स्थिर सेल लाइन निर्माण सेवा
अल्फा लाइफटेक कई वर्षों से स्थिर सेल लाइन निर्माण प्रक्रिया विकास के क्षेत्र में गहराई से जुड़ा हुआ है। इसने 300 से अधिक प्रकार की ट्यूमर कोशिकाओं और प्राथमिक कोशिकाओं के साथ एक आदर्श स्थिर सेल लाइन निर्माण प्रक्रिया प्लेटफ़ॉर्म बनाया है, जो वैज्ञानिक अनुसंधान या परियोजना अनुसंधान के लिए समय बचाते हुए स्थिर सेल लाइनें प्रदान कर सकता है और बाद के उत्पादन को सुविधाजनक बना सकता है। अल्फा लाइफटेक ग्राहकों को स्ट्रेन प्रक्रिया विकास, स्ट्रेन स्क्रीनिंग, स्ट्रेन निर्माण, पुनः संयोजक प्रोटीन और एंटीबॉडी उत्पादन जैसी सेवाएं भी प्रदान कर सकता है, जो नई दवाओं के लिए एक शोध आधार प्रदान करता है।
अल्फा लाइफटेक के पास एक लेंटिवायरस-संक्रमित सेल प्लेटफ़ॉर्म है, जो विभिन्न प्रकार के सेल स्थिर ट्रांसम्यूटेशन स्ट्रेन के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रिया को अनुकूलित कर सकता है। हमने CRISPR/Cas9 नॉकआउट सेल लाइनों के निर्माण के लिए जीन नॉकआउट तकनीक का उपयोग किया। ट्रांसम्यूटेशन स्ट्रेन को स्थिर करने के लिए जीन ओवरएक्सप्रेशन और जीन साइलेंसिंग तकनीकों का उपयोग किया गया। जीन साइट-विशिष्ट एकीकरण वर्टेक्स इंटीग्रेशन सेल लाइन निर्माण सेवाओं को पूरा करता है।
स्थिर सेल लाइन निर्माण का परिचय
स्थिर कोशिका रेखा से तात्पर्य उस कोशिका रेखा से है जो विदेशी जीन को मेज़बान कोशिका जीनोम में एकीकृत करती है ताकि विदेशी जीन को मेज़बान कोशिका में लंबे समय तक स्थिर रूप से व्यक्त किया जा सके। सिद्धांत यह है कि विदेशी जीन को एक निश्चित प्रतिरोध वाले वेक्टर में कम किया जाए, मेज़बान कोशिकाओं को संक्रमित किया जाए, विदेशी जीन को मेज़बान गुणसूत्र में एकीकृत किया जाए, और वेक्टर में निहित प्रतिरोध जीन को स्क्रीन किया जाए ताकि लक्ष्य प्रोटीन की उच्च अभिव्यक्ति या लक्ष्य जीन की स्थिर साइलेंसिंग के साथ स्थिर कोशिका रेखाएँ प्राप्त की जा सकें जो प्रयोग की आवश्यकताओं को पूरा करती हैं।
अल्फा लाइफटेक के पास एक स्वतंत्र भंडारण कार्यशाला, उत्तम कोशिका फ्रीज़िंग और भंडारण प्रबंधन प्रणाली, तथा आपके वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए समर्पित 300 से अधिक प्रकार की ट्यूमर कोशिकाएं और प्राथमिक कोशिकाएं हैं, जिनमें से आप चुन सकते हैं।
स्थिर कोशिका रेखा निर्माण प्रक्रिया

