फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी प्लेटफॉर्म
फ़ेज डिस्प्ले तकनीक पर आधारित, अल्फा लाइफटेक ग्राहकों को उच्च गुणवत्ता वाली फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण और स्क्रीनिंग सेवाएं प्रदान कर सकती है, जिसमें लीनियर 7 पेप्टाइड लाइब्रेरी, लीनियर 9 पेप्टाइड लाइब्रेरी, लीनियर 10 पेप्टाइड लाइब्रेरी, लीनियर 15 पेप्टाइड लाइब्रेरी, लीनियर 12 पेप्टाइड लाइब्रेरी, साइक्लिक 7 पेप्टाइड लाइब्रेरी और अन्य पेप्टाइड लाइब्रेरी शामिल हैं। लाइब्रेरी विविधता, सम्मिलन दर और सकारात्मक दर 90% से अधिक तक पहुंच सकती है, जिससे फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी के लिए विभिन्न ग्राहकों की अलग-अलग आवश्यकताओं को पूरा किया जा सके।
फ़ेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का उपयोग जैव चिकित्सा अनुसंधान और अनुप्रयोगों में व्यापक रूप से किया जाता है। उदाहरण के लिए, एंटीबॉडी इंजीनियरिंग और एंटीबॉडी विकास में, फ़ेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का उपयोग एंटीबॉडी वेरिएंट की स्क्रीनिंग और सुधार के लिए किया जा सकता है; ड्रग स्क्रीनिंग और ड्रग टारगेट डिस्कवरी में, फ़ेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का उपयोग ड्रग क्षमता वाले प्रोटीन या पेप्टाइड की खोज के लिए किया जा सकता है। वैक्सीन अनुसंधान में, फ़ेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का उपयोग वैक्सीन एंटीजन चयन और वैक्सीन विकास के लिए किया जा सकता है। इसके अतिरिक्त, फ़ेज डिस्प्ले लाइब्रेरी का उपयोग प्रोटीन इंटरेक्शन अनुसंधान, कैंसर निदान और उपचार जैसे कई क्षेत्रों में भी किया जा सकता है।
फेज डिस्प्ले प्रौद्योगिकी
फेज डिस्प्ले तकनीक एक ऐसी तकनीक है जो लक्ष्य प्रोटीन जीन को फेज सतह प्रोटीन जीन के साथ जोड़ती है, और जीन अभिव्यक्ति के माध्यम से लक्ष्य प्रोटीन को फेज सतह पर संलयन प्रोटीन के रूप में प्रदर्शित करती है। फेज सतह पर प्रदर्शित ये प्रोटीन सापेक्ष स्थानिक संरचना और जैविक गतिविधि को बनाए रख सकते हैं, और विशिष्ट एंटीबॉडी या अन्य अणुओं के साथ परस्पर क्रिया करके इनकी जांच, पहचान और निर्धारण किया जा सकता है। फेज डिस्प्ले तकनीक के प्रदर्शन में एंटीबॉडी, एंटीबॉडी खंड, पेप्टाइड खंड, सीडीएनए आदि शामिल हैं।
फेज डिस्प्ले तकनीक में मुख्य रूप से M13 फेज डिस्प्ले सिस्टम (जैसे PⅢ डिस्प्ले सिस्टम, PⅧ डिस्प्ले सिस्टम आदि), λ फेज डिस्प्ले सिस्टम, T4 फेज डिस्प्ले सिस्टम, T7 फेज डिस्प्ले सिस्टम आदि शामिल हैं। इनमें से प्रत्येक सिस्टम की अपनी विशेषताएं हैं और ये विभिन्न अनुसंधान आवश्यकताओं के लिए उपयुक्त हैं। M13 फेज, अपने लाइसोजेनिक गुणों के कारण, मेजबान कोशिका को संक्रमित करने के बाद उसे नष्ट नहीं करता है, जिससे यह मेजबान कोशिका के भीतर लगातार प्रतिकृति बना सकता है और विदेशी अंशों को व्यक्त कर सकता है, जो दीर्घकालिक स्क्रीनिंग और स्थिर अभिव्यक्ति के लिए उपयुक्त है। T7 फेज अपने छोटे जीवन चक्र और उच्च प्रतिकृति दक्षता के कारण, बड़ी संख्या में संतति फेजों का तेजी से उत्पादन कर सकता है, जो उच्च-थ्रूपुट स्क्रीनिंग और तीव्र अभिव्यक्ति के लिए उपयुक्त है।
