Platform Perpustakaan Peptida Phage Display

Berdasarkan teknologi phage display, Alpha Lifetech dapat menyediakan layanan pembuatan dan penyaringan pustaka peptida phage display berkualitas tinggi kepada pelanggan, termasuk pustaka peptida linear 7, pustaka peptida linear 9, pustaka peptida linear 10, pustaka peptida linear 15, pustaka peptida linear 12, pustaka peptida siklik 7, dan pustaka peptida lainnya. Keragaman pustaka, tingkat penyisipan, dan tingkat positif dapat mencapai lebih dari 90%, untuk memenuhi berbagai kebutuhan pelanggan akan pustaka peptida phage display.

Pustaka tampilan fage (phage display libraries) banyak digunakan dalam penelitian dan aplikasi biomedis. Misalnya, dalam rekayasa antibodi dan pengembangan antibodi, pustaka tampilan fage dapat digunakan untuk menyaring dan meningkatkan varian antibodi; dalam penyaringan obat dan penemuan target obat, pustaka tampilan fage dapat digunakan untuk mencari protein atau peptida dengan potensi obat. Dalam penelitian vaksin, pustaka tampilan fage dapat digunakan untuk seleksi antigen vaksin dan pengembangan vaksin. Selain itu, pustaka tampilan fage juga dapat digunakan di banyak bidang seperti penelitian interaksi protein, diagnosis dan pengobatan kanker.

Teknologi Tampilan Fage

Teknologi tampilan fage (phage display) adalah teknologi yang menggabungkan gen protein target dengan gen protein permukaan fage, dan membuat protein target hadir di permukaan fage dalam bentuk protein fusi melalui ekspresi gen. Protein yang ditampilkan di permukaan fage ini dapat mempertahankan struktur spasial relatif dan aktivitas biologis, serta dapat disaring, dideteksi, dan dikenali melalui interaksi dengan antibodi spesifik atau molekul lain. Objek tampilan teknologi tampilan fage meliputi antibodi, fragmen antibodi, segmen peptida, cDNA, dan lain-lain.

Sistem teknologi tampilan fage terutama mencakup sistem tampilan fage M13 (seperti sistem tampilan PⅢ, sistem tampilan PⅧ, dll.), sistem tampilan fage λ, sistem tampilan fage T4, sistem tampilan fage T7, dll. Masing-masing sistem ini memiliki karakteristiknya sendiri dan sesuai untuk kebutuhan penelitian yang berbeda. Fage M13, karena sifat lisogeniknya, fage M13 tidak melisis sel inang setelah menginfeksinya, yang memungkinkannya untuk terus bereplikasi dan mengekspresikan fragmen asing di dalam sel inang, cocok untuk penyaringan jangka panjang dan ekspresi stabil. Karena siklus hidupnya yang pendek dan efisiensi replikasi yang tinggi, fage T7 dapat dengan cepat menghasilkan sejumlah besar fage keturunan, yang cocok untuk penyaringan berkecepatan tinggi dan ekspresi cepat.

	Fag M13	Fag T7
1. Struktur Morfologi	Fag filamen	Fag polihedral
2. Materi Genetik	Molekul DNA untai tunggal melingkar	DNA linier, beruntai ganda, dan berlebih di bagian ujungnya.
3. Replikasi dan Infeksi	Fag lisogenik, yang dirakit di periplasma, dapat dikeluarkan dari membran bakteri tanpa melisiskan sel inang.	Fag virulen, yang merupakan keturunan fag yang dirakit di sitoplasma bakteri, dilepaskan melalui lisis membran sel.
4. Sistem Tampilan	Suatu sistem tampilan dibangun menggunakan protein kapsid pIII dan PVIII, yang cocok untuk menampilkan peptida/protein asing dengan ukuran yang berbeda.	Sistem tampilan ini dibangun dengan protein kapsid 10B, yang tidak memerlukan proses sekresi dan cocok untuk menampilkan peptida/protein yang memiliki efek penghambat pada proses sekresi.
5. Keunggulan Aplikasi	Metode ini cocok untuk menampilkan dan memantau peptida molekul kecil dalam jangka panjang.	Metode ini memiliki keunggulan dalam ekspresi cepat dan penyaringan protein makromolekuler dengan kapasitas tinggi.

