Kisa Enjenyèri Antikò ye?

Avèk èd enjenyèri antikò, li te posib pou modifye gwosè molekilè, farmakokinetik, imunojenisite, afinite lyezon, espesifikite ak fonksyon efèktè antikò yo. Apre yo fin sentetize antikò yo, lyezon espesifik antikò yo fè yo trè enpòtan nan dyagnostik klinik ak tretman. Atravè enjenyèri antikò, yo ka satisfè bezwen devlopman bonè medikaman ak dyagnostik.

Objektif jeni antikò a se pou konsepsyon ak pwodui fonksyon trè espesifik ak ki estab ke antikò natirèl yo pa ka reyalize, pou poze fondasyon pou pwodiksyon antikò ki ka geri ou.

Alpha Lifetech, ak eksperyans vaste li nan pwojè enjenyè antikò, ka bay sèvis antikò monoklonal ak poliklonal pèsonalize pou plizyè espès, ansanm ak sèvis konstriksyon ak tès depistaj bibliyotèk antikò ekspozisyon faj. Alpha Lifetech ka bay kliyan yo antikò byosimilè kalite siperyè ak pwodwi pwoteyin rekombinan, ansanm ak sèvis korespondan, pou pwodui antikò efikas, trè espesifik, ak ki estab. Lè nou itilize antikò konplè, platfòm pwoteyin ak sistèm ekspozisyon faj, nou bay sèvis ki kouvri amont ak aval pwodiksyon antikò, ki gen ladan sèvis teknik tankou imanizasyon antikò, pirifikasyon antikò, sekans antikò, ak validasyon antikò.

Etap pyonye nan jeni antikò a gen rapò ak de teknoloji:

--Teknoloji ADN rekombinan

--Teknoloji Ibridòm

Devlopman rapid nan jeni antikò gen rapò ak twa teknoloji enpòtan:

--Teknoloji klonaj jèn ak reyaksyon chèn polimeraz

Ekspresyon pwoteyin: Pwoteyin rekombinan yo pwodui pa sistèm ekspresyon tankou ledven, viris ki gen fòm baton, ak plant yo.

--Konsepsyon estriktirèl asisté pa òdinatè

Premye jenerasyon antikò yo te imanize pou pwodiksyon antikò kimerik, kote rejyon varyab antikò monoklonal sourit yo te lye ak rejyon konstan molekil IgG imen yo. Rejyon lyezon antijèn (CDR) antikò monoklonal sourit dezyèm jenerasyon an te transplante nan IgG imen. Eksepte rejyon CDR a, tout lòt antikò yo se prèske antikò imen, epi yo te fè efò pou evite pwovoke repons antikò anti-souris imen (HAMA) lè yo te itilize antikò klon sourit pou tretman imen.

 

Pou konstwi yon bibliyotèk ekspozisyon faj, premye etap la se jwenn jèn ki kode antikò yo, ke yo ka izole nan selil B bèt ki imunize yo (konstriksyon bibliyotèk iminitè), ekstrè dirèkteman nan bèt ki pa imunize yo (konstriksyon bibliyotèk natirèl), oswa menm rasanble in vitro ak fragman jèn antikò (konstriksyon bibliyotèk sentetik). Apre sa, jèn yo anplifye pa PCR, mete nan plasmid, epi eksprime nan sistèm lame ki apwopriye (ekspresyon ledven (anjeneral Pichia pastoris), ekspresyon prokaryotik (anjeneral E. coli), ekspresyon selil mamifè, ekspresyon selil plant, ak ekspresyon selil ensèk ki enfekte ak viris ki gen fòm baton). Sistèm ekspresyon E. coli ki pi komen an se, ki entegre yon sekans antikò kodaj espesifik sou faj la epi ki kode youn nan pwoteyin koki faj yo (pIII oswa pVIII). Fizyon jèn nan, Ak parèt sou sifas bakteriofaj yo. Nwayo teknoloji sa a se konstwi yon bibliyotèk ekspozisyon faj, ki gen avantaj sou bibliyotèk natirèl yo ke li ka gen lyezon espesifik. Apre sa, antikò ki gen espesifikite antijèn yo teste atravè yon pwosesis seleksyon byolojik, antijèn sib yo fikse, faj ki pa mare yo lave plizyè fwa, epi faj ki mare yo lave pou plis anrichisman. Apre twa oswa plis seri repetisyon, antikò ki gen gwo espesifikite ak gwo afinite yo izole.

Fig 3: Konstriksyon ak Depistaj Bibliyotèk Antikò

Teknoloji ADN rekombinan an ka itilize pou jenere fragman antikò. Okòmansman, antikò Fab yo ka sèlman idrolize pa pwoteaz gastrik pou pwodui fragman (Fab ') 2, ki answit dijere pa papain pou jenere fragman Fab endividyèl. Fragman Fv la konsiste de VH ak VL, ki gen yon estabilite pòv akòz absans lyezon disulfid. Se poutèt sa, VH ak VL lye ansanm atravè yon ti peptid ki gen 15-20 asid amine pou fòme yon antikò fragman varyab chèn sèl (scFv) ak yon pwa molekilè apeprè 25KDa.

Etid sou estrikti antikò nan Camelidae (Chamo, Liama, ak Alpaca) te montre ke antikò yo sèlman gen chenn lou epi yo pa gen chenn lejè, kidonk yo rele yo antikò chenn lou (hcAb). Domèn varyab antikò chenn lou yo rele antikò domèn sèl oswa nanobodies oswa VHH, ak yon gwosè 12-15 kDa. Kòm monomè, yo pa gen lyezon disulfid epi yo trè estab, ak yon afinite trè wo pou antijèn.

Fig 5: Antikò Chèn Lou ak VHH/ Nanobody

Ekspresyon lib selilè itilize ekspresyon ADN natirèl oswa sentetik pou reyalize sentèz pwoteyin in vitro, tipikman lè l sèvi avèk sistèm ekspresyon E. coli a. Li pwodui pwoteyin byen vit epi evite chay metabolik ak sitotoksik sou selil yo lè y ap pwodui gwo kantite pwoteyin rekombinan in vivo. Li kapab pwodui tou pwoteyin ki difisil pou sentetize, tankou sa yo ki difisil pou modifye apre tradiksyon oswa sentetize pwoteyin manbràn.