Ֆագերի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի հարթակ
Հիմնվելով ֆագային ցուցադրման տեխնոլոգիայի վրա՝ Alpha Lifetech-ը կարող է հաճախորդներին տրամադրել բարձրորակ ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի կառուցման և սկրինինգի ծառայություններ, ներառյալ գծային 7 պեպտիդային գրադարաններ, գծային 9 պեպտիդային գրադարաններ, գծային 10 պեպտիդային գրադարաններ, գծային 15 պեպտիդային գրադարաններ, գծային 12 պեպտիդային գրադարաններ, ցիկլիկ 7 պեպտիդային գրադարաններ և այլ պեպտիդային գրադարաններ, որոնց գրադարանային բազմազանությունը, ներդրման մակարդակը, դրական մակարդակը կարող են հասնել ավելի քան 90%-ի՝ բավարարելու տարբեր հաճախորդների տարբեր կարիքները ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանների համար։
Ֆագերի ցուցադրման գրադարանները լայնորեն կիրառվում են կենսաբժշկական հետազոտություններում և կիրառություններում: Օրինակ՝ հակամարմինների ինժեներիայի և հակամարմինների մշակման մեջ, ֆագերի ցուցադրման գրադարանները կարող են օգտագործվել հակամարմինների տարբերակները սկրինինգի և կատարելագործման համար: Դեղերի սկրինինգի և դեղերի թիրախի հայտնաբերման մեջ, ֆագերի ցուցադրման գրադարանները կարող են օգտագործվել դեղագործական ներուժ ունեցող սպիտակուցներ կամ պեպտիդներ որոնելու համար: Պատվաստանյութերի հետազոտություններում, ֆագերի ցուցադրման գրադարանը կարող է օգտագործվել պատվաստանյութերի հակածինների ընտրության և պատվաստանյութերի մշակման համար: Բացի այդ, ֆագերի ցուցադրման գրադարանները կարող են օգտագործվել նաև բազմաթիվ ոլորտներում, ինչպիսիք են սպիտակուցների փոխազդեցության հետազոտությունը, քաղցկեղի ախտորոշումը և բուժումը:
Ֆագերի ցուցադրման տեխնոլոգիա
Ֆագի ցուցադրման տեխնոլոգիան մի տեխնոլոգիա է, որը միացնում է թիրախային սպիտակուցի գենը ֆագի մակերեսային սպիտակուցի գենի հետ և գեների արտահայտման միջոցով թիրախային սպիտակուցը դարձնում է ֆագի մակերեսին միաձուլված սպիտակուցի տեսքով։ Ֆագի մակերեսին ցուցադրվող այս սպիտակուցները կարող են պահպանել հարաբերական տարածական կառուցվածքը և կենսաբանական ակտիվությունը, և կարող են սկրինինգավորվել, հայտնաբերվել և ճանաչվել՝ փոխազդելով որոշակի հակամարմինների կամ այլ մոլեկուլների հետ։ Ֆագի ցուցադրման տեխնոլոգիայի ցուցադրման օբյեկտներն են՝ հակամարմին, հակամարմնի բեկոր, պեպտիդային հատված, կԴՆԹ և այլն։
Ֆագերի ցուցադրման տեխնոլոգիայի համակարգը հիմնականում ներառում է M13 ֆագերի ցուցադրման համակարգ (օրինակ՝ PⅢ ցուցադրման համակարգ, PⅧ ցուցադրման համակարգ և այլն), λ ֆագերի ցուցադրման համակարգ, T4 ֆագերի ցուցադրման համակարգ, T7 ֆագերի ցուցադրման համակարգ և այլն: Այս համակարգերից յուրաքանչյուրն ունի իր առանձնահատկությունները և հարմար է տարբեր հետազոտական կարիքների համար: M13 ֆագը, իր լիզոգեն հատկությունների շնորհիվ, չի լիզացնում տեր բջիջը վարակելուց հետո, ինչը թույլ է տալիս այն անընդհատ վերարտադրել և արտահայտել օտար բեկորներ տեր բջջի ներսում, հարմար է երկարատև սկրինինգի և կայուն արտահայտման համար: Իր կարճ կյանքի ցիկլի և բարձր վերարտադրման արդյունավետության շնորհիվ, T7 ֆագը կարող է արագորեն արտադրել մեծ թվով սերունդ ֆագեր, ինչը հարմար է բարձր թողունակության սկրինինգի և արագ արտահայտման համար:
| M13 Ֆագ | T7 ֆագ | |
|---|---|---|
| 1. Մորֆոլոգիական կառուցվածք | Թելանման ֆագ | Բազմաէդրալ ֆագ |
| 2. Գենետիկական նյութ | շրջանաձև միաշղթա ԴՆԹ մոլեկուլ | Գծային, կրկնակի շղթայով, վերջնականապես ավելորդ ԴՆԹ |
| 3. Բազմացում և վարակ | Պերիպլազմայում հավաքված լիզոգեն ֆագերը կարող են արտազատվել բակտերիալ թաղանթներից՝ առանց տեր բջիջները լիզելու։ | Վիրուլենտ ֆագերը, որոնք բակտերիալ ցիտոպլազմայում հավաքված ֆագերի սերունդներն են, արտազատվում են բջջային թաղանթի լիզիսի միջոցով։ |
| 4. Ցուցադրման համակարգ | Կառուցվել է ցուցադրման համակարգ՝ օգտագործելով pIII և PVIII կապսիդային սպիտակուցներ, որոնք հարմար են տարբեր չափերի օտար պեպտիդներ/սպիտակուցներ ցուցադրելու համար։ | Ցուցադրման համակարգը կառուցված է 10B կապսիդային սպիտակուցով, որը չի պահանջում սեկրեցիայի գործընթաց և հարմար է սեկրեցիայի գործընթացի վրա արգելակող ազդեցություն ունեցող պեպտիդների/սպիտակուցների ցուցադրման համար։ |
| 5. Կիրառման առավելություն | Այն հարմար է փոքր մոլեկուլային պեպտիդների ցուցադրման և երկարաժամկետ սկրինինգի համար։ | Այն առավելություններ ունի մակրոմոլեկուլային սպիտակուցների արագ արտահայտման և բարձր թողունակության սկրինինգի մեջ։ |
Ֆագերի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի տեսակները
Ալֆա Լայֆթեքը փորձառու է ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի կառուցման և սկրինինգի ոլորտում և առաջարկում է պեպտիդային գրադարանների բազմազան տեսակներ՝ ընտրելու համար: Պեպտիդի երկարության համաձայն՝ այն կարելի է բաժանել 7 պեպտիդային գրադարանների, 9 պեպտիդային գրադարանների, 10 պեպտիդային գրադարանների, 12 պեպտիդային գրադարանների և 15 պեպտիդային գրադարանների: Պոլիպեպտիդների տարածական կոնֆորմացիայի համաձայն՝ այն կարելի է բաժանել գծային ֆագային պեպտիդային գրադարանի և ցիկլիկ ֆագային պեպտիդային գրադարանի:
Գծային ֆագային պեպտիդների գրադարան
Պեպտիդային գենը տեղադրվում է ֆագի գենոմի պատյանի սպիտակուցի կոդավորող շրջանում, որը սովորաբար pIII կամ PVIII է, և ցուցադրվում է որպես գծային ուղիղ շղթա։ Գծային գծային շղթայական պեպտիդները կարող են հեշտությամբ քայքայվել in vivo պայմաններում, և դրանց կապման ունակությունն ու կայունությունը կարող են տուժել։
ցիկլիկ ֆագային պեպտիդային գրադարան
Մոդիֆիկացված օղակաձև պեպտիդը դիսուլֆիդային կամ այլ կապող կապերի ազդեցությամբ կձևավորի ֆիքսված կոնֆորմացիա, որը ոչ միայն զգալիորեն կբարելավի նյութափոխանակության կայունությունը և կենսամատչելիությունը, այլև ավելի լավ կբավարարի ընկալիչ-լիգանդ (հակամարմին-հակածին) կոնֆորմացիայի կապող պահանջները։
