Platforma za razvoj antitijela za prikaz faga

Alpha Lifetech, sa svojim opsežnim projektnim iskustvom u otkrivanju antitijela, može pružiti prilagođene usluge monoklonskih i poliklonalnih antitijela za više vrsta, kao i izgradnju biblioteke antitijela i usluge pregleda. Alpha Lifetech može kupcima pružiti proizvode s antitijelima i rekombinantnim antitijelima s osiguranom kvalitetom, kao i odgovarajuće usluge za pripremu učinkovitih, visoko specifičnih i stabilnih antitijela. Koristeći sveobuhvatne platforme antitijela i inženjering antitijela, pružamo usluge koje pokrivaju uzvodno i nizvodno proizvodnju antitijela, uključujući tehničke usluge kao što su priprema antitijela, pročišćavanje, sekvenciranje antitijela i validacija.

Alpha Lifetech ima zrelu platformu za otkrivanje antitijela koja klijentima pruža niz usluga uključujući imunitet životinja, izgradnju biblioteke antitijela za prikaz faga, sekvenciranje antitijela, ekspresiju antitijela, pročišćavanje antitijela, validaciju antitijela i označavanje antitijela na temelju tehnologije hibridoma, tehnologije pojedinačnih B stanica, tehnologije prikaza faga i više. Alpha Lifetech ima standardnu proizvodnu liniju, a osim usluga pripreme antitijela, mogu se pružiti i prateće usluge kao što su humanizacija antitijela, sazrijevanje afiniteta antitijela, ADC dizajn i razvoj lijekova te CAR-T naknadni dizajn sekvence. U isto vrijeme, Alpha Lifetech je konstruirao biblioteku antitijela temeljenu na M13, T4 i T7 tehnološkim platformama prikaza faga, s kapacitetom pohrane do 10^8-10^9. Pozitivna stopa, stopa umetanja i raznolikost knjižnice mogu doseći preko 90%.

Tehnologija prikaza faga

Proizvodnja monoklonskih antitijela u početku je bila pripremljena korištenjem tehnologije hibridomskih monoklonskih antitijela za proizvodnju mišjih hibridomskih monoklonskih antitijela. Konkretno, spajanjem stanica slezene iz imuniziranih miševa sa stanicama mijeloma iz ljudi ili miševa, formiraju se hibridomske stanice koje izlučuju specifična hibridomska monoklonska protutijela. Humaniziranom modifikacijom mišjih monoklonskih antitijela i modifikacijom antitijela genetskim inženjeringom kako bi se dobila konstantna ljudska imunoglobulinska regija, njihova se imunogenost može smanjiti. Inženjering monoklonskih protutijela naširoko se koristi u biomedicinskim i kliničkim primjenama.

Alpha Lifetech može pružiti sveobuhvatne usluge inženjeringa antitijela od dizajna pretkliničkog istraživačkog protokola do otkrivanja konjugata antitijela (ADC) i validacije na životinjama. Konjugati lijekova protutijela (ADC) mogu isporučiti lijekove za kemoterapiju stanicama raka. Nakon vezanja na specifične mete izražene na stanicama raka, ADC otpušta citotoksične lijekove u stanice raka. Alpha Lifetech također može klijentima pružiti sveobuhvatne usluge sazrijevanja afiniteta antitijela. S naprednom optimizacijom mutacija i visokoučinkovitom tehnologijom skrininga prikaza faga, antitijela s određenim afinitetom se prvo pretražuju, a zatim se uvode mutacije aminokiselina kako bi se stvorile različite varijante. Nakon toga, antitijela visokog afiniteta su procijenjena i pretražena korištenjem tehnika pregleda. Nakon više krugova optimizacije i strukturne analize, u konačnici su dobivena protutijela s višim afinitetom i jačom specifičnošću.

Alpha Lifetech može konstruirati različite vrste biblioteka za prikaz faga antitijela, uključujući imunološke biblioteke, izvorne biblioteke, polusintetičke biblioteke i sintetičke biblioteke. Na temelju velikog kapaciteta biblioteka antitijela mogu se dobiti visoko specifična antitijela. Mogu se osigurati višestruki fagemidni vektori kao što su pMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, kao i sojevi kao što su TG1 E. coli, XL1 Blue i ER2738. Uz kapacitet biblioteke do 10^9, ciljna stopa umetanja fragmenata biblioteke također je visoka, stvarajući dovoljne uvjete za probir protutijela koji zadovoljavaju korisnike. Dijagram toka usluge pripreme antitijela tvrtke Alpha Lifetech temeljene na tehnologiji prikaza faga prikazan je na slici 1.

