મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ડેવલપમેન્ટ સર્વિસ
આલ્ફા લાઇફટેક ઇન્ક.એપિટોપ આગાહી, પેપ્ટાઇડ સંશ્લેષણ, પ્રોટીન અભિવ્યક્તિ, પોલીક્લોનલ અથવા મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ઉત્પાદન તેમજ કોષ સંસ્કૃતિ, જલોદર પ્રવાહી અથવા આખા સીરમમાંથી એન્ટિબોડી શુદ્ધિકરણ પ્રદાન કરી શકે છે.
આલ્ફા લાઇફટેક ઇન્ક.ગ્રાહકોને હાઇબ્રિડોમા કોષો, જીનોમ એડિટિંગ સેલ લાઇન્સ, નોકડાઉન સેલ લાઇન્સ અને ઓવરએક્સપ્રેશન સેલ લાઇન્સ સહિત વિવિધ સ્થિર સેલ લાઇન સેવાઓ પૂરી પાડવામાં અનુભવી છે. અમે દરેક ક્લાયન્ટને અદ્યતન કસ્ટમ સેલ લાઇન સેવાઓ પ્રદાન કરવાનો પ્રયાસ કરીએ છીએ અને અમારી સેવાઓ સાબિત અને વિશ્વસનીય છે.
એન્ટિબોડી વિકાસ વ્યૂહરચના

૧.એન્ટિજેન ડિઝાઇન અને તૈયારી
આ એન્ટિજેન્સ પ્રોટીન, પેપ્ટાઇડ્સ અથવા અન્ય અણુઓ હોઈ શકે છે. ઇમ્યુનોજેન્સ ડિઝાઇન કરવા માટે એક વ્યાપક અભિગમની જરૂર છે જે એન્ટિજેન રચના, ઇમ્યુનોલોજી અને ડિલિવરી સિસ્ટમ્સના જ્ઞાનને એકીકૃત કરે છે. આલ્ફા લાઇફટેક પાસે એન્ટિજેન ડિઝાઇન ટેકનોલોજી છે જે જરૂરિયાતમંદ ગ્રાહકો માટે ઇમ્યુનોજેન્સ ડિઝાઇન કરી શકે છે.
આલ્ફા લાઇફટેક ગ્રાહકોને પસંદગી માટે રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીન ઉત્પાદનો પ્રદાન કરે છે. અમારી પાસે વિવિધ પ્રોટીન અભિવ્યક્તિ પ્રણાલીઓ છે, જેમ કે ઇ. કોલી અભિવ્યક્તિ પ્રણાલી, યીસ્ટ અભિવ્યક્તિ પ્રણાલી, બેક્યુલોવાયરસ-જંતુ અભિવ્યક્તિ પ્રણાલી, સસ્તન પ્રાણી અભિવ્યક્તિ પ્રણાલી, વગેરે, જે તમને સંશોધન માટે જરૂરી રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીન ઉત્પન્ન કરે છે.
૨.પ્રાણી રસીકરણ
આલ્ફા લાઇફટેક ગ્રાહકોને ઇમ્યુનોજેન્સ પ્રદાન કરી શકે છે, અને ઉંદર, સસલા, ઘેટાં, અલ્પાકાસ, ગિનિ પિગ, હેમ્સ્ટર વગેરે જેવા રોગપ્રતિકારક પ્રાણીઓ તમારા માટે પસંદગી માટે ઉપલબ્ધ છે.
૩.મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ઉત્પાદન પદ્ધતિઓ
●હાઇબ્રિડોમા ટેકનોલોજી દ્વારા મેબ્સનું ઉત્પાદન
હાઇબ્રિડોમા એ બે પ્રકારના કોષો, એટલે કે માઉસ માયલોમા સેલ લાઇન અને પ્લાઝ્મા કોષો (લિમ્ફોસાઇટ બી) ના ફ્યુઝન દ્વારા ઉત્પન્ન થતો એક હાઇબ્રિડ કોષ છે, જેમાં હેટરોઝાયગસ કોષ ઇન વિટ્રોમાં રસ ધરાવતા એન્ટિજેન સામે સતત એન્ટિબોડીઝ ઉત્પન્ન કરી શકે છે. હાઇબ્રિડોમા સેલ લાઇનના ઉત્પાદનમાં ત્રણ ભાગોનો સમાવેશ થાય છે: એન્ટિજેન ડિઝાઇન (હેપ્ટેન્સ, નાના અણુઓ અને પેપ્ટાઇડ્સ), પ્રાણી રોગપ્રતિરક્ષા, કોષ ફ્યુઝન અને હકારાત્મક ક્લોન સ્ક્રીનીંગ. અનન્ય રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરીને, આપણે અપવાદરૂપે ઉચ્ચ સેલ-ફ્યુઝન કાર્યક્ષમતા (દર હજાર બી કોષો દીઠ 1-10 હાઇબ્રિડોમા) અને ઉચ્ચ એન્ટિબોડી ટાઇટર્સ મેળવીએ છીએ, જે બાયોકેમિકલ સ્ક્રીનીંગ, ઇન-વિટ્રો સેલ-આધારિત પરીક્ષણો અને પ્રાણી અભ્યાસો સહિત અનુગામી વિશ્લેષણાત્મક પરીક્ષણોમાં આપણા સફળતા દરને મહત્તમ બનાવે છે.
