Մոնոկլոնալ հակամարմինների մշակման ծառայություն

Ալֆա Լայֆթեք Ինկ.կարող է ապահովել էպիտոպի կանխատեսում, պեպտիդների սինթեզ, սպիտակուցի արտահայտություն, պոլիկլոնալ կամ մոնոկլոնալ հակամարմինների արտադրություն, ինչպես նաև հակամարմինների մաքրում բջջային կուլտուրայից, ասցիտային հեղուկից կամ ամբողջական շիճուկից։

Ալֆա Լայֆթեք Ինկ.փորձառու է հաճախորդներին տարբեր կայուն բջջային գծերի ծառայություններ մատուցելու գործում, ներառյալ հիբրիդոմային բջիջներ, գենոմի խմբագրման բջջային գծեր, նոկդաուն բջջային գծեր և գերարտահայտման բջջային գծեր: Մենք փորձում ենք յուրաքանչյուր հաճախորդի առաջարկել առաջադեմ, անհատականացված բջջային գծերի ծառայություններ, և մեր ծառայությունները ապացուցված և վստահելի են:

Հակամարմինների մշակման ռազմավարություն

1. Հակածինի նախագծում և պատրաստում
Այս հակածինները կարող են լինել սպիտակուցներ, պեպտիդներ կամ այլ մոլեկուլներ: Իմունոգենների նախագծումը պահանջում է համապարփակ մոտեցում, որը ներառում է հակածինի կառուցվածքի, իմունոլոգիայի և առաքման համակարգերի գիտելիքները: Alpha Lifetech-ը ունի հակածինների նախագծման տեխնոլոգիա, որը կարող է նախագծել իմունոգեններ կարիքավոր հաճախորդների համար:
Ալֆա Լայֆթեք ընկերությունը հաճախորդներին տրամադրում է ռեկոմբինանտ սպիտակուցային արտադրանք, որոնցից նրանք կարող են ընտրել: Մենք ունենք սպիտակուցային արտահայտման բազմազան համակարգեր, ինչպիսիք են E. coli արտահայտման համակարգը, խմորիչի արտահայտման համակարգը, բակուլովիրուս-միջատների արտահայտման համակարգը, կաթնասունների արտահայտման համակարգը և այլն, որպեսզի արտադրենք հետազոտության համար անհրաժեշտ ռեկոմբինանտ սպիտակուցները:

2. Կենդանիների իմունիզացիա
Ալֆա Լայֆթեք-ը կարող է հաճախորդներին տրամադրել իմունոգեններ, և դուք կարող եք ընտրել իմունային համակարգ ունեցող կենդանիներ, ինչպիսիք են մկները, ճագարները, ոչխարները, ալպական, ծովախոզուկները, համստերները և այլն:

3. Մոնոկլոնալ հակամարմինների արտադրության մեթոդներ

●Մաբսերի արտադրությունը հիբրիդոմա տեխնոլոգիայով
Հիբրիդոման հիբրիդային բջիջ է, որը ստացվում է երկու տեսակի բջիջների՝ մկան միելոմայի բջջային գծի և պլազմային բջիջների (լիմֆոցիտ B) միաձուլմամբ, որոնցում հետերոզիգոտ բջիջը կարող է in vitro անընդհատ հակամարմիններ արտադրել հետաքրքրության հակածինի դեմ: Հիբրիդոմայի բջջային գծի արտադրությունը բաղկացած է երեք մասից՝ հակածինի դիզայն (հապտեններ, փոքր մոլեկուլներ և պեպտիդներ), կենդանիների իմունիզացիա, բջիջների միաձուլում և դրական կլոնի սկրինինգ: Օգտագործելով եզակի իմունիզացիայի մեթոդաբանություններ, մենք ստանում ենք բջիջների միաձուլման բացառիկ բարձր արդյունավետություն (1-10 հիբրիդոմա հազար B բջիջների հաշվով) և բարձր հակամարմինների տիտրեր, մաքսիմալացնելով մեր հաջողության մակարդակը հետագա վերլուծական թեստերում, որոնք ներառում են կենսաքիմիական սկրինինգ, in vitro բջիջների վրա հիմնված փորձարկումներ և կենդանիների վրա կատարված ուսումնասիրություններ:

●Մաբսերի արտադրությունը ֆագային ցուցադրման տեխնոլոգիայով
Ֆագի ցուցադրումը առաջարկում է մոնոկլոնալ հակամարմիններ ստեղծելու մեկ այլ մեթոդ: B-լիմֆոցիտները մեկուսացվում են կենդանիների արյունից, և դրանց mRNA-ն արդյունահանվում է: ՊՇՌ-ի միջոցով այս mRNA-ն վերածվում է կԴՆԹ-ի, որը ուժեղացնում է բոլոր VH և VL հատվածները: Այնուհետև այս հատվածները կլոնավորվում են վեկտորի մեջ, սովորաբար որպես միաշղթա փոփոխական բեկորներ (scFv), բակտերիոֆագի PIII սպիտակուցի հետ միասին: Հետագայում, այս կառուցվածքը օգտագործվում է E. coli-ն վարակելու համար, որի արդյունքում ստեղծվում է մոտավորապես 10^10 բջիջ պարունակող գրադարան՝ օժանդակ ֆագով ներարկման միջոցով: Այնուհետև E. coli-ն կարողանում է արտազատել VH և VL հատվածները իր ծածկույթի մաս կազմող բակտերիոֆագը: Դրանից հետո, հետաքրքրության հակածնին թիրախավորող հատուկ VH և VL հատվածները կարող են ընտրվել և օգտագործվել E. coli-ն բակտերիոֆագով վերստին ներարկելու համար: Այնուհետև պլազմիդ պարունակող բջիջները մեկուսացվում և հաջորդականացվում են:

4. Միաձուլման սկրինինգ

●Բջիջների միաձուլում և ընտրություն
Հավաքված B բջիջները այնուհետև միաձուլվում են միելոմայի բջիջների հետ, որոնք քաղցկեղային բջիջներ են, որոնք կարող են անորոշ ժամանակով բազմանալ կուլտուրայի մեջ: Միաձուլումը սովորաբար իրականացվում է պոլիէթիլենգլիկոլի (PEG) միաձուլման նման տեխնիկայի միջոցով:
Միաձուլումից հետո հիբրիդոմայի բջիջները կուլտիվացվում են ընտրողական միջավայրում, որը թույլ է տալիս միայն հիբրիդոմաներին գոյատևել: Միջավայրը սովորաբար պարունակում է ամինոպտերին, որը կանխում է չմիաձուլված միելոմայի բջիջների աճը:

●Սկրինինգ և խցանում
Արդյունքում ստացված հիբրիդոմայի բջիջները ստուգվում են թիրախային հակածինին բնորոշ հակամարմինների արտադրության համար: Սա սովորաբար արվում է այնպիսի մեթոդների միջոցով, ինչպիսիք են ֆերմենտային կապված իմունոսորբենտային փորձարկումը (ELISA), արևմտյան բլոտը, իմունոպրեցիպիտացիան և հոսքային ցիտոմետրիան:

Հակամարմին արտադրող հիբրիդոմա բջիջները նույնականացնելուց հետո դրանք կլոնավորվում են՝ նույնական բջիջների պոպուլյացիա ստեղծելու համար։ Սա ապահովում է, որ յուրաքանչյուր հիբրիդոմա բջջի կողմից արտադրված հակամարմինը նույնական լինի։

5. Հակամարմինների ֆունկցիոնալ ստուգում
Ալֆա Լայֆթեքն ապահովում է հակամարմինների ֆունկցիոնալ ստուգում, ինչպիսիք են՝ Western blotting-ը, իմունահյուսվածքաքիմիան կամ ֆունկցիոնալ անալիզները,՝ մոնոկլոնալ հակամարմինները բնութագրելու և հակամարմինների յուրահատկությունը, կապակցությունը և ֆունկցիոնալությունը հաստատելու համար։

6. Հակամարմինների օպտիմալացում
Հակամարմինների մաքրումը կուլտուրայի վերին շերտից՝ օգտագործելով այնպիսի մեթոդներ, ինչպիսիք են սպիտակուց A-ն կամ սպիտակուց G-ն, և Alpha Lifetech-ը նույնպես կարող է ապահովել հակամարմինների մոդիֆիկացման մեթոդներ՝ հակամարմինների կապակցությունը բարելավելու համար։

7. Հակամարմինների արտադրություն
Ալֆա Լայֆթեք-ը կարող է գնահատել թեկնածու հակամարմինները բարձր արտադրողականության սկրինինգային կիրառությունների և մեծածավալ արտադրության համար։