બની શકે છે, તેથી બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી ડિઝાઇન, જેમ કે બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી ઉપચારના વ્યવહારિક ઉપયોગમાં તેને કાળજીપૂર્વક ધ્યાનમાં લેવામાં આવશે.

બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી શુદ્ધિકરણ એ ઉચ્ચ-શુદ્ધતા લક્ષ્ય એન્ટિબોડીઝને અલગ અને શુદ્ધ કરવાની પ્રક્રિયા છે. કેટલીક દ્રાવ્ય અશુદ્ધિઓને દૂર કરવા માટે બે પદ્ધતિઓ, સેન્ટ્રીફ્યુગેશન અને ડીપ ફિલ્ટરેશનનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. લક્ષ્ય બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી શરૂઆતમાં એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી દ્વારા કેપ્ચર કરવામાં આવે છે. બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડી જેવા IgG માટે, પ્રોટીન A એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફીનો ઉપયોગ થાય છે, જ્યારે નોન IgG જેવા બાયસ્પેસિફિક એન્ટિબોડીઝ માટે, લાઇટ ચેઇન આધારિત એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફીનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. પછીથી, એન્ટિબોડી ચોક્કસ સમયગાળા માટે ઓછી pH સ્થિતિમાં ઇન્ક્યુબેટ કરવામાં આવે છે, જેના કારણે વાયરસ પરબિડીયુંની સપાટી પર પ્રોટીન માળખું વિક્ષેપિત થાય છે, જેના કારણે કોષોને ચેપ લગાડવાની ક્ષમતા ગુમાવે છે. હોસ્ટ સેલ પ્રોટીન (HCP) જેવી અશુદ્ધિઓને વધુ દૂર કરવા માટે મધ્યવર્તી ડીપ ફિલ્ટરેશન કરવામાં આવે છે. આયન વિનિમય ક્રોમેટોગ્રાફી જેવી પદ્ધતિઓ દ્વારા એન્ટિબોડીઝની શુદ્ધતામાં સુધારો થાય છે, અને કોઈપણ અવશેષ વાયરસને નેનોફિલ્ટરેશન અથવા અલ્ટ્રાફિલ્ટરેશન તકનીકો દ્વારા દૂર કરવામાં આવે છે. અંતે, નમૂનાને કેન્દ્રિત કરવામાં આવે છે અને યોગ્ય ફોર્મ્યુલેશન બફર સાથે બદલવામાં આવે છે.