Layanan Penyaringan Aptamer untuk Beberapa Target

Aptamer multitarget merupakan aptamer asam nukleat khusus yang memiliki kemampuan untuk mengikat beberapa molekul target berbeda pada saat yang bersamaan. Penyaringan aptamer multitarget Alpha Lifetech terutama menggunakan teknologi SELEX atau varian teknologi SELEX untuk mengidentifikasi dan mengisolasi aptamer yang dapat secara efisien mengikat beberapa molekul target pada saat yang bersamaan dari sejumlah besar urutan asam nukleat untai tunggal acak.

Aptamer multitarget dapat mengikat beberapa target secara bersamaan, sehingga memberikan efek terapi yang lebih komprehensif dan tepat. Pengembangan aptamer multitarget ditujukan untuk meningkatkan spesifisitas dan efektivitas agen terapi serta mengurangi efek samping. Strategi desain ini membantu mengatasi keterbatasan terapi target tunggal dan meningkatkan kemanjuran dan keamanan pengobatan secara keseluruhan. Aptamer ini memiliki potensi aplikasi yang luas dalam pengembangan obat, identifikasi penyakit, pengembangan biosensor, dan bidang lainnya.

Pengenalan Manik Magnetik SELEX

Manik magnetik SELEX merupakan metode yang umum digunakan dalam penyaringan aptamer multitarget. Berdasarkan karakteristik pemisahan manik magnetik, metode ini dapat secara efisien dan mudah menyaring aptamer dengan afinitas tinggi dan spesifisitas tinggi yang mengikat molekul target dari sejumlah besar aptamer kandidat.

Inti dari metode SELEX manik magnetik adalah menggunakan karakteristik pemisahan manik magnetik. Permukaan manik magnetik dapat digabungkan ke molekul target tertentu. Ketika aptamer kandidat terikat pada molekul target, aptamer yang terikat pada permukaan manik magnetik dapat dengan mudah dipisahkan dari aptamer bebas oleh aksi magnet. Metode ini mudah dioperasikan, tidak memerlukan instrumen yang rumit, dan memiliki efisiensi dan kemurnian pemisahan yang tinggi.

Langkah Umum untuk Manik Magnetik SELEX

Konstruksi dan persiapan pustaka Aptamer

Pertama, Anda perlu membangun pustaka aptamer yang berisi sejumlah besar urutan acak yang berpotensi mengikat beberapa molekul target. Urutan asam nukleat dalam pustaka tersebut kemudian didenaturasi dan direnaturasi agar dapat mengikat molekul target.

Penggabungan molekul target pada permukaan manik magnetik

Manik magnetik diaktifkan sehingga permukaannya memiliki gugus fungsional yang dapat mengikat molekul target. Molekul target kemudian digabungkan ke permukaan manik magnetik untuk membentuk kompleks manik-target.

Pengikatan aptamer ke target

Asam nukleat pustaka yang diolah diinkubasi dengan kompleks manik-target magnetik, yang memungkinkan aptamer untuk mengikat molekul target. Faktor-faktor seperti waktu inkubasi, suhu, dan jumlah manik-manik magnetik serta pustaka akan memengaruhi efisiensi pengikatan, sehingga diperlukan pengoptimalan.

Pemisahan dan pengayaan magnetik

Dengan menggunakan aksi magnet, aptamer yang terikat pada permukaan manik magnet dipisahkan dari aptamer bebas. Kemudian, urutan asam nukleat yang tidak terikat dihilangkan dengan pencucian dan sentrifugasi, dan aptamer yang diperkaya diperoleh.

Amplifikasi dan penyaringan berulang

Aptamer SELEX yang diperkaya diperkuat dengan PCR untuk memperoleh jumlah aptamer SELEX yang cukup untuk putaran penyaringan berikutnya. Melalui beberapa putaran penyaringan dan amplifikasi, aptamer multitarget dengan afinitas tinggi dan spesifisitas tinggi dapat disaring secara bertahap.

Gambar 1 Aptamer SELEX dengan penyaringan manik magnetik

Teknik Penyaringan Aptamer Multi-Target Lainnya

Target Kompleks SELEX

Target Kompleks SELEX merupakan metode penyaringan untuk target kompleks seperti kompleks protein, reseptor permukaan sel, dll. Karena banyaknya tempat pengikatan dan struktur spasial target kompleks, metode SELEX tradisional mungkin sulit memperoleh aptamer dengan afinitas dan spesifisitas tinggi. Oleh karena itu, Target Kompleks SELEX meningkatkan kemampuan pengikatan aptamer ke target kompleks dengan mengoptimalkan kondisi penyaringan, memperkenalkan molekul pembantu, atau mengadopsi strategi penyaringan multi-langkah.

Penghitung SELEX

Counter SELEX merupakan metode untuk meningkatkan spesifisitas aptamer dengan memperkenalkan seleksi negatif SELEX. Dalam proses penyaringan, selain seleksi positif SELEX (mengikat molekul target), seleksi negatif SELEX (mengikat molekul nontarget) dilakukan untuk menghilangkan sekuens yang mengikat molekul nontarget ini.

Alihkan SELEX

Toggle SELEX adalah metode penyaringan untuk beberapa target atau target yang berubah secara dinamis. Dengan menggunakan molekul target yang berbeda secara bergantian untuk penyaringan, aptamer yang dapat mengikat beberapa target pada saat yang sama atau mengikat target yang sama dalam kondisi yang berbeda dapat disaring. Metode ini memiliki aplikasi potensial dalam bidang pengembangan obat, identifikasi penyakit, dan pemantauan pengobatan.

Alur kerja Layanan Penyaringan Aptamer untuk Beberapa Target

	Proses	Konten Layanan	Garis Waktu
1	Pemeriksaan Aptamer Asam Nukleat	--Pelanggan menyediakan informasi target penyaringan, dan Alpha Lifetech melakukan evaluasi proyek dan pekerjaan modifikasi (modifikasi konvensional: modifikasi biotin). --Pengayaan dan penyaringan pustaka: 6-10 putaran penyaringan, penyaringan negatif SA bead. Pengurutan NGS. --Pengiriman: 10-50 urutan aptamer, termasuk frekuensi kemunculannya. Laporan eksperimen.	8-12 minggu
2	Sintesis Aptamer dan Penentuan Afinitas	--Aptamer berlabel biotin sintetis (dirancang dan disintesis sesuai dengan kondisi tertentu). --Penentuan afinitas cepat aptamer dan target (pengurutan afinitas). --Pengiriman: laporan sintesis, laporan uji afinitas, data asli.	3-4 minggu

Keuntungan dariLayanan Penyaringan Aptamer

Kami berkomitmen untuk menyediakan layanan pemeriksaan aptamer afinitas tinggi dan berkualitas tinggi kepada pelanggan kami.

Beberapa target

Berbagai target penyaringan, termasuk protein, molekul kecil, peptida, dan ion logam, dll.
beberapa metode

Berbagai metode penyaringan tersedia, termasuk SELEX tradisional, CE-SELEX, Cell-SELEX, GO-SELEX, dan Capture-SELEX.
jaminan kualitas

Kami memiliki tim profesional dengan pengalaman dalam pengembangan adaptor, dan data eksperimen kami autentik dan dapat diandalkan, sehingga memberikan solusi.
Dukungan Teknis

Kami memiliki peralatan lengkap untuk menyelesaikan optimasi dan validasi hilir, menghasilkan aptamer afinitas tinggi dan spesifisitas tinggi, dengan harga yang menguntungkan dan kualitas lebih tinggi.