Platform Pengembangan Antibodi Phage Display

Alpha Lifetech, dengan pengalaman proyek yang luas dalam penemuan antibodi, dapat menyediakan layanan antibodi monoklonal dan poliklonal yang disesuaikan untuk berbagai spesies, serta layanan pembuatan dan penyaringan pustaka antibodi. Alpha Lifetech dapat menyediakan produk antibodi dan antibodi rekombinan yang terjamin kualitasnya kepada pelanggan, serta layanan terkait, untuk mempersiapkan antibodi yang efisien, sangat spesifik, dan stabil. Dengan memanfaatkan platform antibodi yang komprehensif dan rekayasa antibodi, kami menyediakan layanan yang mencakup hulu dan hilir produksi antibodi, termasuk layanan teknis seperti persiapan antibodi, pemurnian, pengurutan antibodi, dan validasi.

Alpha Lifetech memiliki platform penemuan antibodi yang matang yang menyediakan berbagai layanan kepada pelanggan, termasuk imunitas hewan, konstruksi dan penyaringan pustaka antibodi phage display, pengurutan antibodi, ekspresi antibodi, pemurnian antibodi, validasi antibodi, dan pelabelan antibodi berdasarkan teknologi hibridoma, teknologi sel B tunggal, teknologi phage display, dan banyak lagi. Alpha Lifetech memiliki lini produksi standar, dan selain layanan persiapan antibodi, layanan pendukung seperti humanisasi antibodi, pematangan afinitas antibodi, desain dan pengembangan obat ADC, dan desain urutan CAR-T selanjutnya juga dapat disediakan. Pada saat yang sama, Alpha Lifetech telah membangun pustaka antibodi berdasarkan platform teknologi phage display M13, T4, dan T7, dengan kapasitas penyimpanan hingga 10^8-10^9. Tingkat positif, tingkat penyisipan, dan keragaman pustaka semuanya dapat mencapai lebih dari 90%.

Teknologi tampilan fage

Produksi antibodi monoklonal awalnya disiapkan menggunakan teknologi antibodi monoklonal hibridoma untuk menghasilkan antibodi monoklonal hibridoma tikus. Secara spesifik, dengan menggabungkan sel limpa dari tikus yang diimunisasi dengan sel mieloma dari manusia atau tikus, sel hibridoma terbentuk, yang mensekresikan antibodi monoklonal hibridoma spesifik. Dengan modifikasi humanisasi antibodi monoklonal tikus dan modifikasi rekayasa genetika antibodi untuk memberikannya daerah imunoglobulin manusia yang konstan, imunogenisitasnya dapat dikurangi. Rekayasa antibodi monoklonal banyak digunakan dalam aplikasi biomedis dan klinis.

Alpha Lifetech dapat menyediakan layanan rekayasa antibodi terpadu mulai dari desain protokol penelitian praklinis hingga penemuan konjugat obat antibodi (ADC) dan validasi hewan. Konjugat obat antibodi (ADC) dapat menghantarkan obat kemoterapi ke sel kanker. Setelah berikatan dengan target spesifik yang diekspresikan pada sel kanker, ADC melepaskan obat sitotoksik ke dalam sel kanker. Alpha Lifetech juga dapat menyediakan layanan pematangan afinitas antibodi yang komprehensif kepada pelanggan. Dengan optimasi mutasi tingkat lanjut dan teknologi penyaringan tampilan fage berthroughput tinggi, antibodi dengan afinitas tertentu pertama-tama disaring, kemudian mutasi asam amino diperkenalkan untuk menghasilkan berbagai varian. Selanjutnya, antibodi dengan afinitas tinggi dievaluasi dan disaring menggunakan teknik penyaringan. Setelah beberapa putaran optimasi dan analisis struktural, antibodi dengan afinitas lebih tinggi dan spesifisitas lebih kuat akhirnya diperoleh.

Alpha Lifetech dapat membangun berbagai jenis pustaka tampilan fage antibodi, termasuk pustaka imun, pustaka asli, pustaka semi sintetis, dan pustaka sintetis. Berdasarkan kapasitas pustaka antibodi yang tinggi, antibodi yang sangat spesifik dapat diperoleh. Berbagai vektor fagemid seperti pMECS, pComb3X, dan pCANTAB 5E dapat disediakan, serta strain seperti TG1 E. coli, XL1 Blue, dan ER2738. Selain kapasitas pustaka hingga 10^9, tingkat penyisipan fragmen target pustaka juga tinggi, menciptakan kondisi yang cukup untuk penyaringan antibodi yang memuaskan pelanggan. Diagram alir layanan persiapan antibodi Alpha Lifetech berdasarkan teknologi tampilan fage ditunjukkan pada Gambar 1.

