scFv հակամարմինների հայտնաբերման ծառայություն

Ալֆա Լայֆթեք Ինկ.հպարտությամբ առաջարկում է scFv գրադարանի կառուցման համապարփակ ծառայություններ՝ համաշխարհային գիտնականների բազմազան կարիքները բավարարելու համար: Մեր նպատակն է հասկանալ և բավարարել տարբեր հաճախորդների պահանջները, ինչպես նաև օգնել հետազոտական ​​աշխատանքներում առաջացող ցանկացած առաջիկա և ի հայտ եկող խնդրի հարցում:

Ի՞նչ է scFv-միաշղթա փոփոխական ֆրագմենտի հակամարմինը։

Միաշղթա հակամարմինը բաղկացած է հակամարմնի փոփոխական թեթև (VL) և ծանր (VH) բեկորներից, որոնք միացված են ճկուն պեպտիդային կապակցիչով, որը կարող է հեշտությամբ արտահայտվել ֆունկցիոնալ ձևով ֆագի մակերեսին և, հետևաբար, լայնորեն հայտնի է որպես միաշղթա փոփոխական բեկոր (scFv): scFv բեկորը իմունոգլոբուլինի մոլեկուլի ամենափոքր միավորն է (բացառությամբ նանոմարմինների), որը գործում է հակածին-կապող ակտիվության մեջ և թույլ է տալիս սպիտակուցային ինժեներիայի միջոցով բարելավել scFv-ի (միաշղթա փոփոխական բեկոր) հատկությունները, ինչպիսիք են կապակցության աճը և յուրահատկության փոփոխությունը: Alpha Lifetech Inc.-ում scFv հակամարմինները հիմնականում կառուցվել են հիբրիդոմայից, իմունիզացված մկների փայծաղի բջիջներից և մարդկանց B լիմֆոցիտներից: Ընդհանուր ՌՆԹ-ն կամ mRNA-ն նախ մեկուսացվում է հիբրիդոմայից, փայծաղից, լիմֆատիկ բջիջներից և ոսկրածուծի բջիջներից, որին հաջորդում է հակադարձ տրանսկրիպցիան cDNA-ի՝ որպես հակամարմնի գեների ուժեղացման (PCR) ձևանմուշ ծառայելու համար:

scFv հակամարմինների մշակում - ֆագերի ցուցադրման տեխնոլոգիա

Գրադարանի բազմազանությունը որոշվում է անկախ կլոնների քանակով: Մեծ չափի scFv հակամարմինների գրադարան ստեղծելու համար մեր գիտնականները կօգտագործեն մեր սեփական երկփուլ ռազմավարությունը գրադարան ստեղծելու համար: Նկարագրված ընթացակարգի առաջին քայլում առաջնային ռեպերտուարները պատրաստվում են VH, Vκ և Vλ տիրույթները կոդավորող ՊՇՌ արգասիքներից, ինչը հանգեցնում է միջին չափի տիպիկ գրադարանների (1-100 միլիոն կլոն): Երկրորդ քայլում VH (կամ VL) բեկորները մեկուսացվում են առաջնային ռեպերտուարներից մաքրված պլազմիդ ԴՆԹ-ի մարսման միջոցով և կլոնավորվում են VL (կամ VH) ռեպերտուարները պարունակող ակցեպտոր ֆագեմիդ վեկտորի մեջ: Այս նորարարությունը զգալիորեն մեծացնում է գրադարանների չափը (10):¹⁰-10¹²կլոններ):

ScFv հակամարմնի լայնածավալ և բարձր արդյունավետությամբ սկրինինգ

ScFv-ի լայնածավալ պատրաստման համար ակնհայտ է, որ արտահայտման տիրոջ ընտրությունը զգալի ազդեցություն կունենա գործընթացի նախագծման, հետագա մշակման ռազմավարությունների և գործընթացի արժեքի վրա: Արտադրական ուղու ընտրությունը կախված կլինի հետթրանսլյացիոն մոդիֆիկացիայի արդիականությունից և կլինիկական զարգացման ու տնտեսագիտության ժամանակացույցից, որոնք նույնպես էապես կախված են «տիրոջ համակարգից»: Չկա համընդհանուր արտահայտման համակարգ, որը կապահովի արտադրանքի արտահայտման բարձր մակարդակներ տարբեր հակամարմինների կամ նույնիսկ սպիտակուցների լայն շրջանակի համար: