Pengantar Perpustakaan Antibodi Sintesis

Pustaka antibodi yang disintesis, juga dikenal sebagai pustaka De novo, adalah metode sintetis yang memanfaatkan teknik seperti sintesis DNA atau tampilan fag untuk merancang dan mensintesis wilayah variabel antibodi lengkap, termasuk wilayah kerangka kerja dan CDR, tanpa bergantung pada pustaka antibodi naif.

Pustaka antibodi semi-sintetik dibuat dengan menggabungkan pustaka antibodi yang terjadi secara alami dengan keragaman sintetis. Biasanya melibatkan sintesis oligonukleotida DNA untuk menghasilkan serangkaian daerah penentu komplementer (CDR) yang berbeda, yang kemudian digabungkan dengan kerangka antibodi konstan yang berasal dari sumber alami seperti sel B manusia atau hewan. CDR yang disintesis memperkenalkan keragaman ke dalam pustaka, menghasilkan antibodi yang menargetkan berbagai epitop. Pustaka antibodi semi-sintetik memberikan kompromi antara keragaman alami sistem imun dan keragaman terkendali yang dicapai melalui metode sintetis.

Perbedaan antara pustaka antibodi naif dan sintetis bergantung pada sumber gen imunoglobulin. Sementara itu, perbedaan antara pustaka antibodi semi-sintesis dan sintetis terletak pada kenyataan bahwa pustaka antibodi naif terdiri dari sebagian segmen antibodi naif, seperti rantai ringan atau rantai berat, dan hanya satu di antaranya yang disintesis secara in vitro; sedangkan pustaka antibodi sintetis sepenuhnya berasal dari sintesis buatan melalui PCR secara in vitro.

Alpha Lifetech dapat menyediakan

Alpha Lifetech Inc.dapat menawarkan pustaka antibodi semi-sintesis/sintesis dari hewan dan manusia berdasarkan platform penemuan antibodi profesional kami. Dengan pengalaman bertahun-tahun dalam modifikasi genetik dan konstruksi pustaka, pustaka yang disintesis dapat dibangun yang mampu menghasilkan antibodi sintetis dengan afinitas dan spesifisitas di luar kapasitas antibodi alami.Alpha Lifetech adalahPara ahli dengan bangga mengumumkan bahwa kami dapat menjamin tingkat keberhasilan yang tinggi dalam pembangunan perpustakaan antibodi yang berisi 10^8 – 10^10 klon independen.

Alpha Lifetech Inc.dengan bangga menawarkan layanan pembuatan pustaka antibodi yang komprehensif untuk memenuhi berbagai kebutuhan peneliti global, termasuk antibodi scFv, Fab, VHH, dan pustaka yang disesuaikan. Tujuan kami adalah untuk memahami dan memenuhi permintaan berbagai pelanggan dan membantu mengatasi masalah yang akan datang dan muncul dalam pekerjaan penelitian.

Proses Layanan Konstruksi Perpustakaan Antibodi Sintesis

Desain
Tahap desain melibatkan pemilihan kerangka antibodi dan daerah penentu komplementaritas (CDR) berdasarkan urutan antibodi atau data struktural yang ada. Antibodi CDR sintetis juga dapat dirancang untuk memperkenalkan fungsi tertentu atau meningkatkan sifat pengikatan.

Sintesis
DNA sintetis yang mengkodekan urutan antibodi yang dirancang, termasuk wilayah kerangka dan CDR, disintesis menggunakan metode kimia atau enzimatik.

Perakitan
Fragmen DNA yang disintesis dirakit menjadi vektor ekspresi antibodi menggunakan teknik seperti PCR, ligasi, atau perakitan Gibson. Vektor ini kemudian dapat dimasukkan ke dalam sistem ekspresi seperti sel bakteri, ragi, atau mamalia untuk produksi antibodi.

Penyaringan dan Seleksi
Pustaka antibodi yang dibangun disaring dan dipilih untuk antibodi dengan sifat yang diinginkan menggunakan metode penyaringan berthroughput tinggi. Ini dapat melibatkan teknik seperti tampilan fag, tampilan ragi, atau tampilan ribosom, tergantung pada format dan aplikasi pustaka.

Layanan Konstruksi Perpustakaan Antibodi Sintesis

Alpha Lifetech Inc.menyediakan pelanggan dengan desain terpadu dan layanan sintesis pustaka antibodi dengan menggabungkan repertoar gen V rantai berat dan ringan ke dalam vektor fag menggunakan sistem rekombinasi spesifik lokasi Cre-lox untuk membuat repertoar Fab yang ditampilkan pada fag yang terdiri dari 6,5 × 10^10 klon. Pustaka tersebut menghasilkan Ab terhadap banyak antigen, beberapa dengan afinitas nanomolar. Pembuatan pustaka antibodi manusia didasarkan pada teknologi tampilan fag M13 (ditunjukkan pada gambar di bawah).