Uvod u biblioteke sintetiziranih antitijela

Sintetizirana biblioteka antitijela, također poznata kao De novo biblioteka, sintetska je metoda koja koristi tehnike poput sinteze DNA ili prikaza faga za dizajniranje i sintezu potpunih varijabilnih regija antitijela, uključujući okvirne regije i CDR-ove, bez oslanjanja na naivne biblioteke antitijela.

Biblioteka polusintetskih antitijela stvara se kombiniranjem prirodnih biblioteka antitijela sa sintetskom raznolikošću. Obično uključuje sintezu DNA oligonukleotida kako bi se dobio skup različitih komplementarno određenih regija (CDR), koje se zatim kombiniraju s konstantnim okvirom antitijela dobivenim iz prirodnih izvora kao što su ljudske ili životinjske B stanice. Sintetizirani CDR uvodi raznolikost u biblioteku, što rezultira antitijelima usmjerenim na širok raspon epitopa. Biblioteka polusintetskih antitijela pruža kompromis između prirodne raznolikosti imunološkog sustava i kontrolirane raznolikosti postignute sintetskim metodama.

Razlika između naivnih i sintetskih biblioteka antitijela ovisi o izvoru imunoglobulinskih gena. S druge strane, razlika između polusintetizirane i sintetizirane biblioteke antitijela leži u tome što se prva sastoji od dijela segmenata naivnih antitijela, poput lakog ili teškog lanca, a samo jedan od njih je sintetiziran in vitro; dok je sintetizirana u potpunosti izvedena umjetnom sintezom PCR-om in vitro.

Alpha Lifetech može pružiti

Alpha Lifetech Inc.Možemo ponuditi biblioteku polusintetiziranih/sintetiziranih antitijela iz životinja i ljudi temeljenu na našoj profesionalnoj platformi za otkrivanje antitijela. S dugogodišnjim iskustvom u genetskoj modifikaciji i izgradnji biblioteka, mogu se konstruirati sintetizirane biblioteke koje su sposobne proizvesti sintetska antitijela s afinitetom i specifičnošću koji nadilaze kapacitet prirodnih antitijela.Alpha LifetechStručnjaci s ponosom objavljuju da mogu jamčiti visoku stopu uspjeha u izgradnji biblioteke antitijela koja sadrži 10^8 – 10^10 neovisnih klonova.

Alpha Lifetech Inc.ponosno nudi sveobuhvatne usluge izgradnje biblioteka antitijela kako bi zadovoljio raznolike potrebe globalnih istraživača, uključujući scFv, Fab, VHH antitijela i prilagođene biblioteke. Naš je cilj razumjeti i zadovoljiti zahtjeve različitih kupaca te pomoći u rješavanju svih nadolazećih i novonastalih problema u istraživačkom radu.

Proces izgradnje sintetiziranih biblioteka antitijela

Dizajn
Faza dizajniranja uključuje odabir okvira antitijela i regija koje određuju komplementarnost (CDR) na temelju postojećih sekvenci antitijela ili strukturnih podataka. Sintetska CDR antitijela također se mogu dizajnirati za uvođenje specifičnih funkcionalnosti ili poboljšanje svojstava vezanja.

Sinteza
Sintetska DNA koja kodira dizajnirane sekvence antitijela, uključujući i okvirne regije i CDR-ove, sintetizira se kemijskim ili enzimskim metodama.

Skupština
Sintetizirani fragmenti DNA sastavljaju se u vektore ekspresije antitijela korištenjem tehnika kao što su PCR, ligacija ili Gibsonovo sastavljanje. Ovi vektori se zatim mogu uvesti u ekspresijske sustave kao što su bakterijske, kvasne ili sisavčeve stanice za proizvodnju antitijela.

Probir i odabir
Konstruirane biblioteke antitijela se pregledavaju i odabiru na antitijela sa željenim svojstvima korištenjem visokopropusnih metoda probira. To može uključivati ​​tehnike kao što su prikaz faga, prikaz kvasca ili prikaz ribosoma, ovisno o formatu biblioteke i primjeni.

Usluga izgradnje biblioteka sintetiziranih antitijela

Alpha Lifetech Inc.pruža kupcima uslugu dizajna i sintetizacije biblioteka antitijela na jednom mjestu ligiranjem repertoara V-gena teškog i lakog lanca u fagni vektor korištenjem Cre-lox sustava rekombinacije specifičnog za mjesto kako bi se stvorio repertoar Fab-ova prikazanih na fagu koji sadrži 6,5 × 10^10 klonova. Biblioteka je dala antitijela protiv brojnih antigena, neki s nanomolarnim afinitetom. Generiranje biblioteke ljudskih antitijela temelji se na M13 tehnologiji prikaza faga (prikazano na slici ispod).