स्थिर सेल लाइन निर्माण सेवा
अल्फा लाइफटेक कई वर्षों से स्थिर सेल लाइन निर्माण प्रक्रिया विकास के क्षेत्र में गहनता से कार्यरत है। इसने 300 से अधिक प्रकार की ट्यूमर कोशिकाओं और प्राथमिक कोशिकाओं के साथ एक परिपूर्ण स्थिर सेल लाइन निर्माण प्रक्रिया प्लेटफॉर्म विकसित किया है, जो वैज्ञानिक अनुसंधान या परियोजना अनुसंधान के लिए समय बचाते हुए स्थिर सेल लाइन प्रदान कर सकता है और बाद के उत्पादन को सुगम बना सकता है। अल्फा लाइफटेक ग्राहकों को स्ट्रेन प्रक्रिया विकास, स्ट्रेन स्क्रीनिंग, स्ट्रेन निर्माण, रिकॉम्बिनेंट प्रोटीन और एंटीबॉडी उत्पादन जैसी सेवाएं भी प्रदान कर सकता है, जिससे नई दवाओं के लिए अनुसंधान का आधार तैयार होता है।
अल्फा लाइफटेक के पास लेंटिवाइरस-संक्रमित कोशिका प्लेटफॉर्म है, जो विभिन्न प्रकार के स्थिर कोशिका रूपांतरण उपभेदों के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रिया को अनुकूलित कर सकता है। हमने CRISPR/Cas9 नॉकआउट कोशिका लाइनों के निर्माण के लिए जीन नॉकआउट तकनीक का उपयोग किया। रूपांतरण उपभेदों को स्थिर करने के लिए जीन ओवरएक्सप्रेशन और जीन साइलेंसिंग तकनीकों का उपयोग किया गया। जीन साइट-विशिष्ट एकीकरण, वर्टेक्स एकीकरण कोशिका लाइन निर्माण सेवाओं को पूरा करता है।
स्थिर कोशिका रेखा निर्माण का परिचय
स्थिर कोशिका रेखा से तात्पर्य ऐसी कोशिका रेखा से है जो मेजबान कोशिका के जीनोम में बाहरी जीनों को एकीकृत करती है, जिससे ये बाहरी जीन मेजबान कोशिका में लंबे समय तक स्थिर रूप से अभिव्यक्त हो सकें। इसका सिद्धांत यह है कि बाहरी जीन को एक निश्चित प्रतिरोध क्षमता वाले वेक्टर में परिवर्तित किया जाता है, मेजबान कोशिकाओं को ट्रांसफेक्ट किया जाता है, बाहरी जीन को मेजबान गुणसूत्र में एकीकृत किया जाता है, और वेक्टर में मौजूद प्रतिरोध जीनों की स्क्रीनिंग की जाती है ताकि लक्ष्य प्रोटीन की उच्च अभिव्यक्ति या लक्ष्य जीन के स्थिर साइलेंसिंग वाली स्थिर कोशिका रेखाएं प्राप्त की जा सकें जो प्रयोग की आवश्यकताओं को पूरा करती हों।
अल्फा लाइफटेक के पास एक स्वतंत्र भंडारण कार्यशाला, उत्तम कोशिका फ्रीजिंग और भंडारण प्रबंधन प्रणाली है, और आपके वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए समर्पित 300 से अधिक प्रकार की ट्यूमर कोशिकाएं और प्राथमिक कोशिकाएं उपलब्ध हैं, जिनमें से आप अपनी पसंद की कोशिकाएं चुन सकते हैं।
स्थिर सेल लाइन निर्माण प्रक्रिया