Jenis-jenis Pustaka Peptida Phage Display

Alpha Lifetech berpengalaman dalam pembuatan dan penyaringan pustaka peptida tampilan fage dan memiliki berbagai jenis pustaka peptida untuk dipilih. Berdasarkan panjang peptida, dapat dibagi menjadi pustaka 7 peptida, pustaka 9 peptida, pustaka 10 peptida, pustaka 12 peptida, dan pustaka 15 peptida. Berdasarkan konformasi spasial polipeptida, dapat dibagi menjadi pustaka peptida fage linier dan pustaka peptida fage siklik.

Pustaka peptida fage linier

Gen peptida dimasukkan ke dalam daerah pengkodean protein selubung genom fage, biasanya pIII atau PVIII, dan ditampilkan sebagai rantai lurus linier. Peptida rantai linier dapat mudah terdegradasi secara in vivo, dan kemampuan pengikatan serta stabilitasnya dapat terpengaruh.

perpustakaan peptida fage siklik

Peptida cincin yang dimodifikasi akan membentuk konformasi tetap di bawah pengaruh ikatan disulfida atau ikatan pengikat lainnya, yang tidak hanya akan sangat meningkatkan stabilitas metabolisme dan bioavailabilitas, tetapi juga lebih memenuhi persyaratan pengikatan konformasi reseptor-ligan (antibodi-antigen).

Proses Perpustakaan Peptida Phage Display

Seleksi fag

Fag tipe M13 atau fag tipe T7 biasanya dipilih sebagai pembawa.

Konstruksi Perpustakaan Peptida Tampilan Fage

Membangun vektor fage yang mampu mengandung sekuens pengkodean protein atau polipeptida asing, yang biasanya mencakup promotor, penanda selektif, dan elemen pengatur yang sesuai. Penyisipan sekuens pengkodean protein atau peptida asing ke dalam pembawa fage, biasanya dengan metode pemotongan enzim restriksi dan ligasi. Vektor fage yang telah dibangun ditransformasikan ke dalam sel inang, memungkinkan fage untuk bereplikasi dan mengekspresikan protein atau peptida asing di dalam sel. Pustaka fage yang mengandung berbagai protein atau peptida asing yang berbeda disiapkan melalui transformasi dan amplifikasi yang ekstensif.

Penyaringan pustaka peptida tampilan fage

Fiksasi molekul target (seperti protein, reseptor, atau antibodi) pada pembawa fase padat. Inkubasi pustaka peptida tampilan fage yang telah dibuat dengan target tetap untuk memungkinkan peptida pada fage berikatan dengan molekul target. Selama proses ini, bakteriofag yang tidak terikat dihilangkan dengan pencucian sambil mempertahankan bakteriofag yang berikatan dengan target, dan bakteriofag yang terikat dengan afinitas tinggi dieluasi. Bakteriofag yang diperoleh diperbanyak dengan menginfeksi Escherichia coli dan kemudian menjalani putaran penyaringan berikutnya. Biasanya dibutuhkan 3-5 putaran penyaringan untuk mendapatkan peptida dengan efisiensi pengikatan yang tinggi.

Desain dan sintesis peptida

Mensintesis peptida berdasarkan situs penyaringan.

Gambar 1. Proses pembuatan dan penyaringan pustaka peptida tampilan fage.

Platform Terkait

Alpha Lifetech dapat menyediakan layanan pembuatan dan penyaringan pustaka peptida phage display berkualitas tinggi kepada pelanggan.

perpustakaan antibodi tampilan fage - Alpha Lifetech

Platform Konstruksi Perpustakaan Peptida Phage Display

Alpha Lifetech memiliki sejumlah teknologi pembuatan pustaka peptida. Kami terutama menyediakan layanan pembuatan pustaka peptida T7 dan layanan pembuatan pustaka peptida M13 sesuai dengan tipe fage.

BACA SELENGKAPNYA

Penyaringan tampilan fage - Alpha Lifetech

Platform Penyaringan Pustaka Peptida Phage Display

Alpha Lifetech memiliki pengalaman yang kaya dalam penyaringan pustaka fage peptida, memberikan dukungan teknis yang kuat untuk penemuan obat molekul kecil, diagnosis klinis, pengobatan penyakit, dan penelitian biologi.

BACA SELENGKAPNYA