एप्टामर लक्षण विश्लेषण सेवा

एप्टामर बाइंडिंग एसे की प्रासंगिक तकनीकों द्वारा अनुकूलित एप्टामर एफिनिटी का सत्यापन किया गया। उदाहरणों में आइसोथर्मल टाइट्रेशन कैलोरीमेट्री (आईटीसी), फ्लो साइटोमेट्री (एफसीएम), सरफेस प्लाज्मा रेजोनेंस (एसपीआर), माइक्रोफ्लुइडिक्स आदि शामिल हैं। एप्टामर एफिनिटी को आमतौर पर वियोजन स्थिरांक (केडी) द्वारा व्यक्त किया जाता है, जो एक प्रतिवर्ती अभिक्रिया में आणविक वियोजन की मात्रा निर्धारित करने के लिए प्रयुक्त भौतिक मात्रा है। केडी का मान जितना कम होगा, कॉम्प्लेक्स उतना ही स्थिर होगा, अर्थात् एफिनिटी उतनी ही प्रबल होगी; इसके विपरीत, केडी का मान जितना अधिक होगा, कॉम्प्लेक्स उतना ही अस्थिर होगा और एफिनिटी उतनी ही दुर्बल होगी। यह चरण एप्टामर के प्रदर्शन की पहचान करने, एप्टामर एफिनिटी परिपक्वता सुनिश्चित करने और व्यावहारिक अनुप्रयोगों में उच्च एफिनिटी और चयनात्मकता के साथ लक्ष्य अणु से जुड़ने की क्षमता के लिए महत्वपूर्ण है।

चित्र 1. एप्टामर एफिनिटी मैचुरेशन की प्रक्रिया। संदर्भ स्रोत:किंगहॉर्न एबी, फ्रेजर एलए, 2017.

एफिनिटी सत्यापन के अलावा, एप्टामर के कार्य का सत्यापन भी आवश्यक है। इसमें किसी विशेष वातावरण में एप्टामर की स्थिरता, विशिष्टता और अन्य अणुओं के साथ उसकी अंतःक्रियाओं का सत्यापन शामिल है। कार्यात्मक सत्यापन के परिणाम वैज्ञानिक अनुसंधान और औद्योगिक अनुप्रयोगों में एप्टामर के महत्व को सीधे प्रभावित करेंगे।

विशिष्ट सत्यापन

उपयुक्त विधि का चयन आमतौर पर न्यूक्लिक एसिड एप्टामर के विशिष्ट अनुप्रयोग लक्ष्य के अनुसार किया जाता है।

(1) आणविक स्तर परीक्षण: जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस, वेस्टर्न ब्लॉट आदि जैसी आणविक जीव विज्ञान तकनीकों का उपयोग करके, एप्टामर के लक्ष्य अणु के साथ जुड़ने के बाद बनने वाले संकुलों का पता लगाना, या एप्टामर के कारण लक्ष्य अणु के अभिव्यक्ति स्तर में होने वाले परिवर्तनों का पता लगाना।

(2) कोशिका स्तर परीक्षण: कोशिका संवर्धन तकनीक का उपयोग करके, एप्टामर्स को लक्ष्य कोशिकाओं के साथ इनक्यूबेट किया जाता है ताकि कोशिका आकृति विज्ञान, प्रसार और एपोप्टोसिस जैसे जैविक परिवर्तनों का निरीक्षण किया जा सके और एप्टामर्स की जैविक गतिविधि का मूल्यांकन किया जा सके।

(3) पशु मॉडल परीक्षण: उपयुक्त पशु मॉडलों में, न्यूक्लिक एसिड एप्टामर्स को इंजेक्शन या दवा प्रशासन द्वारा दिया जाता है, और जानवरों के शारीरिक संकेतक और रोग संबंधी परिवर्तन का अवलोकन करके विवो में एप्टामर्स की जैविक गतिविधि और सुरक्षा का मूल्यांकन किया जाता है।