Slika 1 Dijagram procesa za pripremu monoklonskih protutijela na temelju tehnologije fagnog prikaza.

Tijek rada proizvodnje antitijela za prikaz faga

Koraci	Sadržaj usluge	Vremenska crta
Korak 1: Imunizacija životinja	(1) Imunizacija životinja 4 puta, docjepljivanje 1 doza, ukupno 5 doza imuniziranih. (2) Prikupljen je negativni serum prije imunizacije, a ELISA je učinjena na četvrtoj dozi za otkrivanje titra seruma. (3) Ako titar antitijela u serumu četvrte doze zadovoljava zahtjeve, primijenit će se jedna dodatna doza imunizacije 7 dana prije uzimanja krvi. Ako ne ispunjava uvjete, nastavit će se rutinska imunizacija. (4) Kvalificirana snaga, prikupljanje krvi i odvajanje monocita	10 tjedana
Korak 2: Priprema cDNA	(1) PBMC Totalna ekstrakcija RNK (komplet za ekstrakciju RNK) (2) Visokovjerna RT-PCR priprema cDNA (kit za reverznu transkripciju)	1 dan
Korak 3: Konstrukcija biblioteke antitijela	(1) Korištenjem cDNA kao uzorka, geni su umnoženi u dvije runde PCR-a. (2) Konstrukcija i transformacija faga: spajanje gena fagemidnog vektora, transformacija elektroporacijom TG1 bakterije domaćina, konstrukcija biblioteke antitijela. (3) Identifikacija: Nasumično odaberite 24 klona, stopa pozitivnih PCR identifikacija + stopa umetanja. (4) Potpomognuta priprema faga: amplifikacija faga M13 + pročišćavanje. (5) Spašavanje knjižnice prikaza faga	3-4 tjedna
Korak 4: Probir biblioteke antitijela (3 kruga)	(1) Zadani probir u 3 ciklusa (probir čvrste faze): probir pod pritiskom za uklanjanje nespecifičnih protutijela u najvećoj mogućoj mjeri. (2) Odabrani bakteriofag za amplificiranje jednog klona+IPTG inducirana ekspresija+ELISA detekcija pozitivnih klonova. (3) Svi pozitivni klonovi odabrani su za sekvenciranje gena.	4-5 tjedana

Prednost tehnologije prikaza faga

Alpha Lifetech ima bogato iskustvo u području razvoja antitijela. Tijekom godina, Alpha Lifetech je uspostavio sveobuhvatnu platformu za razvoj antitijela.

Usluge podrške

Možemo pružiti različite usluge izgradnje imunoloških knjižnica temeljenih na životinjama i usluge skrininga knjižnica prirodnih antitijela prema potrebama kupaca

Više meta

Dostupne su usluge otkrivanja više ciljnih antitijela: proteini, peptidi, male molekule, virusi, membranski proteini, mRNA, itd.

Višestruki vektori

Personalizirana usluga izgradnje knjižnice, možemo pružiti različite vektore bakteriofaga uključujući PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, te ih modificirati prema potrebama kupaca

Zrela platforma

Kapacitet skladištenja može doseći 10 ^ 8-10 ^ 9, stope umetanja su sve iznad 90%, a afinitet protutijela dobivenih probirom općenito je na razini nM pM

Povezani SERVIS

Višestruke strategije razvoja antitijela

Služba za razvoj monoklonskih antitijela

Hybridoma tehnološka platforma

Platforma za sortiranje jedne B ćelije

Platforma za razvoj antitijela za prikaz faga

razvoj monoklonskih antitijela-Alpha Lifetech

Služba za razvoj monoklonskih antitijela

Možemo pružiti visokokvalitetne, visoke čistoće i visoko specifične usluge razvoja monoklonskih antitijela, uključujući proizvodnju mišjih monoklonskih antitijela i zečjih monoklonskih antitijela

Hybridoma tehnološka platforma

Uključujući program imunizacije, usluge pripreme antitijela, pročišćavanje antitijela, visokoproduktivno sekvenciranje antitijela, validaciju antitijela itd.

Platforma za sortiranje jedne B ćelije

Alpha Lifetech ima prednosti u vremenu probira i dobivanju visokokvalitetnih antitijela. Može osigurati dizajn, sintezu i modifikaciju antigena, životinjski imunitet, skrining obogaćivanja pojedinačnih B stanica, sekvenciranje pojedinačnih stanica.