Fágmegjelenítő antitest-fejlesztő platform

Az Alpha Lifetech, az antitest-kutatásban szerzett széleskörű projekttapasztalatával, testreszabott monoklonális és poliklonális antitest szolgáltatásokat kínál több faj esetében, valamint antitestkönyvtár-építési és szűrési szolgáltatásokat. Az Alpha Lifetech minőségi, biztosított antitest- és rekombináns antitesttermékeket, valamint kapcsolódó szolgáltatásokat nyújt ügyfeleinek hatékony, nagy specifikusságú és stabil antitestek előállításához. Átfogó antitest platformok és antitest-mérnöki munka alkalmazásával szolgáltatásokat nyújtunk az antitest-termelés upstream és downstream szakaszaiban, beleértve az olyan technikai szolgáltatásokat, mint az antitest-előállítás, tisztítás, antitest-szekvenálás és validálás.

Az Alpha Lifetech egy kiforrott antitest-felfedező platformmal rendelkezik, amely számos szolgáltatást nyújt ügyfeleinek, beleértve az állati immunitást, a fágmegjelenítéses antitestkönyvtár létrehozását és szűrését, az antitest-szekvenálást, az antitest-expressziót, az antitest-tisztítást, az antitest-validálást és az antitest-jelölést hibridóma technológián, egy B-sejt technológián, fágmegjelenítési technológián és egyebeken alapulva. Az Alpha Lifetech standard gyártósorral rendelkezik, és az antitest-előállítási szolgáltatások mellett olyan támogató szolgáltatásokat is nyújt, mint az antitest-humanizáció, az antitest-affinitásérés, az ADC gyógyszertervezés és -fejlesztés, valamint a CAR-T későbbi szekvenciatervezés. Ugyanakkor az Alpha Lifetech létrehozott egy antitestkönyvtárat az M13, T4 és T7 fágmegjelenítési technológiai platformokon alapulva, akár 10^8-10^9 tárolási kapacitással. A könyvtár pozitív aránya, beszúrási aránya és diverzitása elérheti a 90%-ot.

Fágmegjelenítő technológia

A monoklonális antitestek előállítását kezdetben hibridóma monoklonális antitest technológiával végezték egér hibridóma monoklonális antitest előállítására. Konkrétan, immunizált egerek lépsejtjeinek és emberi vagy egér mielóma sejtjeinek fúziójával hibridóma sejtek jönnek létre, amelyek specifikus hibridóma monoklonális antitest antitesteket választanak ki. Az egér monoklonális antitestek humanizált módosításával és az antitestek genetikai módosításával, hogy állandó humán immunglobulin régiót kapjanak, immunogenitásuk csökkenthető. A monoklonális antitest-tervezést széles körben alkalmazzák biomedicinális és klinikai alkalmazásokban.

Az Alpha Lifetech teljes körű antitest-mérnöki szolgáltatásokat nyújt a preklinikai kutatási protokollok tervezésétől az antitest-gyógyszerkonjugátumok (ADC-k) felfedezéséig és az állatkísérletekben való validálásig. Az antitest-gyógyszerkonjugátumok (ADC-k) kemoterápiás gyógyszereket juttathatnak a rákos sejtekbe. Miután a rákos sejteken expresszált specifikus célpontokhoz kötődnek, az ADC citotoxikus gyógyszereket szabadít fel a rákos sejtekbe. Az Alpha Lifetech átfogó antitest-affinitás-érési szolgáltatásokat is nyújt ügyfeleinek. A fejlett mutációoptimalizálási és nagy áteresztőképességű fág-megjelenítési szűrőtechnológiának köszönhetően először bizonyos affinitással rendelkező antitesteket szűrnek, majd aminosav-mutációkat vezetnek be a különböző variánsok létrehozása érdekében. Ezt követően nagy affinitású antitesteket értékeltek és szűrtek szűrőtechnikák segítségével. Több optimalizálási és szerkezeti elemzési kör után végül nagyobb affinitással és erősebb specificitással rendelkező antitesteket kaptak.

Az Alpha Lifetech különféle típusú antitest fágmegjelenítő könyvtárakat tud létrehozni, beleértve az immunkönyvtárakat, natív könyvtárakat, félszintetikus könyvtárakat és szintetikus könyvtárakat. Az antitestkönyvtárak nagy kapacitásának köszönhetően nagy specifikusságú antitestek állíthatók elő. Több fágmid vektor, például pMECS, pComb3X és pCANTAB 5E, valamint olyan törzsek is biztosíthatók, mint a TG1 E. coli, XL1 Blue és ER2738. A könyvtár akár 10^9-es kapacitása mellett a könyvtár célfragmentum-beszúrási aránya is magas, ami megfelelő feltételeket teremt az ügyfelek igényeit kielégítő antitestek szűréséhez. Az Alpha Lifetech fágmegjelenítő technológián alapuló antitest-előállítási szolgáltatásának folyamatábrája az 1. ábrán látható.