●ફેજ ડિસ્પ્લે ટેકનોલોજી દ્વારા મેબ્સનું ઉત્પાદન
ફેજ ડિસ્પ્લે મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ ઉત્પન્ન કરવા માટે બીજી પદ્ધતિ પ્રદાન કરે છે. બી-લિમ્ફોસાઇટ્સને પ્રાણીઓના લોહીમાંથી અલગ કરવામાં આવે છે અને તેમના mRNA કાઢવામાં આવે છે. PCR દ્વારા, આ mRNA ને cDNA માં રૂપાંતરિત કરવામાં આવે છે, જે બધા VH અને VL સેગમેન્ટ્સને વિસ્તૃત કરે છે. આ સેગમેન્ટ્સને પછી વેક્ટરમાં ક્લોન કરવામાં આવે છે, સામાન્ય રીતે સિંગલ-ચેઇન વેરિયેબલ ફ્રેગમેન્ટ્સ (scFv) તરીકે, બેક્ટેરિયોફેજના PIII પ્રોટીનની સાથે. ત્યારબાદ, આ રચનાનો ઉપયોગ E. coli ને ચેપ લગાડવા માટે થાય છે, જેના પરિણામે સહાયક ફેજ સાથે ઇનોક્યુલેશન દ્વારા આશરે 10^10 કોષો ધરાવતી લાઇબ્રેરી બનાવવામાં આવે છે. E. coli પછી તેના કોટના ભાગ રૂપે VH અને VL સેગમેન્ટ્સને આશ્રય આપતા બેક્ટેરિયોફેજને સ્ત્રાવ કરવામાં સક્ષમ છે. આ પછી, રસના એન્ટિજેનને લક્ષ્ય બનાવતા ચોક્કસ VH અને VL સેગમેન્ટ્સ પસંદ કરી શકાય છે અને E. coli ને બેક્ટેરિયોફેજ સાથે ફરીથી ઇનોક્યુલેટ કરવા માટે ઉપયોગમાં લઈ શકાય છે. પ્લાઝમિડ ધરાવતા કોષોને પછી અલગ અને ક્રમબદ્ધ કરવામાં આવે છે.
૪.ફ્યુઝન સ્ક્રીનીંગ
●સેલ ફ્યુઝન અને પસંદગી
પછી એકત્રિત B કોષોને માયલોમા કોષો સાથે જોડવામાં આવે છે, જે કેન્સરગ્રસ્ત કોષો છે જે સંસ્કૃતિમાં અનિશ્ચિત સમય માટે પ્રજનન કરી શકે છે. આ ફ્યુઝન સામાન્ય રીતે પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ (PEG) ફ્યુઝન જેવી તકનીકનો ઉપયોગ કરીને પ્રાપ્ત થાય છે.
ફ્યુઝન પછી, હાઇબ્રિડોમા કોષોને એક પસંદગીયુક્ત માધ્યમમાં સંવર્ધન કરવામાં આવે છે જે ફક્ત હાઇબ્રિડોમાને જ ટકી રહેવા દે છે. આ માધ્યમમાં સામાન્ય રીતે એમિનોપ્ટેરિન હોય છે, જે અનફ્યુઝ્ડ માયલોમા કોષોના વિકાસને અટકાવે છે.
●સ્ક્રીનીંગ અને ક્લોનિંગ
પરિણામી હાઇબ્રિડોમા કોષોનું લક્ષ્ય એન્ટિજેન માટે વિશિષ્ટ એન્ટિબોડીઝના ઉત્પાદન માટે સ્ક્રીનીંગ કરવામાં આવે છે. આ સામાન્ય રીતે એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બેન્ટ એસે (ELISA), વેસ્ટર્ન બ્લોટ, ઇમ્યુનોપ્રીસિપિટેશન અને ફ્લો સાયટોમેટ્રી જેવી તકનીકોનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવે છે.
એકવાર એન્ટિબોડી ઉત્પન્ન કરતા હાઇબ્રિડોમા કોષો ઓળખાઈ જાય, પછી તેમને સમાન કોષોની વસ્તી બનાવવા માટે ક્લોન કરવામાં આવે છે. આ ખાતરી કરે છે કે દરેક હાઇબ્રિડોમા કોષ દ્વારા ઉત્પાદિત એન્ટિબોડી સમાન છે.
૫.એન્ટિબોડી કાર્યાત્મક ચકાસણી
આલ્ફા લાઇફટેક મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝનું લક્ષણ દર્શાવવા અને એન્ટિબોડી વિશિષ્ટતા, આકર્ષણ અને કાર્યક્ષમતાની પુષ્ટિ કરવા માટે એન્ટિબોડી ફંક્શનલ વેલિડેશન, જેમ કે વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ, ઇમ્યુનોહિસ્ટોકેમિસ્ટ્રી અથવા ફંક્શનલ એસે પ્રદાન કરે છે.
6. એન્ટિબોડી ઑપ્ટિમાઇઝેશન
પ્રોટીન A અથવા પ્રોટીન G એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફી જેવી તકનીકોનો ઉપયોગ કરીને કલ્ચર સુપરનેટન્ટમાંથી એન્ટિબોડીઝનું શુદ્ધિકરણ, અને આલ્ફા લાઇફટેક એન્ટિબોડી એફિનિટી સુધારવા માટે એન્ટિબોડી ફેરફાર પદ્ધતિઓ પણ પ્રદાન કરી શકે છે.
7. એન્ટિબોડી ઉત્પાદન
આલ્ફા લાઇફટેક હાઇ-થ્રુપુટ સ્ક્રીનીંગ એપ્લિકેશનો અને મોટા પાયે ઉત્પાદન માટે ઉમેદવાર એન્ટિબોડીઝનું મૂલ્યાંકન કરી શકે છે.
- ૧
યોગ્ય ફ્યુઝન હાઇબ્રિડોમા કેવી રીતે પસંદ કરવો?
ફ્યુઝન પ્રક્રિયા દરમિયાન, 10-15 96-વેલ માઇક્રોટાઇટર પ્લેટોને ફ્યુઝન હાઇબ્રિડ મિશ્રણ સાથે સીડ કરવામાં આવે છે. દરેક પ્લેટને HAT-IMDM સિલેક્શન મીડિયા આપવામાં આવે છે અને 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ તાપમાને કાર્બન ડાયોક્સાઇડ ઇન્ક્યુબેટરમાં રાખવામાં આવે છે. ફ્યુઝન પછી 9-14 દિવસ પછી, હાઇબ્રિડ સુપરનેટન્ટ્સનું રસ ધરાવતા ચોક્કસ એન્ટિબોડીની હાજરી માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવે છે.
- ૨
પસંદગી કાર્યક્ષમતા કેવી રીતે વધારવી?
પ્લાઝ્મા કોષોનું તેમના માયલોમા સમકક્ષો સાથે મિશ્રણ 100% અસરકારક નથી. શ્રેષ્ઠ પરિસ્થિતિઓ અને સૌથી અસરકારક ઉત્તેજના હેઠળ પણ, કોષ ફ્યુઝન હજુ પણ અસંમિશ્રિત અને સંમિશ્રિત કોષોનું મિશ્રણ ઉત્પન્ન કરે છે જેને અલગ કરવાની જરૂર છે. પસંદગી પ્રક્રિયાની કાર્યક્ષમતા સુધારવા માટે, ફ્યુઝન માટે ઉપયોગમાં લેવાતા માયલોમા કોષોમાં HGPRT નો અભાવ હોય છે, જે ન્યુક્લિયોટાઇડ બચાવ માર્ગમાં એક મુખ્ય એન્ઝાઇમ છે. ત્યારબાદ મિશ્રણને HAT માધ્યમમાં સંવર્ધન કરવામાં આવ્યું હતું, જ્યાં ફક્ત HGPRT એન્ઝાઇમ ધરાવતા કોષો, હાઇબ્રિડોમાસ જે પ્લાઝ્મા કોષોમાંથી HGPRT વારસામાં મેળવ્યા હતા, તે સધ્ધર હતા.
- ૩
એન્ટિબોડી પ્રવૃત્તિ માટે હાઇબ્રિડોમા સેલ લાઇન્સ કેવી રીતે તપાસવી?