Ֆագի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի գործընթաց
Ֆագերի ընտրություն
Որպես կրողներ սովորաբար ընտրվում են M13 տիպի ֆագերը կամ T7 տիպի ֆագերը։
Ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի կառուցում
Կառուցել ֆագային վեկտոր, որը կարող է պարունակել օտար սպիտակուցի կամ պոլիպեպտիդի կոդավորող հաջորդականություն, որը սովորաբար ներառում է պրոմոտոր, ընտրողական մարկերներ և համապատասխան կարգավորող տարրեր: Օտար սպիտակուցի կամ պեպտիդի կոդավորող հաջորդականության ներմուծումը ֆագային կրիչի մեջ, սովորաբար սահմանափակող ֆերմենտի կտրման և լիգացման մեթոդներով: Կառուցված ֆագային վեկտորը վերափոխվում է հյուրընկալող բջջի, ինչը թույլ է տալիս ֆագին կրկնօրինակել և արտահայտել օտար սպիտակուցներ կամ պեպտիդներ բջջի ներսում: Ֆագային գրադարանները, որոնք պարունակում են բազմաթիվ տարբեր օտար սպիտակուցներ կամ պեպտիդներ, պատրաստվում են լայնածավալ վերափոխման և ուժեղացման միջոցով:
Ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի սկրինինգ
Թիրախային մոլեկուլները (օրինակ՝ սպիտակուցներ, ընկալիչներ կամ հակամարմիններ) ամրացրեք պինդ ֆազային կրիչի վրա: Կառուցված ֆագային ցուցադրման պեպտիդային գրադարանը ինկուբացեք ֆիքսված թիրախի հետ, որպեսզի ֆագի վրա գտնվող պեպտիդները կարողանան կապվել թիրախային մոլեկուլի հետ: Այս գործընթացի ընթացքում չկապված բակտերիոֆագերը հեռացվում են լվանալով՝ պահպանելով թիրախին կապվող բակտերիոֆագերը, և բարձր կապակցվածությամբ կապված բակտերիոֆագերը էլուացվում են: Վերականգնված բակտերիոֆագերը բազմապատկվում են Escherichia coli-ով վարակվելով, ապա ենթարկվում են սկրինինգի հաջորդ փուլին: Բարձր կապման արդյունավետությամբ պեպտիդներ ստանալու համար սովորաբար պահանջվում է սկրինինգի 3-5 փուլ:
Պեպտիդների նախագծում և սինթեզ
Սինթեզել պեպտիդներ՝ հիմնվելով սկրինինգային տեղամասերի վրա։

Նկ. 1. Ֆագերի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի կառուցման և սկրինինգի գործընթաց

Ֆագերի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի կառուցման հարթակ
Ալֆա Լայֆթեքն ունի պեպտիդային գրադարանի կառուցման մի շարք տեխնոլոգիաներ: Մենք հիմնականում մատուցում ենք T7 պեպտիդային գրադարանի կառուցման ծառայություններ և M13 պեպտիդային գրադարանի կառուցման ծառայություններ՝ ըստ ֆագերի տեսակների:
Կարդալ ավելին
Ֆագերի ցուցադրման պեպտիդային գրադարանի սկրինինգի հարթակ
«Ալֆա Լայֆթեք»-ը հարուստ փորձ ունի պեպտիդային ֆագերի գրադարանի սկրինինգի ոլորտում՝ ապահովելով ամուր տեխնիկական աջակցություն փոքր մոլեկուլային դեղերի հայտնաբերման, կլինիկական ախտորոշման, հիվանդությունների բուժման և կենսաբանական հետազոտությունների համար։
Կարդալ ավելին Եթե ունեք որևէ հարց, խնդրում ենք կապվել մեզ հետ ցանկացած պահի։
Leave Your Message
0102



2018-07-16 

