Platforma biblioteke peptida za prikaz faga

Na temelju tehnologije prikaza faga, Alpha Lifetech može pružiti kupcima visokokvalitetne usluge izgradnje i probira biblioteka peptida za prikaz faga, uključujući linearne biblioteke 7 peptida, linearne biblioteke 9 peptida, linearne biblioteke 10 peptida, linearne biblioteke 15 peptida, linearne biblioteke 12 peptida, cikličke biblioteke 7 peptida i druge biblioteke peptida, raznolikost biblioteka, stopa umetanja, pozitivna stopa mogu doseći više od 90%, kako bi se zadovoljile različite potrebe različitih kupaca za bibliotekama peptida za prikaz faga.

Biblioteke fagnog prikaza široko se koriste u biomedicinskim istraživanjima i primjenama. Na primjer, u inženjerstvu antitijela i razvoju antitijela, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti za probir i poboljšanje varijanti antitijela; u probiru lijekova i otkrivanju ciljeva lijekova, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti za traženje proteina ili peptida s potencijalom lijekova. U istraživanju cjepiva, biblioteka fagnog prikaza može se koristiti za odabir antigena cjepiva i razvoj cjepiva. Osim toga, biblioteke fagnog prikaza mogu se koristiti i u mnogim područjima kao što su istraživanje interakcija proteina, dijagnoza i liječenje raka.

Tehnologija prikaza faga

Tehnologija prikaza faga je tehnologija koja spaja gen ciljnog proteina s genom proteina površine faga, te čini ciljni protein prisutnim na površini faga u obliku fuzijskog proteina putem ekspresije gena. Ovi proteini prikazani na površini faga mogu održavati relativnu prostornu strukturu i biološku aktivnost te se mogu pregledati, detektirati i prepoznati interakcijom sa specifičnim antitijelima ili drugim molekulama. Objekti prikaza tehnologije prikaza faga uključuju antitijelo, fragment antitijela, peptidni segment, cDNA itd.

Tehnologija prikaza faga uglavnom uključuje sustav prikaza faga M13 (kao što su sustav prikaza PⅢ, sustav prikaza PⅧ itd.), sustav prikaza faga λ, sustav prikaza faga T4, sustav prikaza faga T7 itd. Svaki od ovih sustava ima svoje karakteristike i prikladan je za različite istraživačke potrebe. Fag M13, zbog svojih lizogenih svojstava, ne lizira stanicu domaćina nakon infekcije, što mu omogućuje kontinuiranu replikaciju i ekspresiju stranih fragmenata unutar stanice domaćina, pogodnu za dugoročni probir i stabilnu ekspresiju. Zbog svog kratkog životnog ciklusa i visoke učinkovitosti replikacije, fag T7 može brzo proizvesti veliki broj potomaka faga, što je prikladno za probir visokog protoka i brzu ekspresiju.

	M13 fag	T7 fag
1. Morfološka struktura	Filamentozni fag	Poliedarski fag
2. Genetski materijal	Kružna jednolančana molekula DNA	Linearna, dvolančana, terminalno suvišna DNA
3. Replikacija i infekcija	Lizogeni fagi, sastavljeni u periplazmi, mogu se izlučivati iz bakterijskih membrana bez liziranja stanica domaćina.	Virulentni fagi, potomci faga sastavljenih u bakterijskoj citoplazmi, oslobađaju se lizom stanične membrane.
4. Sustav prikaza	Konstruiran je sustav za prikaz korištenjem kapsidnih proteina pIII i PVIII, prikladnih za prikaz stranih peptida/proteina različitih veličina.	Sustav prikaza konstruiran je s kapsidnim proteinom 10B, koji ne zahtijeva proces sekrecije i prikladan je za prikaz peptida/proteina koji imaju inhibitorni učinak na proces sekrecije.
5. Prednost primjene	Pogodan je za prikaz i dugoročni probir peptida malih molekula.	Ima prednosti u brzoj ekspresiji i visokom protoku probira makromolekularnih proteina.

