Sistem Tampilan Fag
Alpha Lifetech telah terlibat secara mendalam dalam teknologi tampilan fag selama bertahun-tahun. Alpha Lifetech telah membangun platform teknologi tampilan fag yang stabil dan sempurna yang menghemat waktu untuk penelitian ilmiah atau penelitian proyek dan memfasilitasi produksi selanjutnya. Kami memiliki beberapa sistem tampilan fag yang tersedia bagi pelanggan untuk dipilih, termasuk sistem tampilan fag M13, fag T7, fag T4, dan fag λ. Bergantung pada kebutuhan eksperimen Anda, Anda dapat memilih sistem tampilan fag yang sesuai. Alpha Lifetech juga dapat menyediakan layanan kepada pelanggan seperti produksi antibodi vhh, produksi antibodi scfv, dan produksi antibodi Fab.
Pengantar tampilan Fage
Teknologi tampilan fag adalah teknik yang menggunakan fag (virus yang menginfeksi bakteri) untuk mencari molekul pengikat fungsional protein atau peptida tertentu. Teknik konstruksi pustaka antibodi fag meliputi konstruksi pustaka antibodi antibodi Fab, konstruksi pustaka antibodi scFv, konstruksi pustaka antibodi vhh, dll. Menurut jenis bakteriofag, mereka dapat dibagi menjadi bakteriofag m13, bakteriofag T7, bakteriofag T4, bakteriofag λ, dan bakteriofag lainnya. Menurut jenis pustaka, dapat dibagi menjadi pustaka peptida acak, pustaka cDNA, pustaka antibodi, dan pustaka protein. Teknologi tampilan fag mudah dioperasikan dan murah untuk digunakan yang berisi tampilan fag Fab, tampilan fag scfv, tampilan fag vhh. Namun, teknik ini membatasi keragaman genetika molekuler di pustaka yang tidak dapat mengekspresikan urutan yang terlalu panjang.
Teknologi tampilan fag mampu membentuk hubungan fisik antara molekul yang ditampilkan dan urutan DNA yang mengkode molekul yang ditampilkan, dan urutan asam amino dari konjugat tertentu dapat ditentukan seketika melalui pengurutan DNA dari fragmen yang diinginkan dalam genom fag.
Saat ini, teknologi tampilan fag digunakan secara luas. Di antaranya, terdapat pencapaian signifikan dalam penelitian dan pengembangan vaksin baru (vaksin sintetis berbiaya rendah dan efisien), pengembangan obat antibodi (penghambat enzim penyaringan), transduksi sinyal sel (penyaringan epitop yang disimulasikan), dan penelitian epitop antigen (persiapan antibodi monoklonal).
Prinsip tampilan fag
Tampilan fag merupakan teknologi molekuler yang didasarkan pada modifikasi genetik DNA fag, yang mengikat fragmen target ke protein lapisan fag dan dengan demikian mengekspresikannya pada permukaan fag. Urutan DNA asing dimasukkan ke lokasi tertentu dalam urutan nukleotida genom fag yang mengkode protein lapisan fag (Gbr. 1).
Ketika infeksi fag terjadi, gen fag mulai diekspresikan dalam inang bakteri, dan fragmen target yang dimasukkan ditampilkan pada permukaan fag sebagai kombinasi gen terkait yang mengkode protein mantel dan urutan kloning.

Gbr. 1 Arsitektur virion Bakteriofag M13 dan prinsip teknologi tampilan fag.(Sumber referensi:Tampilan fag dan teknologi tampilan peptida lainnya | Ulasan Mikrobiologi FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Sistem tampilan fag
Fag berfilamen merupakan sistem tampilan fag yang paling umum digunakan, dan sistem tampilan fag dapat dibangun menggunakan fag lain. Sistem tersebut dapat menampilkan peptida yang relatif besar atau menyaring pustaka cDNA secara lebih efisien daripada sistem berbasis fag berfilamen.

Gbr. 2 Jenis bakteriofag yang digunakan dalam tampilan fag.(Sumber referensi:Tampilan fag dan teknologi tampilan peptida lainnya | Ulasan Mikrobiologi FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Keuntungan sistem tampilan Phage
Sistem tampilan fag biasanya menggunakan fag berfilamen, termasuk M13, fd, dan f1. Dibandingkan dengan fag M13, fag bakteriofag T7 tersusun dari DNA untai ganda, yang menunjukkan stabilitas lebih baik dan kurang rentan terhadap mutasi selama replikasi. Fag T7, sebagai pembawa, tumbuh cepat dan dapat membentuk plak dalam waktu 3 jam, yang menghemat banyak waktu untuk kloning dan penyaringan.
Konstruksi pustaka fag T7 telah digunakan untuk ekspresi gen permukaan dan non-permukaan serta untuk membangun pustaka tampilan peptida, cDNA, DNA genomik, dan antibodi. Hal ini memungkinkan fag T7 digunakan tidak hanya sebagai agen antimikroba, tetapi juga untuk skrining target obat dalam skrining target organ (seperti otak, hati, dan paru-paru), skrining target pengenalan antibodi, penelitian mekanisme fisiologis, dll. Fag T7 juga dapat digunakan untuk diagnosis dan pengobatan berbagai penyakit.
Bentuk lain dari bakteriofag
Fage yang bersifat infeksius selektif
Berbeda dengan tampilan fag tradisional, fag infektif selektif (SIP) menghubungkan interaksi protein-ligan produksi secara langsung ke infeksi dan perluasan fag tanpa memerlukan langkah elusi.

Gbr.3 Fage infektif selektif (SIP).(Sumber referensi:Tampilan fag dan teknologi tampilan peptida lainnya | Ulasan Mikrobiologi FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Fage lanskap
Fag lanskap disebabkan oleh ribuan salinan peptida asing yang tersusun di sekitar kapsid tubular dalam pola berulang yang sangat rapat, dan tampilan polivalen pada fag lanskap mendorong seleksi afinitas tinggi, sehingga mustahil untuk membedakan antara ligan peptida afinitas tinggi dan rendah.

Gambar 4. Konsep fage lanskap. (Sumber referensi:Tampilan fag dan teknologi tampilan peptida lainnya | Ulasan Mikrobiologi FEMS | Oxford Academic (oup.com))


Sistem tampilan fag ganda
Sistem tampilan fag M13, fag T7, fag T4, dan fag λ untuk dipilih pelanggan.


Kemampuan penyaringan throughput tinggi
Kita dapat menggunakan sistem tampilan fag untuk dengan cepat membangun perpustakaan fag dalam skala besar, dan mencapai eksperimen penyaringan berthroughput tinggi.


Layanan tampilan fag yang disesuaikan
Pelanggan dapat menyesuaikan layanan komprehensif menurut persyaratan proyek, seperti penyaringan antibodi afinitas tinggi, dll.


Rentang aplikasi yang luas
Diterapkan dalam bidang seperti rekayasa antibodi, rekayasa peptida dan protein, penemuan dan pengembangan obat, penelitian interaksi protein, dll.
Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami kapan saja.
Leave Your Message
01tanggal 02