scFv एंटीबॉडी खोज सेवा
अल्फा लाइफटेक इंक.हम वैश्विक वैज्ञानिकों की विविध आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए व्यापक scFv लाइब्रेरी निर्माण सेवाएं प्रदान करने में गर्व महसूस करते हैं। हमारा उद्देश्य विभिन्न ग्राहकों की मांगों को समझना और उन्हें पूरा करना तथा अनुसंधान कार्य में आने वाली किसी भी समस्या में सहायता करना है।
scFv - सिंगल चेन वेरिएबल फ्रैगमेंट एंटीबॉडी क्या है?
एकल-श्रृंखला एंटीबॉडी में एक लचीले पेप्टाइड लिंकर द्वारा जुड़े एंटीबॉडी वेरिएबल लाइट (VL) और हेवी (VH) खंड होते हैं, जिन्हें फ़ेज की सतह पर आसानी से कार्यात्मक रूप में व्यक्त किया जा सकता है और इसलिए इसे आमतौर पर एकल-श्रृंखला वेरिएबल खंड (scFv) के रूप में जाना जाता है। scFv खंड इम्यूनोग्लोबुलिन अणु की सबसे छोटी इकाई है (नैनोबॉडी को छोड़कर) जो एंटीजन-बंधन गतिविधियों में कार्य करती है और प्रोटीन इंजीनियरिंग की मदद से scFv (एकल-श्रृंखला वेरिएबल खंड) के गुणों में सुधार करती है, जैसे कि आत्मीयता में वृद्धि और विशिष्टता में परिवर्तन। अल्फा लाइफटेक इंक. में, scFv एंटीबॉडी मुख्य रूप से हाइब्रिडोमा, प्रतिरक्षित चूहों की प्लीहा कोशिकाओं और मनुष्यों के बी लिम्फोसाइट्स से निर्मित की गई हैं। हाइब्रिडोमा, प्लीहा, लिम्फ कोशिकाओं और अस्थि मज्जा कोशिकाओं से पहले कुल RNA या mRNA को अलग किया जाता है, फिर एंटीबॉडी जीन प्रवर्धन (PCR) के लिए टेम्पलेट के रूप में कार्य करने के लिए इसे cDNA में रिवर्स ट्रांसक्राइब किया जाता है।

scFv एंटीबॉडी विकास-फेज डिस्प्ले प्रौद्योगिकी
किसी लाइब्रेरी की विविधता स्वतंत्र क्लोनों की संख्या से निर्धारित होती है। एक बड़ी scFv एंटीबॉडी लाइब्रेरी बनाने के लिए, हमारे वैज्ञानिक लाइब्रेरी निर्माण के लिए अपनी मालिकाना दो-चरणीय रणनीति का उपयोग करेंगे। वर्णित प्रक्रिया के पहले चरण में, VH, Vκ, और Vλ डोमेन को एन्कोड करने वाले PCR उत्पादों से प्राथमिक रिपर्टोयर्स तैयार किए जाते हैं, जिससे विशिष्ट मध्यम आकार की लाइब्रेरी (1 - 100 मिलियन क्लोन) प्राप्त होती हैं। दूसरे चरण में, प्राथमिक रिपर्टोयर्स से शुद्ध किए गए प्लास्मिड DNA के पाचन द्वारा VH (या VL) खंडों को अलग किया जाता है और VL (या VH) रिपर्टोयर्स वाले एक्सेप्टर फेजमिड वेक्टर में क्लोन किया जाता है। यह नवाचार लाइब्रेरी के आकार को नाटकीय रूप से बढ़ाता है (1010-1012क्लोन)।
scFv एंटीबॉडी की बड़े पैमाने पर और उच्च थ्रूपुट स्क्रीनिंग
scFv के बड़े पैमाने पर निर्माण के लिए, यह स्पष्ट है कि अभिव्यक्ति होस्ट का चुनाव प्रक्रिया डिजाइन, आगे की प्रसंस्करण रणनीतियों और प्रक्रिया लागत पर महत्वपूर्ण प्रभाव डालेगा। विनिर्माण मार्ग का चुनाव पोस्ट-ट्रांसलेशनल मॉडिफिकेशन की प्रासंगिकता और नैदानिक विकास और अर्थशास्त्र की समयसीमा पर निर्भर करेगा, जो अनिवार्य रूप से 'होस्ट सिस्टम' पर भी निर्भर हैं। कोई भी सार्वभौमिक अभिव्यक्ति प्रणाली नहीं है जो विभिन्न प्रकार के एंटीबॉडी या यहां तक कि प्रोटीन के लिए उच्च उत्पाद अभिव्यक्ति स्तर सुनिश्चित कर सके।

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