Sistem Tampilan Fage
Alpha Lifetech telah membangun sistem Phage display yang stabil dan sempurna yang menghemat waktu untuk penelitian ilmiah atau penelitian proyek dan memfasilitasi produksi selanjutnya.
HUBUNGI KAMI01
Sistem Tampilan Fage
Alpha Lifetech telah lama berkecimpung dalam teknologi Phage Display. Alpha Lifetech telah membangun platform teknologi Phage Display yang stabil dan sempurna yang menghemat waktu penelitian ilmiah atau penelitian proyek dan memfasilitasi produksi selanjutnya. Kami memiliki beberapa sistem Phage Display yang tersedia untuk dipilih pelanggan, termasuk sistem Phage M13, Phage T7, Phage T4, dan Phage λ. Tergantung pada kebutuhan eksperimen Anda, Anda dapat memilih sistem Phage Display yang sesuai. Alpha Lifetech juga dapat menyediakan layanan kepada pelanggan seperti produksi antibodi VHH, produksi antibodi SCFV, dan produksi antibodi Fab.
Pengantar tentang tampilan fage
Teknologi tampilan fage (phage display) adalah teknik yang menggunakan fage (virus yang menginfeksi bakteri) untuk mencari molekul pengikat fungsional dari protein atau peptida spesifik. Teknik pembuatan pustaka antibodi fage meliputi pembuatan pustaka antibodi Fab, pembuatan pustaka antibodi scFv, pembuatan pustaka antibodi vhh, dan lain-lain. Menurut jenis bakteriofage, dapat dibagi menjadi bakteriofage m13, bakteriofage T7, bakteriofage T4, bakteriofage λ, dan bakteriofage lainnya. Menurut jenis pustaka, dapat dibagi menjadi pustaka peptida acak, pustaka cDNA, pustaka antibodi, dan pustaka protein. Teknologi tampilan fage mudah dioperasikan dan murah untuk digunakan, meliputi tampilan fage Fab, tampilan fage scfv, dan tampilan fage vhh. Namun, teknik ini membatasi keragaman genetika molekuler dalam pustaka karena tidak dapat mengekspresikan sekuens yang terlalu panjang.
Teknologi tampilan fage mampu membentuk hubungan fisik antara molekul yang ditampilkan dan sekuens DNA yang mengkode molekul yang ditampilkan, dan sekuens asam amino dari konjugat spesifik dapat ditentukan secara instan melalui pengurutan DNA dari fragmen yang diinginkan dalam genom fage.
Saat ini, teknologi phage display banyak digunakan. Di antaranya, terdapat pencapaian signifikan dalam penelitian dan pengembangan vaksin baru (vaksin sintetis berbiaya rendah dan efisien), pengembangan obat antibodi (penyaringan penghambat enzim), transduksi sinyal sel (penyaringan epitop simulasi), dan penelitian epitop antigen (pembuatan antibodi monoklonal).
Prinsip tampilan fage
Phage display adalah teknologi molekuler yang didasarkan pada modifikasi genetik DNA fage, yang mengikat fragmen target ke protein selubung fage dan dengan demikian mengekspresikannya pada permukaan fage. Urutan DNA asing dimasukkan ke lokasi spesifik dalam urutan nukleotida genom fage yang mengkode protein selubung fage (Gambar 1).
Ketika infeksi fage terjadi, gen fage mulai diekspresikan di dalam inang bakteri, dan fragmen target yang disisipkan ditampilkan pada permukaan fage sebagai kombinasi dari gen terkait yang mengkode protein selubung dan sekuens yang dikloning.
Gambar 1. Arsitektur virion bakteriofag M13 dan prinsip teknologi tampilan fage.(Sumber referensi: Teknologi tampilan fage dan tampilan peptida lainnya | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistem tampilan fage
Fag filamen adalah sistem tampilan fag yang paling umum digunakan, dan sistem tampilan fag dapat dibangun menggunakan fag lain. Sistem seperti itu dapat menampilkan peptida yang relatif besar atau menyaring pustaka cDNA dengan lebih efisien daripada sistem berbasis fag filamen.
Gambar 2. Jenis-jenis bakteriofag yang digunakan dalam tampilan fag.(Sumber referensi: Teknologi tampilan fage dan tampilan peptida lainnya | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Keunggulan sistem tampilan fage
Sistem tampilan fage biasanya menggunakan fage filamen, termasuk M13, fd, dan f1. Dibandingkan dengan fage M13, fage bakteriofage T7 tersusun dari DNA untai ganda, yang menunjukkan stabilitas lebih besar dan kurang rentan terhadap mutasi selama replikasi. Fage T7, sebagai pembawa, tumbuh dengan cepat dan dapat membentuk plak dalam waktu 3 jam, yang menghemat banyak waktu untuk kloning dan penyaringan.
Konstruksi pustaka fage T7 telah digunakan untuk ekspresi gen permukaan dan non-permukaan serta untuk membangun pustaka tampilan peptida, cDNA, DNA genomik, dan antibodi. Hal ini memungkinkan fage T7 digunakan tidak hanya sebagai agen antimikroba, tetapi juga untuk skrining target obat dalam skrining target organ (seperti otak, hati, dan paru-paru), skrining target pengenalan antibodi, penelitian mekanisme fisiologis, dll. Fage T7 juga dapat digunakan untuk diagnosis dan pengobatan berbagai penyakit.
Bentuk-bentuk bakteriofag lainnya
Fag yang menginfeksi secara selektif
Berbeda dengan metode phage display tradisional, selective infective phage (SIP) menghubungkan interaksi protein-ligand produksi secara langsung dengan infeksi dan ekspansi fage tanpa memerlukan langkah elusi.
Gambar 3. Fag yang menginfeksi secara selektif (SIP).(Sumber referensi: Teknologi tampilan fage dan tampilan peptida lainnya | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Fag lanskap
Fag lanskap disebabkan oleh ribuan salinan peptida asing yang tersusun di sekitar kapsid tubular dalam pola berulang yang sangat rapat, dan tampilan polivalen pada fag lanskap mendorong seleksi afinitas tinggi, sehingga tidak mungkin untuk membedakan antara afinitas tinggi dan rendah dari ligan peptida.
Gambar 4. Gagasan tentang fag lanskap. (Sumber referensi: Teknologi tampilan fage dan tampilan peptida lainnya | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistem tampilan fage ganda
Sistem tampilan fage M13, fage T7, fage T4, dan fage λ tersedia untuk dipilih pelanggan.
Kemampuan penyaringan dengan kapasitas tinggi.
Kita dapat menggunakan sistem tampilan fage untuk dengan cepat membangun pustaka fage berskala besar, dan mencapai eksperimen penyaringan berthroughput tinggi.
Layanan tampilan fage yang disesuaikan
Pelanggan dapat menyesuaikan layanan komprehensif sesuai dengan kebutuhan proyek, seperti penyaringan antibodi afinitas tinggi, dan lain sebagainya.
Rentang aplikasi yang luas
Diterapkan dalam berbagai bidang seperti rekayasa antibodi, rekayasa peptida dan protein, penemuan dan pengembangan obat, penelitian interaksi protein, dan lain sebagainya.
Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami kapan saja.
Leave Your Message
16 Juli 2018 
0102