| एम13 फेज | टी7 फेज | |
|---|---|---|
| 1. आकारिकीय संरचना | तंतुमय फ़ेज | बहुफलकीय फ़ेज |
| 2. आनुवंशिक सामग्री | वृत्ताकार एकल-सूत्रीय डीएनए अणु | रेखीय, दोहरे-अखंडित, अंत में अतिरिक्त डीएनए |
| 3. प्रतिकृति और संक्रमण | पेरिप्लाज्म में एकत्रित होने वाले लाइसोजेनिक फेज, मेजबान कोशिकाओं को नष्ट किए बिना जीवाणु झिल्लियों से स्रावित हो सकते हैं। | जीवाणु के साइटोप्लाज्म में एकत्रित हुए फेजों की संतान, विषाणुजनक फेज, कोशिका झिल्ली के टूटने से मुक्त हो जाते हैं। |
| 4. डिस्प्ले सिस्टम | pIII और PVIII कैप्सिड प्रोटीन का उपयोग करके एक डिस्प्ले सिस्टम का निर्माण किया गया, जो विभिन्न आकारों के विदेशी पेप्टाइड/प्रोटीन को प्रदर्शित करने के लिए उपयुक्त है। | यह डिस्प्ले सिस्टम 10B कैप्सिड प्रोटीन से बना है, जिसे स्राव प्रक्रिया की आवश्यकता नहीं होती है और यह उन पेप्टाइड्स/प्रोटीन को प्रदर्शित करने के लिए उपयुक्त है जिनका स्राव प्रक्रिया पर निरोधात्मक प्रभाव होता है। |
| 5. अनुप्रयोग लाभ | यह छोटे अणु वाले पेप्टाइडों के प्रदर्शन और दीर्घकालिक स्क्रीनिंग के लिए उपयुक्त है। | इसमें वृहद आणविक प्रोटीनों की तीव्र अभिव्यक्ति और उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग में लाभ हैं। |
फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी प्रकार
अल्फा लाइफटेक को फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी के निर्माण और स्क्रीनिंग का अनुभव है और इसके पास चुनने के लिए विभिन्न प्रकार की पेप्टाइड लाइब्रेरी उपलब्ध हैं। पेप्टाइड की लंबाई के आधार पर, इन्हें 7 पेप्टाइड लाइब्रेरी, 9 पेप्टाइड लाइब्रेरी, 10 पेप्टाइड लाइब्रेरी, 12 पेप्टाइड लाइब्रेरी और 15 पेप्टाइड लाइब्रेरी में विभाजित किया जा सकता है। पॉलीपेप्टाइड के स्थानिक विन्यास के आधार पर, इन्हें रैखिक फेज पेप्टाइड लाइब्रेरी और चक्रीय फेज पेप्टाइड लाइब्रेरी में विभाजित किया जा सकता है।
रेखीय फ़ेज पेप्टाइड लाइब्रेरी
पेप्टाइड जीन को फ़ेज जीनोम के कोट प्रोटीन कोडिंग क्षेत्र में डाला जाता है, आमतौर पर pIII या PVIII में, और यह एक सीधी रैखिक श्रृंखला के रूप में दिखाई देता है। रैखिक श्रृंखला वाले पेप्टाइड शरीर के अंदर आसानी से विघटित हो सकते हैं, और उनकी बंधन क्षमता और स्थिरता प्रभावित हो सकती है।
चक्रीय फ़ेज पेप्टाइड लाइब्रेरी
संशोधित रिंग पेप्टाइड, डाइसल्फाइड बॉन्ड या अन्य बंधन बॉन्ड की क्रिया के तहत एक निश्चित संरचना बनाएगा, जो न केवल चयापचय स्थिरता और जैव उपलब्धता में काफी सुधार करेगा, बल्कि रिसेप्टर-लिगैंड (एंटीबॉडी-एंटीजन) संरचना की बंधन आवश्यकताओं को भी बेहतर ढंग से पूरा करेगा।
फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी प्रक्रिया
फ़ेजों का चयन
एम13 प्रकार के फेज या टी7 प्रकार के फेज को आमतौर पर वाहक के रूप में चुना जाता है।
फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण
एक ऐसा फ़ेज वेक्टर तैयार करें जो किसी विदेशी प्रोटीन या पॉलीपेप्टाइड कोडिंग अनुक्रम को धारण करने में सक्षम हो, जिसमें आमतौर पर एक प्रमोटर, चयनात्मक मार्कर और उपयुक्त नियामक तत्व शामिल होते हैं। किसी विदेशी प्रोटीन या पेप्टाइड के कोडिंग अनुक्रम को फ़ेज वाहक में सम्मिलित करना, आमतौर पर प्रतिबंध एंजाइम काटने और जोड़ने की विधियों द्वारा किया जाता है। निर्मित फ़ेज वेक्टर को मेजबान कोशिका में रूपांतरित किया जाता है, जिससे फ़ेज कोशिका के भीतर विदेशी प्रोटीन या पेप्टाइड की प्रतिकृति और अभिव्यक्ति कर पाता है। कई अलग-अलग विदेशी प्रोटीन या पेप्टाइड युक्त फ़ेज लाइब्रेरी व्यापक रूपांतरण और प्रवर्धन के माध्यम से तैयार की जाती हैं।
फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी स्क्रीनिंग
ठोस-चरण वाहक पर लक्ष्य अणुओं (जैसे प्रोटीन, रिसेप्टर या एंटीबॉडी) को स्थिर करें। निर्मित फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी को स्थिर लक्ष्य के साथ इनक्यूबेट करें ताकि फ़ेज पर मौजूद पेप्टाइड लक्ष्य अणु से बंध सकें। इस प्रक्रिया के दौरान, लक्ष्य से बंधित बैक्टीरियोफ़ेज को रखते हुए, अबंधित बैक्टीरियोफ़ेज को धोने से हटा दिया जाता है, और उच्च आत्मीयता वाले बंधित बैक्टीरियोफ़ेज को अलग कर लिया जाता है। प्राप्त बैक्टीरियोफ़ेज को एस्चेरिचिया कोलाई को संक्रमित करके प्रवर्धित किया जाता है और फिर स्क्रीनिंग के अगले चरण के लिए भेजा जाता है। उच्च बंधन क्षमता वाले पेप्टाइड प्राप्त करने के लिए आमतौर पर स्क्रीनिंग के 3-5 चरण लगते हैं।
पेप्टाइड डिजाइन और संश्लेषण
स्क्रीनिंग स्थलों के आधार पर पेप्टाइड का संश्लेषण करें।

चित्र 1. फ़ेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी का निर्माण और स्क्रीनिंग प्रक्रिया

फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण प्लेटफ़ॉर्म
अल्फा लाइफटेक के पास कई पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण प्रौद्योगिकियां हैं। हम मुख्य रूप से फ़ेज प्रकारों के अनुसार T7 पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण सेवा और M13 पेप्टाइड लाइब्रेरी निर्माण सेवा प्रदान करते हैं।
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फेज डिस्प्ले पेप्टाइड लाइब्रेरी स्क्रीनिंग प्लेटफॉर्म
अल्फा लाइफटेक के पास पेप्टाइड फाज लाइब्रेरी स्क्रीनिंग का व्यापक अनुभव है, जो छोटे अणु वाली दवाओं की खोज, नैदानिक निदान, रोग उपचार और जैविक अनुसंधान के लिए मजबूत तकनीकी सहायता प्रदान करता है।
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2018-07-16 