હાઇબ્રિડ જાતોનું મૂલ્યાંકન એક મહત્વપૂર્ણ પગલું છે. સામાન્ય રીતે, હાઇબ્રિડોમા, ક્લોન અને સબક્લોન સુપરનેટન્ટ સ્ક્રીનીંગ એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બેન્ટ એસે (ELISA), વેસ્ટર્ન બ્લોટ એસે અને ફ્લોરોસેન્સ એક્ટિવેટેડ સેલ સોર્ટિંગ (FACS) દ્વારા પૂરી પાડવામાં આવે છે. અમે સુપરનેટન્ટની બધી સ્ક્રીનીંગ અમારી પોતાની પ્રયોગશાળામાં કરવાનું પસંદ કરીશું.
- ૪
એન્ટિબોડી પ્રવૃત્તિ સ્ક્રીનીંગ કેવી રીતે કરવી તે અંગે વિગતવાર સૂચનાઓ આપો?
હાઇબ્રિડોમા સુપરનેટ્સનું પરીક્ષણ 500 થી 1,440 નમૂનાઓ સુધીનું હોઈ શકે છે અને 9 થી 14 દિવસ સુધીમાં પરીક્ષણ માટે તૈયાર થઈ જશે. આપણે ત્રણ થી પાંચ દિવસના સમયગાળામાં ઉભા થઈ શકીએ છીએ અથવા બધા એક જ દિવસે તૈયાર થઈ શકીએ છીએ, તેથી ક્લાયન્ટ લેબ માટે પસંદગીના કાર્યકારી ચોક્કસ ગૌણ સ્ક્રીનીંગ પરીક્ષણો સાથે અઠવાડિયા અગાઉથી તૈયાર રહેવું મહત્વપૂર્ણ છે.
- ૫
પોઝિટિવ હાઇબ્રિડોમાને સબક્લોન કરવાની જરૂર કેમ પડે છે?
પ્રારંભિક ELISA સ્ક્રીનીંગ પ્રક્રિયા દરમિયાન પોઝિટિવ કુવાઓ ઓળખાયા પછી, સબક્લોનિંગ પ્રક્રિયાની તૈયારી માટે હાઇબ્રિડોમાસને મોટા જથ્થામાં, એટલે કે 24-કુવા પ્લેટોમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા. સ્થિર મોનોક્લોન્સના અલગતાને સુનિશ્ચિત કરવા માટે હાઇબ્રિડોમાસનું સબક્લોનિંગ સામાન્ય રીતે મર્યાદિત મંદન પદ્ધતિ દ્વારા કરવામાં આવે છે. આ તકનીકમાં હાઇબ્રિડોમા કલ્ચરને પાતળું કરવું અને મોનોક્લોનિલિટી (કુવા દીઠ એક કોષ) પ્રાપ્ત કરવા માટે તેમને 96-કુવા પ્લેટોમાં વિખેરવાનો સમાવેશ થાય છે. મિશ્ર હાઇબ્રિડોમા વસ્તી વિકસાવવાનું જોખમ ઘટાડવા માટે ઓછામાં ઓછા બે મર્યાદિત મંદન કરવા જોઈએ.
- 6
એન્ટિબોડી શોધ માટે હાઇબ્રિડોમા ટેકનોલોજીનો ઉપયોગ કરવાના ફાયદા શું છે?
હાઇબ્રિડ સેલ લાઇન્સની પ્રશંસા કરવામાં આવી છે કારણ કે તેઓ સૌથી વધુ ખર્ચ-અસરકારક રીતે ઉચ્ચ આકર્ષણ, સ્થિરતા અને વિશિષ્ટતા સાથે એન્ટિબોડીઝ ઉત્પન્ન કરવાની ક્ષમતા ધરાવે છે.

માઉસ મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ઉત્પાદન સેવા
આલ્ફા લાઇફટેક વિશ્વભરના વૈજ્ઞાનિકોને ઉંદર હાઇબ્રિડોમાની સંપૂર્ણ સેવા પૂરી પાડી શકે છે. આ સેવાઓમાં એન્ટિજેન ડિઝાઇન/સંશ્લેષણ, ઉંદર રોગપ્રતિકારક શક્તિ, કોષ ફ્યુઝન અને હાઇબ્રિડોમા પસંદગી/લાક્ષણિકતાઓનો સમાવેશ થાય છે, જેની મદદથી આપણે દરેક પ્રોજેક્ટમાં નિષ્ણાત બની શકીએ છીએ.
વધુ વાંચો
રેબિટ મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી ઉત્પાદન સેવા
આલ્ફા લાઇફટેક પાસે એન્ટિબોડીઝના ક્ષેત્રમાં ઘણા વર્ષોનો અનુભવ છે અને તેણે એક વ્યાપક સસલાના મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડી વિકાસ પ્લેટફોર્મ બનાવ્યું છે.
વધુ વાંચો


૨૦૧૮-૦૭-૧૬ 