Vrste biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech ima iskustva u konstrukciji i probiru peptidnih biblioteka za fagni prikaz te nudi razne vrste peptidnih biblioteka za odabir. Prema duljini peptida, može se podijeliti na 7 peptidnih biblioteka, 9 peptidnih biblioteka, 10 peptidnih biblioteka, 12 peptidnih biblioteka i 15 peptidnih biblioteka. Prema prostornoj konformaciji polipeptida, može se podijeliti na linearnu biblioteku fagnih peptida i cikličku biblioteku fagnih peptida.

Linearna biblioteka fagnih peptida

Gen za peptid je umetnut u regiju koja kodira protein omotača fagnog genoma, obično pIII ili PVIII, i prikazuje se kao linearni ravni lanac. Linearni peptidi mogu se lako razgraditi in vivo, a njihova sposobnost vezanja i stabilnost mogu biti pogođeni.

biblioteka cikličkih fagnih peptida

Modificirani prstenasti peptid će formirati fiksnu konformaciju pod djelovanjem disulfidnih veza ili drugih veznih veza, što će ne samo uvelike poboljšati metaboličku stabilnost i bioraspoloživost, već će i bolje zadovoljiti zahtjeve vezanja konformacije receptor-ligand (antitijelo-antigen).

Proces biblioteke peptida za prikaz faga

Odabir faga

Kao nosači se obično odabiru fagi tipa M13 ili fagi tipa T7.

Izgradnja biblioteke peptida za fagni prikaz

Konstruirati fagni vektor sposoban sadržavati kodirajuću sekvencu stranog proteina ili polipeptida, koja obično uključuje promotor, selektivne markere i odgovarajuće regulatorne elemente. Umetanje kodirajuće sekvence stranog proteina ili peptida u nosač faga, obično metodama rezanja i ligiranja restrikcijskim enzimima. Konstruirani fagni vektor transformira se u stanicu domaćina, omogućujući fagu da replicira i eksprimira strane proteine ili peptide unutar stanice. Fagne knjižnice koje sadrže više različitih stranih proteina ili peptida pripremaju se opsežnom transformacijom i amplifikacijom.

fagni prikaz peptidne biblioteke probir

Fiksirajte ciljne molekule (kao što su proteini, receptori ili antitijela) na nosaču čvrste faze. Inkubirajte konstruiranu biblioteku peptida za prikaz faga s fiksnom metom kako biste omogućili peptidima na fagu da se vežu za ciljnu molekulu. Tijekom ovog procesa, nevezani bakteriofagi se uklanjaju pranjem, a zadržavaju se bakteriofagi koji se vežu za metu, a bakteriofagi visokog afiniteta vezani za bakteriofage se eluiraju. Oporavljeni bakteriofagi se amplificiraju infekcijom Escherichia coli, a zatim se podvrgavaju sljedećem krugu probira. Obično je potrebno 3-5 krugova probira kako bi se dobili peptidi s visokom učinkovitošću vezanja.

Dizajn i sinteza peptida

Sintetizirajte peptide na temelju mjesta probira.

Sl.1 Konstrukcija i proces probira biblioteke peptida za prikaz faga

Povezana platforma

Alpha Lifetech može svojim klijentima pružiti visokokvalitetne usluge izgradnje i probira biblioteke peptida za fagni prikaz.

biblioteka antitijela za fagni prikaz - Alpha Lifetech

Platforma za izgradnju biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech ima niz tehnologija za izgradnju peptidnih biblioteka. Uglavnom pružamo usluge izgradnje T7 peptidnih biblioteka i M13 peptidnih biblioteka prema tipovima faga.

ČITAJ VIŠE

probir faga - Alpha Lifetech probir faga - Alpha Lifetech

Platforma za probir biblioteke peptida za prikaz faga

Alpha Lifetech ima bogato iskustvo u probiru peptidnih fagnih biblioteka, pružajući snažnu tehničku podršku za otkrivanje lijekova malih molekula, kliničku dijagnozu, liječenje bolesti i biološka istraživanja.

ČITAJ VIŠE