मोनोक्लोनल एंटीबॉडी विकास सेवा

अल्फा लाइफटेक इंक.यह एपिटोप भविष्यवाणी, पेप्टाइड संश्लेषण, प्रोटीन अभिव्यक्ति, पॉलीक्लोनल या मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पादन के साथ-साथ सेल कल्चर, एसाइटिस द्रव या संपूर्ण सीरम से एंटीबॉडी शुद्धिकरण प्रदान कर सकता है।

अल्फा लाइफटेक इंक.हम ग्राहकों को हाइब्रिडोमा सेल्स, जीनोम एडिटिंग सेल लाइन्स, नॉकडाउन सेल लाइन्स और ओवरएक्सप्रेशन सेल लाइन्स सहित विभिन्न प्रकार की स्थिर सेल लाइन सेवाएं प्रदान करने में अनुभवी हैं। हम प्रत्येक ग्राहक को उन्नत अनुकूलित सेल लाइन सेवाएं प्रदान करने का प्रयास करते हैं और हमारी सेवाएं प्रमाणित और विश्वसनीय हैं।

एंटीबॉडी विकास रणनीति

1. प्रतिजन का डिज़ाइन और तैयारी
ये प्रतिजन प्रोटीन, पेप्टाइड या अन्य अणु हो सकते हैं। प्रतिरक्षाजनकों को डिजाइन करने के लिए एक व्यापक दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है जो प्रतिजन संरचना, प्रतिरक्षा विज्ञान और वितरण प्रणालियों के ज्ञान को एकीकृत करता है। अल्फा लाइफटेक के पास प्रतिजन डिजाइन तकनीक है जो जरूरतमंद ग्राहकों के लिए प्रतिरक्षाजनकों को डिजाइन कर सकती है।
अल्फा लाइफटेक ग्राहकों को चुनने के लिए रिकॉम्बिनेंट प्रोटीन उत्पाद प्रदान करता है। हमारे पास विभिन्न प्रकार के प्रोटीन एक्सप्रेशन सिस्टम हैं, जैसे कि ई. कोलाई एक्सप्रेशन सिस्टम, यीस्ट एक्सप्रेशन सिस्टम, बैकुलोवायरस-कीट एक्सप्रेशन सिस्टम, स्तनधारी एक्सप्रेशन सिस्टम आदि, जो आपके अनुसंधान के लिए आवश्यक रिकॉम्बिनेंट प्रोटीन का उत्पादन करते हैं।

2. पशुओं का टीकाकरण
अल्फा लाइफटेक ग्राहकों को इम्युनोजेन उपलब्ध करा सकती है, और चूहे, खरगोश, भेड़, अल्पाका, गिनी पिग, हैम्स्टर आदि जैसे प्रतिरक्षित जानवर आपके चयन के लिए उपलब्ध हैं।

3. मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पादन विधियाँ

●हाइब्रिडोमा तकनीक द्वारा मैब्स का उत्पादन
हाइब्रिडोमा एक संकर कोशिका है जो दो प्रकार की कोशिकाओं, अर्थात् माउस मायलोमा सेल लाइन और प्लाज्मा कोशिकाओं (लिम्फोसाइट बी) के संलयन से उत्पन्न होती है। इसमें विषमयुग्मजी कोशिका इन विट्रो में लक्षित प्रतिजन के विरुद्ध निरंतर एंटीबॉडी का उत्पादन कर सकती है। हाइब्रिडोमा सेल लाइन के उत्पादन में तीन चरण होते हैं: प्रतिजन डिजाइन (हैप्टेन्स, छोटे अणु और पेप्टाइड्स), पशु प्रतिरक्षण, कोशिका संलयन और सकारात्मक क्लोन स्क्रीनिंग। विशिष्ट प्रतिरक्षण पद्धतियों का उपयोग करके, हम असाधारण रूप से उच्च कोशिका संलयन दक्षता (प्रति हजार बी कोशिकाओं पर 1-10 हाइब्रिडोमा) और उच्च एंटीबॉडी टाइटर्स प्राप्त करते हैं, जिससे जैव रासायनिक स्क्रीनिंग, इन विट्रो सेल-आधारित परीक्षण और पशु अध्ययन सहित बाद के विश्लेषणात्मक परीक्षणों में हमारी सफलता दर अधिकतम हो जाती है।

