एंटीबॉडी मानवीकरण विकास मंच
मानवकृत एंटीबॉडी मानव प्रतिरक्षा प्रणाली से न्यूनतम या कोई प्रतिक्रिया नहीं देते हैं। कॉग्निटिव मार्केट रिसर्च के अनुसार, वैश्विक एंटीबॉडी मानवीकरण बाजार का आकार 2024 में 92.5 मिलियन अमरीकी डॉलर है और 2024 से 2031 तक 13.00% की चक्रवृद्धि वार्षिक वृद्धि दर (CAGR) से विस्तार होगा। अल्फा लाइफटेक के पास एक परिपक्व एंटीबॉडी मानवीकरण प्लेटफ़ॉर्म है, जिसमें मानवकृत एंटीबॉडी के लिए 98% से अधिक की सफलता दर है। हमारे पास CDR ग्राफ्टिंग, SDR ग्राफ्टिंग, चेन शफलिंग, फेज डिस्प्ले आदि सहित कई मानवीकरण रणनीतियाँ हैं, जिन्हें आपकी प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार चुना जा सकता है। हम न केवल कई प्रजातियों, जैसे कि चूहे, खरगोश, अल्पाका, ऊँट, आदि से एंटीबॉडी का मानवीकरण प्रदान कर सकते हैं, बल्कि विभिन्न रूपों, जैसे कि scFv, Fab और नैनोबॉडीज़ में एंटीबॉडी का मानवीकरण भी कर सकते हैं। हमारे पास एंटीबॉडी उत्पादन, शुद्धिकरण और सत्यापन सेवाएँ प्रदान करने के लिए पेशेवर तकनीकी कर्मचारी हैं, जिनमें माउस मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पादन, काइमेरिक एंटीबॉडी उत्पादन, मानवीकृत एंटीबॉडी अभिव्यक्ति और शुद्धिकरण, और मानवीकृत एंटीबॉडी लक्षण वर्णन और विश्लेषण शामिल हैं। उच्च सफलता दर, उच्च शुद्धता और कम प्रतिरक्षाजन्यता के साथ, हम मानवीकृत एंटीबॉडी उत्पादन की गारंटी देते हैं।
एंटीबॉडी मानवीकरण का परिचय
मोनोक्लोनल एंटीबॉडी थेरेपी का उपयोग ऑटोइम्यून बीमारियों, कैंसर और अन्य बीमारियों के इलाज के लिए किया जा सकता है। मोनोक्लोनल एंटीबॉडी चूहों या अन्य जानवरों को प्रतिरक्षित करके बनाए जाते हैं। जब मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पादन के बाद के चरण में बीमारियों के इलाज के लिए उपयोग किया जाता है, तो गैर-मानव एंटीबॉडी की प्रतिरक्षात्मकता को नजरअंदाज नहीं किया जा सकता है। मानवीकरण का मुख्य सिद्धांत गैर-मानव ढांचे के अवशेषों, जैसे कि हाइपरवेरिएबल पूरकता-निर्धारण क्षेत्रों (सीडीआर) को मानव ढांचे में एकीकृत करना है, जिससे ऐसे अनुक्रम उत्पन्न होते हैं जो प्रतिरक्षात्मकता को रोकते हुए मूल एंटीबॉडी विशेषताओं को बनाए रखते हैं। माउस टीकाकरण और उसके बाद माउस अनुक्रम मानवीकरण चिकित्सीय एंटीबॉडी की खोज के लिए दो मुख्य मार्ग बने हुए हैं, जो मुख्य रूप से कई चरणों से गुजरते हैं: माउस एंटीबॉडी उत्पादन, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी चिमराइजेशन, चिमेरिक म्यूरिन मानव मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और पूरी तरह से मानवीकृत मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की विकास प्रक्रिया। वर्तमान में, अनुसंधान में मुख्य रूप से ट्रांसजेनिक चूहों (मानव बी कोशिका जीन को चूहों में स्थानांतरित करना), खमीर या फेज डिस्प्ले तकनीक का उपयोग करके उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग, सीडीआर ग्राफ्टिंग (मानव अनुक्रमों में पैतृक सीडीआर डालना), प्रत्यारोपण-विशिष्ट निर्धारण अवशेष (एसडीआर), फ्रेमवर्क शफलिंग और अन्य विधियां शामिल हैं।