स्थिर कोशिका रेखा निर्माण की विधि
स्थिर कोशिका रेखा निर्माण विधियों में लेंटिवायरस-मध्यस्थता, ट्रांसपोसोन-मध्यस्थता, CRISPR/Cas9-मध्यस्थता, और प्लास्मिड स्क्रीनिंग शामिल हैं।
लेंटिवायरस-मध्यस्थता स्थिर कोशिका रेखाएँ बनाने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली विधियों में से एक है। इस दृष्टिकोण का लाभ यह है कि यह लगभग सभी प्रकार की कोशिकाओं को संक्रमित कर सकता है और आनुवंशिक सामग्री को लंबे समय तक स्थिर अभिव्यक्ति के लिए मेजबान कोशिका जीनोम में एकीकृत कर सकता है। हालाँकि, इस प्रणाली की कुछ सीमाएँ हैं, और लेंटिवायरस की पैकेजिंग क्षमता सीमित है, इसलिए यह लंबे प्रतिलेखन क्षेत्रों वाले जीन के प्रतिलेखन के लिए उपयुक्त नहीं है
लेन्टिवायरस-मध्यस्थता की तुलना में, ट्रांसपोसोन-मध्यस्थता में जीन आकार पर कोई प्रतिबंध नहीं है, और प्रौद्योगिकी के निरंतर अनुकूलन के साथ, ट्रांसपोसोन सम्मिलन की दक्षता में कई बार सुधार हुआ है। नुकसान यह है कि प्राथमिक कोशिकाओं पर कुछ प्रतिबंध हैं और कोशिकाओं को संक्रमित करना मुश्किल है।
CRISPR/Cas9-मध्यस्थता में क्रिस्पर जीन नॉकआउट और क्रिस्पर जीन नॉकिन शामिल हैं। क्रिस्पर जीन नॉकआउट का मतलब है डीएनए डबल-स्ट्रैंड सेवरिंग शुरू करना, जिसके परिणामस्वरूप लक्ष्य जीन के कार्य में कमी आती है। क्रिस्पर जीन नॉकिन का मतलब है विदेशी डीएनए टुकड़ों को विशिष्ट जीन में डालना, जिसका उपयोग दोषपूर्ण जीन की मरम्मत या नए कार्यात्मक जीन को पेश करने के लिए किया जा सकता है।
प्लास्मिड स्क्रीनिंग सबसे आदिम सेल लाइन निर्माण योजना है, जिसमें केवल लक्ष्य प्लास्मिड को सेल में सफलतापूर्वक स्थानांतरित करने और दीर्घकालिक स्क्रीनिंग में इसी प्रतिरोध का उपयोग करने की आवश्यकता होती है। फिर स्थिर सेल लाइन प्राप्त करने की एक निश्चित संभावना है।
विभिन्न स्थिर कोशिका रेखाओं के निर्माण की विधियाँ
मध्यस्थता विधि | लेन्टिवायरस सिस्टम | ट्रांसपोसोन प्रणाली | CRISP/Cas9-मध्यस्थता | प्लास्मिड स्क्रीनिंग |
---|---|---|---|---|
वाहक क्षमता | 5 केबी | 10 केबी | 5 केबी | 10 केबी |
मध्यस्थता दक्षता | उच्च | सामान्य | सामान्य | कम |
समय | 1-2 सप्ताह | 3-4 सप्ताह | 3-4 सप्ताह | 4-6 सप्ताह |
फ़ायदा | तेज़ और कुशल | सुरक्षा और स्थिरता | निश्चित बिंदु एकीकरण | कम लागत |
कमी | जैव सुरक्षा जोखिम | अभिव्यक्ति बहुतायत सामान्य | CAS9 का संचरण कठिन और महंगा है | कम दक्षता और अस्थिरता |
स्थिर कोशिका रेखाओं के निर्माण में तकनीकी कठिनाइयाँ
प्रक्रिया को बढ़ाने से पहले, गैस, कल्चर द्रव प्रणाली, कोशिकाओं पर लागू न्यूनतम हाइड्रोडायनामिक तनाव आदि जैसे मापदंडों को निर्धारित करने के लिए एक छोटे बायोरिएक्टर का उपयोग किया जाता है, ताकि क्रॉस-स्केल कल्चर सुनिश्चित किया जा सके। हालाँकि, भले ही संबंधित प्रक्रिया मापदंडों को निर्धारित किया गया हो, उत्पादक में बड़े बायोरिएक्टर का वातावरण असमान होगा, और यह विफल होना आसान है। अल्फा लाइफटेक के पास प्रक्रिया स्केल-अप संस्कृति में कई वर्षों का अनुभव है, जो कुछ हद तक गलतियों से बच सकता है, जोखिमों को कम कर सकता है, और सफलता दर में काफी सुधार कर सकता है। साथ ही, अल्फा लाइफटेक उपयोग किए जाने वाले कच्चे माल और मीडिया बैचों की स्थिरता सुनिश्चित करता है, जिससे सेल कल्चर प्रक्रिया स्केल-अप की विफलता दर कम हो जाती है।
अल्फा लाइफटेक के पास उत्पादन के दौरान सेल लाइनों की स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए एक व्यापक स्थिर सेल लाइन प्रक्रिया विकास मंच है। हम आपकी ज़रूरतों को पूरा करने के लिए आपको अनुकूलित सेवाएँ भी प्रदान कर सकते हैं।
स्थिर सेल लाइन निर्माण सेवा सामग्री
सामग्री | समय |
ग्राहक द्वारा प्रदान की गई HEK293 सेल लाइन का संवर्धन। | 3-5 महीने |
एसजीआरएनए-कैस9 प्लाज्मिड का निर्माण (स्क्रीनिंग जीन जी418 के साथ)। | |
एसजीआरएनए-कैस9 और मरम्मत डीएनए टेम्पलेट को HEK293 सेल लाइन में स्थानांतरित किया गया। | |
मोनोक्लोनल सेल लाइन स्क्रीनिंग (जीएफपी जीन नॉकिन पॉजिटिव क्लोन)। | |
वितरण: वेक्टर, जीएफपी जीन नॉक-इन स्ट्रेन, अनुक्रमण परिणाम, सभी कच्चे डेटा, प्रयोगशाला रिपोर्ट |

कोशिकाओं का पता लगाया जा सकता है
ये कोशिकाएं ATCC जैसे व्यावसायिक संगठनों से खरीदी जाती हैं और आपकी पंजीकरण आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए प्रमाण प्रदान कर सकती हैं।

उत्पादन लाभ
अल्फा लाइफटेक के पास विविध विकास आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए कई वर्षों का अनुभव है; हमारे पास विभिन्न प्रकार की कोशिकाएं, एक स्वतंत्र भंडारण कार्यशाला, उत्तम सेल फ्रीजिंग और एक भंडारण प्रबंधन प्रणाली है।

परियोजना गुणवत्ता नियंत्रण
प्रत्येक परियोजना सख्त गुणवत्ता नियंत्रण प्रक्रियाओं से गुजरती है ताकि ग्राहकों को उच्च मानकों को पूरा करने वाली सेल लाइनों की डिलीवरी सुनिश्चित की जा सके।

तकनीकी लाभ
व्यापक सेलुलर अनुभव वाले इंजीनियरों के अलावा, हमारे पास रिएक्टर की स्थिति में सुधार लाने और प्रक्रिया मापदंडों को संशोधित करने के लिए उन्नत प्रौद्योगिकी विकासवादी एल्गोरिदम भी हैं।
यदि आपके कोई प्रश्न हों तो कृपया किसी भी समय हमसे संपर्क करें।
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