1. ábra: Folyamatábra monoklonális antitestek előállítására fág-megjelenítési technológián alapulva.

Fágmegjelenítő antitest-előállítási munkafolyamat

Lépések	Szolgáltatás tartalma	Idővonal
1. lépés: Állatok immunizálása	(1) Állatimmunizálás 4 alkalommal, emlékeztető oltás 1 adaggal, összesen 5 adag immunizált. (2) Az immunizálás előtt negatív szérumot gyűjtöttek, és a negyedik dózisnál ELISA-t végeztek a szérum titerének meghatározására. (3) Ha a negyedik adag szérum antitest titere megfelel a követelményeknek, akkor egy további immunizációs adagot kell beadni 7 nappal a vérvétel előtt. Ha nem felel meg a követelményeknek, a rutinszerű immunizáció folytatódik. (4) Minősített hatékonyság, vérvétel és monociták elválasztása	10 hét
2. lépés: cDNS előállítása	(1) PBMC teljes RNS extrakció (RNS extrakciós készlet) (2) Nagy pontosságú RT-PCR cDNS előállítása (reverz transzkripciós készlet)	1 nap
3. lépés: Antitestkönyvtár létrehozása	(1) cDNS-t használva templátként, a géneket két PCR-körrel amplifikáltuk. (2) Fág előállítása és transzformálása: génillesztéses fágmid vektor, TG1 gazdabaktériumok elektroporációs transzformációja, antitestkönyvtár létrehozása. (3) Azonosítás: Véletlenszerűen kiválasztunk 24 klónt, PCR azonosítás pozitív arány + inszerciós arány. (4) Asszisztált fágelőkészítés: M13 fág amplifikáció+tisztítás. (5) Fágmegjelenítő könyvtár mentése	3-4 hét
4. lépés: Antitestkönyvtár szűrése (3 kör)	(1) Alapértelmezett 3-körös szűrés (szilárd fázisú szűrés): nyomás alatt végzett szűrés a nem specifikus antitestek lehető legnagyobb mértékű eltávolítása érdekében. (2) Egyszeres klón amplifikáció bakteriofág szelektálással + IPTG indukált expresszió + pozitív klónok ELISA kimutatása. (3) Minden pozitív klónt kiválasztottunk génszekvenáláshoz.	4-5 hét

A fágkijelző technológia előnye

Az Alpha Lifetech gazdag tapasztalattal rendelkezik az antitestfejlesztés területén. Az évek során az Alpha Lifetech átfogó antitestfejlesztési platformot hozott létre.

Támogatási szolgáltatások

Különböző állati alapú immunkönyvtár-építési és természetes antitestkönyvtár-szűrési szolgáltatásokat tudunk nyújtani az ügyfelek igényei szerint.

Többszörös célpont

Több célpont antitest-felderítő szolgáltatás is elérhető: fehérjék, peptidek, kis molekulák, vírusok, membránfehérjék, mRNS stb.

Többszörös vektorok

Személyre szabott könyvtárépítési szolgáltatást nyújtunk, különféle bakteriofág vektorokat, beleértve a PMECS-t, a pComb3X-et és a pCANTAB 5E-t, és azokat az ügyfél igényei szerint módosítjuk.

Érett platform

A tárolási kapacitás elérheti a 10^8-10^9-et, a beépülési arányok mind 90% felett vannak, és a szűréssel kapott antitestek affinitása általában nM pM szinten van.

Kapcsolódó SZOLGÁLTATÁS

Többszörös antitestfejlesztési stratégiák

Monoklonális Antitest Fejlesztő Szolgálat

Hibridóma Technológiai Platform

Egyetlen B-sejtes válogató platform

Fágmegjelenítő antitest-fejlesztő platform

monoklonális antitest fejlesztés - Alpha Lifetech

Monoklonális Antitest Fejlesztő Szolgálat

Kiváló minőségű, nagy tisztaságú és rendkívül specifikus monoklonális antitest-fejlesztési szolgáltatásokat kínálunk, beleértve az egér monoklonális antitestek és a nyúl monoklonális antitestek előállítását.

Hibridóma Technológiai Platform

Beleértve az immunizációs programot, az antitest-előállítási szolgáltatásokat, az antitest-tisztítást, az antitestek nagy áteresztőképességű szekvenálását, az antitest-validálást stb.

Egyetlen B-sejtes válogató platform

Az Alpha Lifetech előnyei közé tartozik a szűrési idő és a kiváló minőségű antitestek előállítása. Szolgáltatásokat kínál antigéntervezés, -szintézis és -módosítás, állati immunitás vizsgálata, egyedi B-sejtek dúsítása és egyedi sejtek szekvenálása terén.