Þroskaþjónusta fyrir mótefnafræðilega sækni

Alpha Lifetech Inc.Við getum boðið upp á þjónustu við þroska mótefna með því að nota stökkbreytingar- og valtækni. Við notum venjulega scFv sem mótefnaform í þroskaferlum fyrir sækni og eingildan fagemíð-sýningarkerfi sem hefur verið notað til að draga úr áhrifum á sækni við skimun fyrir mótefnavakabindingu. Fagfólk okkar getur einnig veitt þroskaþjónustu fyrir mótefni með einu léni.

Alpha Lifetech Inc.er stolt af því að bjóða upp á alhliða þjónustu til að mæta fjölbreyttum þörfum viðskiptavina um allan heim. Markmið okkar er að skilja og mæta kröfum ólíkra viðskiptavina og aðstoða við öll væntanleg og upprennandi vandamál í rannsóknarvinnu.

Hvað er skyldleikaþroski?

Sækniþroski er ferlið þar sem mótefni gangast undir endurteknar stökkbreytingar og val til að auka sækni sína í ákveðin mótefnavaka. B-frumur, sem aðallega koma fyrir í kímstöð annars stigs eitla, gangast undir líkamsfrumustökkbreytingar og val undir áhrifum T-frumna og follikular dendritískra frumna.
Í þroskaferlinu virkjast B-frumur með yfirborðs ónæmisglóbúlínviðtaka með lága sækni vegna mótefnavaka og gangast undir fjölgun og sérhæfingu. Með sækniþroska vegna líkamsvaka með ofurstökkbreytingum eiga sér stað handahófskenndar núkleótíðskiptingar í breytilegu svæði ónæmisglóbúlíngena, sem leiðir til myndunar ýmissa mótefnaafbrigða. Eftir líkamsvaka með ofurstökkbreytingum er mótefnavakadrifið val framkvæmt á B-frumum með stökkbreyttum ónæmisglóbúlínviðtökum. B-frumur sem framleiða mótefni með aukinni mótefnavaka-sækni eru helst haldnar og leyft að fjölga sér, en B-frumur með minnkaða eða óbreytta sækni gangast undir frumudauða. Þetta endurtekna ferli stökkbreytinga og vals leiðir til myndunar B-frumuklóna, sem framleiða mótefni með smám saman meiri sækni í mótefnavakann.

Þroskaþjónusta fyrir mótefnafræðilega sækni

Helstu kostir PCR-byggðra aðferða eru að stökkbreytingar eru nákvæmlega miðaðar á magnaða brotið; villutíðnin er auðveld í stjórnun og aðferðin er fljótleg og auðveld í uppsetningu og notar ekki hættuleg efni. Það er vel þekkt að Taq DNA pólýmerasinn afritar DNA með litlum nákvæmni, aðallega vegna skorts á 3' til 5' prófarkalestri.Alpha LifetechMótefnaverkfræðipallur notar villuhætta PCR aðferð til að stökkbreyta aðallega CDR svæðum við smíði undirsafns. Og oft búum við til stökkbreytingar á algjörlega handahófskenndum stöðum yfir öll VH og VL brotin, til að auka erfðafræðilegan fjölbreytileika undirsafnsins. Eftir smíði stökkbreytts mótefnagensafns með villuhætta PCR, er val á afbrigðum með mikilli sækni (sækni scFv mótefnanna getur náð 10^8 - 10^10 M) annað hvort framkvæmt með pönnun í lausn eða á kyrrstæðum mótefnavaka með þvottaaðstæðum sem eru fínstilltar fyrir val utan hraða.
  
Vísindamenn íAlpha Lifetech Inc.Notið stökkbreytingarstofna Escherichia coli, mutAD5TM, sem eina af nokkrum stökkbreytingaraðferðum til að kynna handahófskenndar stökkbreytingar og þar með breyta sækni og tjáningu endurröðuðu mótefnabrota. Hægt er að breyta valskilyrðum fyrir mótefnabrot með aukinni framleiðslu. Vaxtarskilyrði í stökkbreytingarfrumum Escherichia coli geta verið aðlöguð til að kynna eina handahófskennda punktbreytingu á hvern kílóbasa af DNA, sem jafngildir næstum einni kóðabreytingu á hvert scFv-brot. Eftir nokkrar lotur af stökkbreytingum, birtingu og vali getum við bætt sæknifasta úr 10^5 - 10^6 M í 10^8 - 10^10 M.

Bæta aðferðir til að þroskast skyldleika

Hægt er að slembiraða ákveðnum stöðum mótefna með skilgreindum fjölbreytileika (eins og fullri slembiraðun með öllum 20 amínósýrunum eða hlutdrægri slembiraðun með völdum amínósýrum með föstum prósentum) til að bæta sæknina. Við höfum tvær aðferðir til að bæta sækni mótefna: í fyrsta lagi eru stökkbreytingar kynntar á takmörkuðum stöðum í viðbótákvarðandi svæðum (CDR) með staðbundinni stökkbreytingu; í ​​öðru lagi eru stökkbreytingar kynntar í öll V-kóðandi svæðin með handahófskenndri stökkbreytingu. Með því að nota þessar tvær aðferðir verða varðveittar amínósýruraðir eða allt rammasvæðið í mótefninu skipt út fyrir aðrar amínósýrur, sem ásamt skönnunartækni okkar á peptíðbókasafninu gæti aukið sækni mótefna sem vekja áhuga mjög mikið.

Fögasýning - mótefnasækni

Þegar búið er að smíða stökkbreytingasafnið með scFv eru tvær skimunaraðferðir í boði: lífpönnun og flokkun á föstum mótefnavaka. Í þeirri fyrri er notaður frádráttarstyrkur hvarfefnis til að einangra mótefnið með mikla sækni, þar sem stökkbreytingarnar með litla sækni þvost út og eftir standa fagaagnir með mikla ákefð. Önnur aðferðin notar merktan mótefnavaka í lausn, val byggt á jafnvægisstuðlinum (Kd) og val byggt á bindingarhraða, þessi valaðferð greinir mótefnaafbrigði með bættri Kd.

Ef þú hefur einhverjar spurningar, vinsamlegast hafðu samband við okkur hvenær sem er.