Gambar 1. Diagram proses pembuatan antibodi monoklonal berdasarkan teknologi tampilan fage.

Alur Kerja Produksi Antibodi Phage Display

Tangga	Konten Layanan	Garis waktu
Langkah 1: Imunisasi hewan	(1) Imunisasi hewan 4 kali, imunisasi booster 1 dosis, total 5 dosis imunisasi. (2) Serum negatif sebelum imunisasi dikumpulkan, dan ELISA dilakukan pada dosis keempat untuk mendeteksi titer serum. (3) Jika titer antibodi serum dosis keempat memenuhi persyaratan, satu dosis imunisasi tambahan akan diberikan 7 hari sebelum pengambilan darah. Jika tidak memenuhi persyaratan, imunisasi rutin akan dilanjutkan. (4) Potensi yang memenuhi syarat, pengambilan darah dan pemisahan monosit	10 minggu
Langkah 2: Persiapan cDNA	(1) Ekstraksi RNA Total PBMC (Kit Ekstraksi RNA) (2) Preparasi RT-PCR fidelitas tinggi cDNA (kit transkripsi balik)	1 hari
Langkah 3: Pembuatan Pustaka Antibodi	(1) Dengan menggunakan cDNA sebagai templat, gen diperbanyak melalui dua putaran PCR. (2) Konstruksi dan transformasi fage: vektor fagemid penyambungan gen, transformasi elektroporasi bakteri inang TG1, konstruksi pustaka antibodi. (3) Identifikasi: Pilih 24 klon secara acak, tingkat positif identifikasi PCR + tingkat insersi. (4) Persiapan fage terbantu: Amplifikasi fage M13 + pemurnian. (5) Penyelamatan pustaka tampilan fage	3-4 minggu
Langkah 4: Penyaringan Pustaka Antibodi (3 putaran)	(1) Penyaringan 3 putaran standar (penyaringan fase padat): penyaringan tekanan untuk menghilangkan antibodi non-spesifik sejauh mungkin. (2) Amplifikasi klon tunggal yang dipilih oleh bakteriofag + ekspresi yang diinduksi IPTG + deteksi ELISA terhadap klon positif. (3) Semua klon positif dipilih untuk sekuensing gen.	4-5 minggu

Keunggulan Teknologi Phage Display

Alpha Lifetech memiliki pengalaman yang kaya di bidang pengembangan antibodi. Selama bertahun-tahun, Alpha Lifetech telah membangun platform pengembangan antibodi yang komprehensif.

Layanan Pendukung

Kami dapat menyediakan berbagai layanan pembuatan pustaka imun berbasis hewan dan layanan penyaringan pustaka antibodi alami sesuai dengan kebutuhan pelanggan.

Target Ganda

Tersedia berbagai layanan penemuan antibodi yang menargetkan berbagai sasaran: protein, peptida, molekul kecil, virus, protein membran, mRNA, dan lain sebagainya.

Vektor Berganda

Layanan pembuatan pustaka yang dipersonalisasi, kami dapat menyediakan berbagai vektor bakteriofag termasuk PMECS, pComb3X, dan pCANTAB 5E, dan memodifikasinya sesuai kebutuhan pelanggan.

Platform yang Matang

Kapasitas penyimpanan dapat mencapai 10^8-10^9, tingkat penyisipan semuanya di atas 90%, dan afinitas antibodi yang diperoleh melalui penyaringan umumnya berada pada tingkat nM pM.

Layanan terkait

Berbagai Strategi Pengembangan Antibodi

Layanan Pengembangan Antibodi Monoklonal

Platform Teknologi Hibrida

Platform Pemilahan Sel B Tunggal

Platform Pengembangan Antibodi Phage Display

Pengembangan antibodi monoklonal - Alpha Lifetech

Layanan Pengembangan Antibodi Monoklonal

Kami dapat menyediakan layanan pengembangan antibodi monoklonal berkualitas tinggi, kemurnian tinggi, dan sangat spesifik, termasuk produksi antibodi monoklonal tikus dan antibodi monoklonal kelinci.

Platform Teknologi Hibrida

Termasuk program imunisasi, layanan persiapan antibodi, pemurnian antibodi, pengurutan antibodi berkecepatan tinggi, validasi antibodi, dll.

Platform Pemilahan Sel B Tunggal

Alpha Lifetech memiliki keunggulan dalam hal waktu penyaringan dan perolehan antibodi berkualitas tinggi. Perusahaan ini dapat menyediakan desain, sintesis, dan modifikasi antigen, imunitas hewan, penyaringan pengayaan sel B tunggal, dan pengurutan sel tunggal.