फेज डिस्प्ले तकनीक का उद्देश्य विदेशी लक्ष्य जीन को फेज कैप्सिड प्रोटीन की विशिष्ट स्थिति में डालना है, और फेज के सामान्य कार्य को प्रभावित किए बिना फेज की सतह पर विदेशी जीन को व्यक्त करना है। स्क्रीनिंग के कई दौर के बाद, मजबूत विशिष्टता और उच्च जैविक गतिविधि वाला लक्ष्य प्रोटीन अंततः प्राप्त किया गया।

इस तकनीक का उपयोग करके उच्च क्षमता वाली एंटीबॉडी लाइब्रेरी बनाई जा सकती है। स्क्रीनिंग चक्र संक्षिप्त है, परिचालन प्रक्रिया सीधी है, और अनुप्रयोगों की सीमा व्यापक है, जिससे लक्षित पेप्टाइड्स या प्रोटीन के लिए इष्टतम अनुक्रमों की पहचान की जा सकती है। वायरस से संबंधित अनुप्रयोगों में, शोधकर्ता बड़ी एंटीबॉडी लाइब्रेरी की स्क्रीनिंग करके महत्वपूर्ण वायरल एपिटोप्स से जुड़ने वाले एंटीबॉडी की खोज कर सकते हैं। यह प्रक्रिया वायरस के प्रवेश, प्रतिकृति या प्रतिरक्षा से बचने के तंत्र को बाधित कर सकती है, जिससे रोग उपचार के लिए एक आधार तैयार होता है।

फेज डिस्प्ले तकनीक का उपयोग हाइब्रिडोमा तकनीक की तुलना में अधिक व्यापक रूप से किया जाता है, जो विशिष्ट इम्युनोजेन्स के खिलाफ एंटीबॉडी की एक छोटी मात्रा के उत्पादन तक सीमित है। इसके विपरीत, फेज डिस्प्ले तकनीक विभिन्न प्रतिरक्षा प्रजातियों से प्राप्त एंटीबॉडी की एक पूरी लाइब्रेरी प्रस्तुत कर सकती है।

फेज डिस्प्ले प्रौद्योगिकी के अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला है, जिसमें रोगजनक सूक्ष्मजीवों के रिसेप्टर्स की जांच, प्रोटीन इंटरैक्शन का अध्ययन, कोशिकाओं के बीच संकेत संचरण पर नज़र रखना, पशु रोगों का निदान करना और टीकों का विकास करना आदि शामिल हैं।

फेज डिस्प्ले तकनीक कई फायदे प्रदान करती है और इसे विभिन्न क्षेत्रों में लागू किया जा सकता है। हालांकि, फेज डिस्प्ले विधि का उपयोग करके पुनः संयोजक एंटीबॉडी विकसित करने में प्राथमिक चुनौती प्रक्रिया से जुड़ी जटिलता और लागत है। इस दृष्टिकोण के लिए वांछित एंटीबॉडी की पहचान और विशेषता के लिए प्रतिरक्षात्मक, जैव रासायनिक और जैवभौतिक विश्लेषण के साथ-साथ उत्परिवर्तन, क्लोनिंग और अभिव्यक्ति सहित आणविक जीव विज्ञान तकनीकों के एकीकरण की आवश्यकता होती है।

एंटीजन प्रेजेंटेशन एक बहुत ही महत्वपूर्ण कड़ी है। एंटीजन प्रेजेंटेशन के तरीकों में मुख्य रूप से प्रत्यक्ष लेपित एंटीजन प्रेजेंटेशन, अप्रत्यक्ष लेपित एंटीजन प्रेजेंटेशन, संपूर्ण सेल स्क्रीनिंग के माध्यम से एंटीजन प्रेजेंटेशन, लिपोसोम, नैनो-फॉस्फोलिपिड डिस्क और वीएलपी के माध्यम से एंटीजन प्रेजेंटेशन शामिल हैं।

प्रत्यक्ष कोटिंग विधि अपेक्षाकृत सरल है, लेकिन एंटीजन संरचना को बदलना आसान है, और अप्रत्यक्ष कोटिंग ऑपरेशन जटिल है, लेकिन यह एंटीजन संरचना को बनाए रख सकता है और प्रस्तुति दक्षता में सुधार कर सकता है। सेल स्क्रीनिंग विवो में वास्तविक दृश्य का अनुकरण कर सकती है, लेकिन गैर-विशिष्ट बंधन की समस्या है। नैनो-फॉस्फोलिपिड डिस्क का आकार छोटा, उच्च वितरण दक्षता और अच्छी स्थिरता है; वीएलपी को एंटीजन के साथ जोड़ा जाता है या एंटीजन के साथ लपेटा जाता है, जिसमें उच्च प्रतिरक्षात्मकता और अच्छी सुरक्षा होती है, और यह एक मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को ट्रिगर कर सकता है।

यदि सांद्रता बहुत कम है, तो फेज के साथ बंधन की संभावना कम हो जाएगी, जिसके परिणामस्वरूप स्क्रीनिंग दक्षता कम हो जाएगी। इसके विपरीत, अत्यधिक उच्च सांद्रता गैर-विशिष्ट बंधन की संभावना को बढ़ा सकती है, पृष्ठभूमि संकेत को बढ़ा सकती है, और सकारात्मक क्लोन की पहचान में बाधा डाल सकती है।

उच्च तापमान, मजबूत एसिड और क्षार से बचने के लिए हल्के फिक्सिंग विधि को अपनाया जा सकता है। प्रतिजन संरचना को होने वाले नुकसान को कम करने के लिए अप्रत्यक्ष कोटिंग विधि और बायोटिन-स्ट्रेप्टाविडिन प्रणाली का उपयोग किया गया। यदि प्रतिजन एक झिल्ली प्रोटीन है, तो इसे बरकरार कोशिकाओं की सतह पर प्रदर्शित किया जा सकता है या झिल्ली पर्यावरण का अनुकरण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, जैसे कि नैनो-डिस्क, इसकी प्राकृतिक झिल्ली प्रोटीन संरचना को बनाए रखने के लिए।

एलिसा, वेस्टर्न ब्लॉटिंग (डब्ल्यूबी), और इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आईएफ) जैसे नियमित प्रयोगों के अलावा, सरफेस प्लाज़्मोन रेज़ोनेंस (एसपीआर) और बायो-लेयर इंटरफेरोमेट्री (बीएलआई) पहचान तकनीकों को वास्तविक समय में एंटीबॉडी और एंटीजन के बंधन और पृथक्करण प्रक्रियाओं की निगरानी के लिए नियोजित किया जा सकता है, जिससे आत्मीयता और गतिज मापदंडों का निर्धारण संभव हो जाता है।

फेज डिस्प्ले का उपयोग एंटीबॉडी उत्पादक प्रजातियों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए उच्च-संबंधी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पन्न करने के लिए किया जा सकता है, जिसमें मानव, चूहे, खरगोश, मुर्गियां, ऊंट, अल्पाका, गाय, कुत्ते, भेड़, बंदर और शार्क शामिल हैं, लेकिन इन्हीं तक सीमित नहीं हैं।

माउस एंटीबॉडी लाइब्रेरी की निर्माण तकनीक अच्छी तरह से स्थापित, लागत प्रभावी है, और इसकी प्रयोगात्मक अवधि कम है, जो इसे प्रारंभिक एंटीबॉडी स्क्रीनिंग और बुनियादी शोध के लिए उपयुक्त बनाती है। खरगोश एंटीबॉडी मजबूत आत्मीयता और विशिष्टता प्रदर्शित करते हैं, माउस एंटीबॉडी की तुलना में एक व्यापक एपिटोप पहचान रेंज के साथ। मानव एंटीबॉडी को सीधे मानव एंटीबॉडी लाइब्रेरी से प्राप्त किया जा सकता है, जिससे संभावित प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं से बचा जा सकता है जो मानव शरीर में विषम एंटीबॉडी को प्रशासित करने पर हो सकती हैं। यह दृष्टिकोण दवा अनुसंधान और विकास में महत्वपूर्ण मूल्य रखता है, विशेष रूप से चिकित्सीय एंटीबॉडी के निर्माण में।

पशु प्रतिरक्षाजनों को आम तौर पर प्रोटीन प्रतिजन, पॉलीपेप्टाइड प्रतिजन, न्यूक्लिक एसिड प्रतिजन और रोगज़नक़-संबंधी प्रतिजन में विभाजित किया जाता है, जिनमें रोगज़नक़-संबंधी प्रतिजन में वायरस प्रतिजन (पूर्ण वायरस कण, वायरस प्रोटीन, वायरस गैर-संरचनात्मक प्रोटीन, आदि), जीवाणु प्रतिजन (पूर्ण जीवाणु अर्क, कोशिका दीवार घटक, स्रावित प्रोटीन, विष, आदि) और परजीवी प्रतिजन शामिल हैं।

प्रतिरक्षा प्रतिजनों को पुनः संयोजक प्रोटीनों से प्रतिस्थापित करके तथा अग्नि-निवारक विषाणु कणों को विषाणुओं के संरचनात्मक प्रोटीनों से प्रतिस्थापित करके प्रतिरक्षाजनों को समायोजित करें। प्रायोगिक डिजाइन को समायोजित करें तथा प्रतिरक्षा खुराक को संशोधित करें।

एंटीजन को वाहक प्रोटीन, जैसे कि गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन के साथ युग्मित करके प्रतिरक्षाजन्यता को बढ़ाया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, फ्रायंड के सहायक और एल्युमिनियम सहायक सहित प्रतिरक्षा सहायकों को विवो में निवास समय को बढ़ाने और प्रतिरक्षा कोशिकाओं की सक्रियता और प्रसार को प्रोत्साहित करने के लिए नियोजित किया जा सकता है, जिससे प्रतिरक्षाजन्यता में सुधार होता है।

