Pengantar Pustaka Antibodi Sintesis

Pustaka antibodi sintetis, juga dikenal sebagai pustaka De novo, adalah metode sintetik yang menggunakan teknik seperti sintesis DNA atau tampilan fage untuk mendesain dan mensintesis daerah variabel antibodi lengkap, termasuk daerah kerangka dan CDR, tanpa bergantung pada pustaka antibodi naif.

Pustaka antibodi semi-sintetik dibuat dengan menggabungkan pustaka antibodi alami dengan keragaman sintetik. Proses ini biasanya melibatkan sintesis oligonukleotida DNA untuk menghasilkan serangkaian daerah penentu komplemen (CDR) yang berbeda, yang kemudian dikombinasikan dengan kerangka antibodi konstan yang berasal dari sumber alami seperti sel B manusia atau hewan. CDR yang disintesis memperkenalkan keragaman ke dalam pustaka, menghasilkan antibodi yang menargetkan berbagai macam epitop. Pustaka antibodi semi-sintetik memberikan kompromi antara keragaman alami sistem kekebalan tubuh dan keragaman terkontrol yang dicapai melalui metode sintetik.

Perbedaan antara pustaka antibodi naif dan sintetik bergantung pada sumber gen imunoglobulin. Sementara itu, perbedaan antara pustaka antibodi semi-sintesis dan sintetik terletak pada fakta bahwa pustaka antibodi semi-sintesis terdiri dari sebagian segmen antibodi naif, seperti rantai ringan atau rantai berat, dan hanya salah satunya yang disintesis secara in vitro; sedangkan pustaka antibodi sintetik sepenuhnya berasal dari sintesis buatan melalui PCR secara in vitro.

Alpha Lifetech dapat menyediakan

Alpha Lifetech Inc.Kami dapat menawarkan pustaka antibodi semi-sintesis/sintesis dari hewan dan manusia berdasarkan platform penemuan antibodi profesional kami. Dengan pengalaman bertahun-tahun dalam modifikasi genetik dan konstruksi pustaka, pustaka sintetis dapat dibangun yang mampu menghasilkan antibodi sintetis dengan afinitas dan spesifisitas yang melampaui kemampuan antibodi alami.Alpha LifetechPara ahli dengan bangga mengumumkan bahwa kami dapat menjamin tingkat keberhasilan yang tinggi dalam pembuatan pustaka antibodi yang berisi 10^8 – 10^10 klon independen.

Alpha Lifetech Inc.dengan bangga menawarkan layanan pembuatan pustaka antibodi komprehensif untuk memenuhi beragam kebutuhan peneliti global, termasuk antibodi scFv, Fab, VHH, dan pustaka yang disesuaikan. Tujuan kami adalah untuk memahami dan memenuhi tuntutan pelanggan yang berbeda serta membantu mengatasi masalah yang akan datang dan muncul dalam pekerjaan penelitian.

Proses Layanan Konstruksi Pustaka Antibodi Sintesis

Desain
Fase desain melibatkan pemilihan kerangka antibodi dan daerah penentu komplemen (CDR) berdasarkan sekuens antibodi yang ada atau data struktural. Antibodi CDR sintetis juga dapat dirancang untuk memperkenalkan fungsionalitas spesifik atau meningkatkan sifat pengikatan.

Sintesis
DNA sintetis yang mengkodekan sekuens antibodi yang dirancang, termasuk daerah kerangka dan CDR, disintesis menggunakan metode kimia atau enzimatik.

Perakitan
Fragmen DNA yang disintesis kemudian dirakit menjadi vektor ekspresi antibodi menggunakan teknik seperti PCR, ligasi, atau perakitan Gibson. Vektor-vektor ini kemudian dapat dimasukkan ke dalam sistem ekspresi seperti sel bakteri, ragi, atau sel mamalia untuk produksi antibodi.

Penyaringan dan Seleksi
Pustaka antibodi yang telah dibuat disaring dan dipilih antibodi dengan sifat yang diinginkan menggunakan metode penyaringan berkecepatan tinggi. Hal ini dapat melibatkan teknik seperti tampilan fage, tampilan ragi, atau tampilan ribosom, tergantung pada format pustaka dan aplikasinya.

Layanan Konstruksi Pustaka Antibodi Sintesis

Alpha Lifetech Inc.menyediakan layanan desain dan sintesis terpadu untuk pustaka antibodi dengan menggabungkan repertoar gen V rantai berat dan ringan ke dalam vektor fage menggunakan sistem rekombinasi spesifik situs Cre-lox untuk menciptakan repertoar Fab yang ditampilkan pada fage yang terdiri dari 6,5 × 10^10 klon. Pustaka tersebut menghasilkan antibodi terhadap berbagai antigen, beberapa di antaranya memiliki afinitas nanomolar. Pembuatan pustaka antibodi manusia didasarkan pada teknologi tampilan fage M13 (ditunjukkan pada gambar di bawah).