स्थिर कोशिका रेखा निर्माण की विधि
स्थिर कोशिका रेखा निर्माण विधियों में लेंटिवाइरस-मध्यस्थ, ट्रांसपोज़ोन-मध्यस्थ, CRISPR/Cas9-मध्यस्थ और प्लास्मिड स्क्रीनिंग शामिल हैं।
लेंटिवाइरस-मध्यस्थता स्थिर कोशिका रेखाओं के निर्माण के लिए सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली विधियों में से एक है। इस विधि का लाभ यह है कि यह लगभग सभी प्रकार की कोशिकाओं को संक्रमित कर सकती है और लंबे समय तक स्थिर अभिव्यक्ति के लिए मेजबान कोशिका जीनोम में आनुवंशिक सामग्री को एकीकृत कर सकती है। हालांकि, इस प्रणाली की कुछ सीमाएँ हैं, और लेंटिवाइरस की पैकेजिंग क्षमता सीमित होती है, इसलिए यह लंबे प्रतिलेखन क्षेत्रों वाले जीनों के प्रतिलेखन के लिए उपयुक्त नहीं है।
लेंटिवाइरस-मध्यस्थता की तुलना में, ट्रांसपोज़ोन-मध्यस्थता में जीन के आकार पर कोई प्रतिबंध नहीं है, और प्रौद्योगिकी के निरंतर अनुकूलन के साथ, ट्रांसपोज़ोन सम्मिलन की दक्षता में कई गुना सुधार हुआ है। इसका नुकसान यह है कि प्राथमिक कोशिकाओं पर कुछ प्रतिबंध हैं और कुछ कोशिकाओं को ट्रांसफेक्ट करना मुश्किल है।
CRISPR/Cas9-मध्यस्थता वाली प्रक्रियाओं में CRISPR जीन नॉकआउट और CRISPR जीन नॉकइन शामिल हैं। CRISPR जीन नॉकआउट का अर्थ है डीएनए के दोहरे स्ट्रैंड को तोड़ना, जिसके परिणामस्वरूप लक्षित जीन का कार्य समाप्त हो जाता है। CRISPR जीन नॉकइन का अर्थ है विशिष्ट जीनों में बाहरी डीएनए खंडों को डालना, जिनका उपयोग दोषपूर्ण जीनों की मरम्मत करने या नए कार्यात्मक जीनों को स्थापित करने के लिए किया जा सकता है।
प्लास्मिड स्क्रीनिंग सबसे सरल सेल लाइन निर्माण योजना है, जिसमें केवल लक्षित प्लास्मिड को कोशिका में सफलतापूर्वक स्थानांतरित करना और दीर्घकालिक स्क्रीनिंग में संबंधित प्रतिरोध का उपयोग करना आवश्यक होता है। इसके बाद स्थिर सेल लाइन प्राप्त करने की एक निश्चित संभावना होती है।
विभिन्न स्थिर कोशिका लाइनों के निर्माण की विधियाँ
| मध्यस्थता विधि | लेंटिवाइरस प्रणाली | ट्रांसपोज़ोन प्रणाली | CRISP/Cas9-मध्यस्थता | प्लास्मिड स्क्रीनिंग |
|---|---|---|---|---|
| वाहक क्षमता | 5 केबी | 10 केबी | 5 केबी | 10 केबी |
| मध्यस्थ दक्षता | उच्च | सामान्य | सामान्य | कम |
| समय | 1-2 सप्ताह | 3-4 सप्ताह | 3-4 सप्ताह | 4-6 सप्ताह |
| फ़ायदा | तेज़ और कुशल | सुरक्षा और स्थिरता | स्थिर बिंदु एकीकरण | कम लागत |
| कमी | जैवसुरक्षा जोखिम | अभिव्यक्ति की प्रचुरता सामान्य | CAS9 का ट्रांसडक्शन कठिन और महंगा है। | कम दक्षता और अस्थिरता |
स्थिर कोशिका लाइनों के निर्माण में तकनीकी कठिनाइयाँ
प्रक्रिया को बड़े पैमाने पर करने से पहले, गैस, कल्चर फ्लूइड सिस्टम, कोशिकाओं पर लागू न्यूनतम हाइड्रोडायनामिक तनाव आदि जैसे मापदंडों को निर्धारित करने के लिए एक छोटे बायोरेक्टर का उपयोग किया जाता है, ताकि क्रॉस-स्केल कल्चर सुनिश्चित किया जा सके। हालांकि, भले ही संबंधित प्रक्रिया मापदंड निर्धारित कर लिए गए हों, उत्पादक के बड़े बायोरेक्टरों का वातावरण असमान होगा, और इसमें विफलता की संभावना अधिक होती है। अल्फा लाइफटेक को प्रक्रिया स्केल-अप कल्चर में कई वर्षों का अनुभव है, जो त्रुटियों को काफी हद तक कम कर सकता है, जोखिमों को घटा सकता है और सफलता दर में काफी सुधार कर सकता है। साथ ही, अल्फा लाइफटेक उपयोग किए जाने वाले कच्चे माल और मीडिया बैचों की स्थिरता सुनिश्चित करता है, जिससे सेल कल्चर प्रक्रिया स्केल-अप की विफलता दर कम हो जाती है।
अल्फा लाइफटेक के पास उत्पादन के दौरान सेल लाइनों की स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए एक व्यापक स्थिर सेल लाइन प्रक्रिया विकास मंच है। हम आपकी आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए अनुकूलित सेवाएं भी प्रदान कर सकते हैं।
स्टेबल सेल लाइन्स निर्माण सेवा सामग्री
| सामग्री | समय |
| ग्राहक द्वारा प्रदान की गई HEK293 सेल लाइन का कल्चर किया गया। | 3-5 महीने |
| sgRNA-Cas9 प्लास्मिड का निर्माण (स्क्रीनिंग जीन G418 के साथ)। | |
| sgRNA-Cas9 और रिपेयर डीएनए टेम्पलेट को एक साथ HEK293 सेल लाइन में स्थानांतरित किया गया। | |
| मोनोक्लोनल सेल लाइन स्क्रीनिंग (जीएफपी जीन) सकारात्मक क्लोन की नकल करना)। | |
| डिलीवरी: वेक्टर, जीएफपी जीन नॉक-इन स्ट्रेन, सीक्वेंसिंग परिणाम, सभी कच्चा डेटा, लैब रिपोर्ट |

कोशिकाओं का पता लगाया जा सकता है
ये सेल एटीसीसी जैसे पेशेवर संगठनों से खरीदे जाते हैं और आपकी पंजीकरण आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए प्रमाण प्रदान कर सकते हैं।

उत्पादन लाभ
अल्फा लाइफटेक के पास विविध विकास आवश्यकताओं को पूरा करने का कई वर्षों का अनुभव है; हमारे पास विभिन्न प्रकार की कोशिकाएं, एक स्वतंत्र भंडारण कार्यशाला, उत्तम कोशिका फ्रीजिंग और एक भंडारण प्रबंधन प्रणाली है।

परियोजना गुणवत्ता नियंत्रण
प्रत्येक परियोजना सख्त गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं से गुजरती है ताकि ग्राहकों को उच्च मानकों को पूरा करने वाली सेल लाइनें प्रदान की जा सकें।

तकनीकी लाभ
व्यापक सेलुलर अनुभव वाले इंजीनियरों के अलावा, हमारे पास रिएक्टर की स्थितियों को बेहतर बनाने और प्रक्रिया मापदंडों को संशोधित करने के लिए उन्नत प्रौद्योगिकी विकासवादी एल्गोरिदम हैं।
यदि आपके कोई प्रश्न हों, तो कृपया किसी भी समय हमसे संपर्क करने में संकोच न करें।
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2018-07-16 

