Layanan Penemuan Antibodi scFv

Alpha Lifetech Inc.dengan bangga menawarkan layanan konstruksi pustaka scFv yang komprehensif untuk memenuhi berbagai kebutuhan ilmuwan global. Tujuan kami adalah untuk memahami dan memenuhi permintaan berbagai pelanggan dan membantu mengatasi masalah yang akan datang dan muncul dalam pekerjaan penelitian.

Apa itu scFv- Single Chain Variable Fragment Antibody?

Antibodi rantai tunggal terdiri dari fragmen variabel ringan (VL) dan berat (VH) antibodi yang disatukan oleh penghubung peptida fleksibel, yang dapat dengan mudah diekspresikan dalam bentuk fungsional pada permukaan fag dan oleh karena itu umumnya dikenal sebagai fragmen variabel rantai tunggal (scFv). Fragmen scFv adalah unit terkecil dari molekul imunoglobulin (kecuali nanobodi) dengan fungsi dalam aktivitas pengikatan antigen dan memungkinkan rekayasa protein untuk meningkatkan sifat scFv (variabel fragmen rantai tunggal) seperti peningkatan afinitas dan perubahan spesifisitas. Di Alpha Lifetech Inc., antibodi scFv telah dibangun terutama dari hibridoma, sel limpa dari tikus yang diimunisasi, dan limfosit B dari manusia. Total RNA atau mRNA pertama-tama diisolasi dari hibridoma, limpa, sel getah bening, dan sel sumsum tulang diikuti dengan transkripsi balik menjadi cDNA untuk berfungsi sebagai cetakan untuk amplifikasi gen antibodi (PCR).

Pengembangan Antibodi scFv-Teknologi Tampilan Fag

Keragaman pustaka ditentukan oleh jumlah klon independen. Untuk menghasilkan pustaka antibodi scFv berukuran besar, ilmuwan kami akan memanfaatkan strategi dua langkah milik kami untuk pembuatan pustaka. Pada langkah pertama dari prosedur yang dijelaskan, repertoar primer disiapkan dari produk PCR yang mengode domain VH, Vκ, dan Vλ, menghasilkan pustaka berukuran sedang yang umum (1 - 100 juta klon). Pada langkah kedua, fragmen VH (atau VL) diisolasi dengan pencernaan DNA plasmid yang dimurnikan dari repertoar primer dan dikloning ke dalam vektor fagemid akseptor yang berisi repertoar VL (atau VH). Inovasi ini meningkatkan ukuran pustaka secara dramatis (1010-1012 klon).

Pemindaian Antibodi scFv dalam skala besar dan hasil tinggi

Untuk persiapan scFv skala besar, jelas bahwa pilihan host ekspresi akan berdampak signifikan pada desain proses, strategi pemrosesan hilir, dan biaya proses. Pilihan rute produksi akan bergantung pada relevansi modifikasi pascatranslasi dan jangka waktu untuk pengembangan klinis dan ekonomi, yang pada dasarnya juga bergantung pada 'sistem host'. Tidak ada sistem ekspresi universal yang memastikan tingkat ekspresi produk yang tinggi untuk berbagai macam antibodi atau bahkan protein.