चित्र 1: म्यूरिन एंटीबॉडीज़ (हरा डोमेन) से लेकर पूर्णतः मानव एंटीबॉडीज़ तक एंटीबॉडी मानवीकरण का योजनाबद्ध अवलोकन।
एंटीबॉडी मानवीकरण रणनीति
सीडीआर ग्राफ्टिंग
सीडीआर ग्राफ्टिंग पुनः संयोजक डीएनए प्रौद्योगिकी पर आधारित स्तनधारी अभिव्यक्ति प्रणाली के माध्यम से प्राप्त की जाती है, और इसके मुख्य चरण हैं:
(1) चूहों (या गैर-मानव स्रोतों) में संबंधित एंटीबॉडी विकसित करें, डीएनए एन्कोडिंग एंटीबॉडी को अलग करें, और उन्हें अनुक्रमण के लिए वैक्टर में क्लोन करें (या सीधे एकल-कोशिका अनुक्रमण करें)।
(2) एंटीबॉडी सीडीआर के अनुरूप डीएनए अनुक्रम निर्धारित करना और लक्ष्य बंधन विशिष्टता निर्धारित करना;
(3) गैर-मानव सीडीआर को प्रत्यारोपित करने और एक नए एंटीबॉडी जीन का निर्माण करने के लिए मानव फ्रेमवर्क क्षेत्र (एफआर) का चयन करें।
(4) लूप को स्थिर करने और अंतिम मानवकृत एंटीबॉडी की आत्मीयता या संरचनात्मक अखंडता के नुकसान को रोकने के लिए रिकवरी म्यूटेशन उत्पन्न करने के लिए गैर-मानव सीडीआर और मानव एफआर के बीच संघर्ष का त्रि-आयामी विश्लेषण करें।

चित्र 2: पूरकता निर्धारण क्षेत्र (सीडीआर) ग्राफ्टिंग का योजनाबद्ध अवलोकन।
फ्रेमवर्क फेरबदल
फ्रेमवर्क शफलिंग उच्च-आत्मीयता एंटीबॉडी प्राप्त करने के लिए फेज डिस्प्ले तकनीक और फेज लाइब्रेरी स्क्रीनिंग तकनीक पर निर्भर करता है। मानव एंटीबॉडी हेवी चेन फ्रेमवर्क को एन्कोड करने वाले ओलिगोन्यूक्लियोटाइड्स का उपयोग टेम्प्लेट के रूप में किया जाता है, सीडीआर क्षेत्रों को प्राइमर के रूप में एन्कोड किया जाता है, और पीसीआर उत्पाद को विकृत करने के लिए पीसीआर प्रवर्धन किया जाता है ताकि सिंगल-स्ट्रैंडेड डीएनए प्राप्त किया जा सके। स्ट्रेप्टाविडिन से शुद्ध किए गए वीएल और वीएच जीन के सिंगल-स्ट्रैंडेड डीएनए को टी4 डीएनए लाइगेज और प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग करके वेक्टर पर पुनर्निर्मित किया जाता है, बैक्टीरियोफेज के साथ इनक्यूबेट किया जाता है, और बैक्टीरियोफेज द्वारा प्रवर्धित किया जाता है, और एक फेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का निर्माण किया जाता है। संबंधित एंटीजन के साथ स्क्रीनिंग के तीन दौर किए जाते हैं, और सकारात्मक क्लोन को अंततः एलिसा और अन्य तरीकों का उपयोग करके सत्यापित किया जाता है।

चित्र 3: पूरकता निर्धारण क्षेत्र (सीडीआर) ग्राफ्टिंग और फ्रेमवर्क (एफआर) शफलिंग मानवीकरण रणनीतियों का योजनाबद्ध चित्रण। (ए) सीडीआर ग्राफ्टिंग की मुख्य प्रक्रिया। (बी) एफआर शफलिंग की मुख्य प्रक्रिया। (संदर्भ स्रोत:वांग योंगमेई, एट अल., पीडी-1 म्यूरिन एंटीबॉडी के मानवीकरण में "फ्रेमवर्क शफलिंग" और "सीडीआर ग्राफ्टिंग" की तुलना।)
फेज प्रदर्शन
मानवकृत एंटीबॉडी का उत्पादन बैक्टीरियोफेज की सतह पर विशिष्ट एंटीबॉडी प्रदर्शित करने की विधि पर आधारित है, जिसका निर्माण मुख्य रूप से मानव एंटीबॉडी फेज लाइब्रेरी के माध्यम से किया जाता है। लाइब्रेरी का स्रोत फेज लाइब्रेरी बनाने के लिए मानव परिधीय रक्त से अलग किए गए PBMCs हैं, जिनसे संबंधित अनुक्रमों की जांच की जाती है। इस अनुक्रम में पूरा मानव अनुक्रम होता है, लेकिन उत्पादित एंटीबॉडी एंटीबॉडी के टुकड़े होते हैं, जैसे कि scFv, Fab और nanobody।
एंटीबॉडी मानवीकरण सेवा वर्कफ़्लो
सेवा चरण | क्यूसी मानक | समय |
---|---|---|
एंटीबॉडी अलगाव | शुद्धता >95% | 1-2 सप्ताह |
अनुक्रम विश्लेषण | गैर-मानव अनुक्रमों की सटीक पहचान | 1 सप्ताह |
सीडीआर ग्राफ्टिंग और फ्रेमवर्क ग्राफ्टिंग | सफल एकीकरण और अभिव्यक्ति | 2-3 सप्ताह |
अभिव्यक्ति और शुद्धिकरण | उच्च उपज और शुद्धता | 2-3 सप्ताह |
कार्यात्मक सत्यापन | आत्मीयता और विशिष्टता मूल्यांकन | 1 सप्ताह |
यदि आपके कोई प्रश्न हों तो कृपया किसी भी समय हमसे संपर्क करें।
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