फेज एंटीबॉडी लाइब्रेरी विविध फेज एंटीबॉडी का एक संग्रह है जो एंटीबॉडी से परिवर्तनशील क्षेत्र जीन के एक पूरे सेट को फेज वैक्टर में इकट्ठा करके और उन्हें फेज की सतहों पर व्यक्त करके बनाया जाता है। इस प्रक्रिया के परिणामस्वरूप फेज एंटीबॉडी लाइब्रेरी का निर्माण होता है।

फेज डिस्प्ले की सामान्य प्रक्रिया में कई महत्वपूर्ण चरण शामिल हैं: प्रतिरक्षित जानवरों से परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (PBMC) को निकालना, कुल RNA को अलग करना और इसे पूरक DNA (cDNA) में बदलना, पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (PCR) तकनीक का उपयोग करके लक्ष्य जीन को बढ़ाना, लक्ष्य जीन को फेज वेक्टर में क्लोन करना और अभिव्यक्ति के लिए वेक्टर को मेजबान कोशिका में बदलना। इस प्रक्रिया के परिणामस्वरूप एक फेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का निर्माण होता है, जो उच्च-आत्मीयता वाले एंटीबॉडी की तेजी से पहचान कर सकती है। इसके बाद, यह लाइब्रेरी टीकों, चिकित्सीय दवाओं और नैदानिक ​​अभिकर्मकों के विकास के लिए एक मूल्यवान संसाधन के रूप में काम कर सकती है।

एंटीबॉडी लाइब्रेरी के स्रोत के अनुसार, फेज एंटीबॉडी लाइब्रेरी को प्रतिरक्षा फेज एंटीबॉडी लाइब्रेरी और मूल फेज एंटीबॉडी लाइब्रेरी में वर्गीकृत किया जा सकता है। इन दो प्रकारों के बीच प्राथमिक अंतर यह है कि जानवरों को टीका लगाया गया है या नहीं। इसके अतिरिक्त, मूल एंटीबॉडी लाइब्रेरी को अर्ध-संश्लेषण या संश्लेषण के माध्यम से उत्पन्न किया जा सकता है।

एंटीबॉडी लाइब्रेरी की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए दो प्राथमिक सूचकांक हैं: भंडारण क्षमता और विविधता। उच्च विविधता के साथ संयुक्त एक बड़ी भंडारण क्षमता, उच्च आत्मीयता और विशिष्टता दोनों के साथ एंटीबॉडी की प्रभावी स्क्रीनिंग सुनिश्चित करती है।

जैविक निक्षालन की प्रक्रिया में, डिस्प्ले लाइब्रेरी को निश्चित लक्ष्यों के साथ इनक्यूबेट किया जाता है और फिर गैर-प्रतिक्रियाशील फेज को हटाने के लिए बड़े पैमाने पर धोया जाता है। संयुग्मों को आम तौर पर एक अम्लीय या उच्च-नमक समाधान का उपयोग करके निक्षालन किया जाता है और बाद में संवर्धन के लिए उपयुक्त मेजबान कोशिकाओं में प्रवर्धित किया जाता है। स्क्रीनिंग के 3 से 5 दौर के बाद, उच्च आत्मीयता वाले एंटीबॉडी प्राप्त होते हैं।

फेज स्क्रीनिंग विधियों में मुख्य रूप से सॉलिड-फ़ेज़ पैनिंग, लिक्विड-फ़ेज़ स्क्रीनिंग और सेल-आधारित स्क्रीनिंग शामिल हैं। उपयुक्त स्क्रीनिंग विधि के चयन में लक्ष्य अणुओं की विशेषताओं, स्क्रीनिंग प्रक्रिया के उद्देश्यों और प्रयोगशाला के वातावरण पर विचार किया जाना चाहिए।

सकारात्मक स्क्रीनिंग फेज एंटीबॉडी की स्क्रीनिंग के लिए सबसे बुनियादी तरीका है जो लक्ष्य प्रोटीन से जुड़ते हैं। नकारात्मक स्क्रीनिंग गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी को खत्म करने का काम करती है। फेज एंटीबॉडी स्क्रीनिंग प्रक्रिया के दौरान, लक्ष्य एंटीजन लेबल, सामग्री, या लक्ष्य एंटीजन के साथ संरचनात्मक समानता वाले अन्य एंटीजन से हस्तक्षेप के कारण गैर-विशिष्ट एंटीबॉडी की पहचान की जा सकती है। ऐसे मामलों में, नकारात्मक स्क्रीनिंग स्क्रीनिंग प्रक्रिया की दक्षता को बढ़ा सकती है।

एंटीबॉडी सत्यापन के तरीकों में आमतौर पर एलिसा, वेस्टर्न ब्लॉटिंग (डब्ल्यूबी), फ्लो साइटोमेट्री, इम्यूनोप्रीसिपिटेशन (आईपी), इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आईएफ), इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और कई अन्य प्रयोगात्मक तकनीकें शामिल हैं। अल्फा लाइफटेक के पास एंटीबॉडी का पता लगाने का व्यापक अनुभव है और उसके पास एक पेशेवर प्रयोगात्मक टीम है, जो बाद के प्रयोगों में एंटीबॉडी की प्रभावशीलता सुनिश्चित करती है।