एप्टामर अभिलक्षण विश्लेषण सेवा

अनुकूलित एप्टामर बंधुता को एप्टामर बंधन परख की प्रासंगिक तकनीकों के द्वारा सत्यापित किया गया था। उदाहरणों में आइसोथर्मल टाइट्रेशन कैलोरीमेट्री (आईटीसी), फ्लो साइटोमेट्री (एफसीएम), और सरफेस प्लाज़्मोन रेजोनेंस (एसपीआर), माइक्रोफ्लुइडिक्स आदि शामिल हैं। एप्टामर बंधुता आमतौर पर पृथक्करण स्थिरांक (केडी) द्वारा व्यक्त की जाती है, जो एक भौतिक मात्रा है जिसका उपयोग एक प्रतिवर्ती प्रतिक्रिया में आणविक पृथक्करण की डिग्री को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। केडी मूल्य जितना छोटा होता है, उतना ही अधिक स्थिर परिसर होता है, यानी, बंधुता जितनी मजबूत होती है; इसके विपरीत, केडी मूल्य जितना बड़ा होता है, उतना ही अस्थिर परिसर और बंधुता कमजोर होती है। यह कदम एप्टामर के प्रदर्शन की पहचान करने, एप्टामर बंधुता परिपक्वता सुनिश्चित करने और व्यावहारिक अनुप्रयोगों में उच्च बंधुता और चयनात्मकता के साथ लक्ष्य अणु को बांधने की कुंजी है।

चित्र 1 एप्टामर एफिनिटी परिपक्वता की प्रक्रिया। संदर्भ स्रोत:किंगहॉर्न एबी, फ्रेजर एलए, 2017.

आत्मीयता सत्यापन के अलावा, एप्टामर के कार्य को सत्यापित करने की आवश्यकता है। इसमें एप्टामर की स्थिरता, विशिष्टता और किसी विशेष वातावरण में अन्य अणुओं के साथ अंतःक्रियाओं को सत्यापित करना शामिल है। कार्यात्मक सत्यापन के परिणाम वैज्ञानिक अनुसंधान और औद्योगिक अनुप्रयोगों में एप्टामर के मूल्य को सीधे प्रभावित करेंगे।

विशिष्ट सत्यापन

उपयुक्त विधि का चयन आमतौर पर न्यूक्लिक एसिड एप्टामर के विशिष्ट अनुप्रयोग लक्ष्य के अनुसार किया जाता है।

(1) आणविक स्तर परीक्षण: आणविक जीव विज्ञान तकनीकों का उपयोग करना, जैसे कि जेल वैद्युतकणसंचलन, वेस्टर्न ब्लॉट, आदि, एप्टामर के लक्ष्य अणु के साथ संयोजन के बाद बनने वाले परिसरों का पता लगाने के लिए, या एप्टामर के कारण लक्ष्य अणु के अभिव्यक्ति स्तर में परिवर्तन का पता लगाने के लिए।

(2) कोशिका स्तर परीक्षण: कोशिका संवर्धन प्रौद्योगिकी का उपयोग करके, एप्टामर्स को लक्ष्य कोशिकाओं के साथ संवर्धित किया जाता है ताकि कोशिका आकृति विज्ञान, प्रसार और अपोप्टोसिस जैसे जैविक परिवर्तनों का निरीक्षण किया जा सके और एप्टामर्स की जैविक गतिविधि का मूल्यांकन किया जा सके।

(3) पशु मॉडल परीक्षण: उपयुक्त पशु मॉडल में, न्यूक्लिक एसिड एप्टामर्स इंजेक्शन या दवा प्रशासन द्वारा दिए जाते हैं, और पशुओं के शारीरिक संकेतक और रोग संबंधी परिवर्तनों को देखा जाता है ताकि इन एप्टामर्स की जैविक गतिविधि और सुरक्षा का मूल्यांकन किया जा सके।