●फेज डिस्प्ले तकनीक द्वारा मैब्स का उत्पादन
फेज डिस्प्ले मोनोक्लोनल एंटीबॉडी उत्पन्न करने की एक अन्य विधि प्रदान करता है। पशु रक्त से बी-लिम्फोसाइट्स को अलग किया जाता है और उनका mRNA निकाला जाता है। पीसीआर के माध्यम से, इस mRNA को सीडीएनए में परिवर्तित किया जाता है, जो सभी VH और VL खंडों को प्रवर्धित करता है। इन खंडों को फिर एक वेक्टर में क्लोन किया जाता है, आमतौर पर एकल-श्रृंखला परिवर्तनीय खंड (scFv) के रूप में, एक बैक्टीरियोफेज के PIII प्रोटीन के साथ। इसके बाद, इस संरचना का उपयोग ई. कोलाई को संक्रमित करने के लिए किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक सहायक फेज के साथ टीकाकरण के माध्यम से लगभग 10^10 कोशिकाओं वाली एक लाइब्रेरी का निर्माण होता है। ई. कोलाई तब अपने आवरण के हिस्से के रूप में VH और VL खंडों वाले बैक्टीरियोफेज को स्रावित करने में सक्षम होता है। इसके बाद, रुचि के प्रतिजन को लक्षित करने वाले विशिष्ट VH और VL खंडों का चयन किया जा सकता है और बैक्टीरियोफेज के साथ ई. कोलाई को पुनः संक्रमित करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। प्लास्मिड युक्त कोशिकाओं को फिर अलग किया जाता है और उनका अनुक्रमण किया जाता है।

4. फ्यूजन स्क्रीनिंग

●कोशिका संलयन और चयन
एकत्रित की गई बी कोशिकाओं को मायलोमा कोशिकाओं के साथ संलयनित किया जाता है, जो कैंसरयुक्त कोशिकाएं होती हैं और संवर्धन में अनिश्चित काल तक बढ़ सकती हैं। यह संलयन आमतौर पर पॉलीइथिलीन ग्लाइकॉल (पीईजी) संलयन जैसी तकनीक का उपयोग करके किया जाता है।
संलयन के बाद, हाइब्रिडोमा कोशिकाओं को एक ऐसे चयनात्मक माध्यम में संवर्धित किया जाता है जो केवल हाइब्रिडोमा कोशिकाओं को ही जीवित रहने देता है। इस माध्यम में आमतौर पर एमिनोप्टेरिन होता है, जो असंलग्न मायलोमा कोशिकाओं के विकास को रोकता है।

●स्क्रीनिंग और क्लोंगिंग
परिणामी हाइब्रिडोमा कोशिकाओं की जांच लक्षित प्रतिजन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के उत्पादन के लिए की जाती है। यह आमतौर पर एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसोरबेंट परख (ELISA), वेस्टर्न ब्लॉट, इम्यूनोप्रेसिपिटेशन और फ्लो साइटोमेट्री जैसी तकनीकों का उपयोग करके किया जाता है।

एंटीबॉडी उत्पन्न करने वाली हाइब्रिडोमा कोशिकाओं की पहचान हो जाने के बाद, समान कोशिकाओं का समूह बनाने के लिए उनका क्लोनिंग किया जाता है। इससे यह सुनिश्चित होता है कि प्रत्येक हाइब्रिडोमा कोशिका द्वारा उत्पादित एंटीबॉडी एक समान हो।

5. एंटीबॉडी कार्यात्मक सत्यापन
अल्फा लाइफटेक एंटीबॉडी के कार्यात्मक सत्यापन की सुविधा प्रदान करता है, जैसे कि वेस्टर्न ब्लॉटिंग, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री, या कार्यात्मक परीक्षण, ताकि मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की विशेषताओं का पता लगाया जा सके और एंटीबॉडी की विशिष्टता, आत्मीयता और कार्यक्षमता की पुष्टि की जा सके।

6. एंटीबॉडी अनुकूलन
प्रोटीन ए या प्रोटीन जी एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी जैसी तकनीकों का उपयोग करके कल्चर सुपरनेटेंट से एंटीबॉडी का शुद्धिकरण किया जाता है, और अल्फा लाइफटेक एंटीबॉडी एफिनिटी को बेहतर बनाने के लिए एंटीबॉडी संशोधन विधियां भी प्रदान कर सकता है।

7. एंटीबॉडी उत्पादन
अल्फा लाइफटेक उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग अनुप्रयोगों और बड़े पैमाने पर उत्पादन के लिए संभावित एंटीबॉडी का मूल्यांकन कर सकती है।