Fögasýningartækni felst í því að setja framandi markgen inn í ákveðna stöðu fögakapsíðpróteins og tjá framandi genið á yfirborði fögans án þess að hafa áhrif á eðlilega virkni fögans. Eftir nokkrar umferðir skimunar fékkst loksins markprótein með sterka sértækni og mikla líffræðilega virkni.

Hægt er að búa til mótefnasöfn með mikilli afkastagetu með þessari tækni. Skimunarferlið er stutt, aðgerðaferlið einfalt og notkunarsviðið er víðtækt, sem gerir kleift að bera kennsl á bestu raðirnar fyrir markviss peptíð eða prótein. Í veirutengdum notkunum geta vísindamenn uppgötvað mótefni sem bindast mikilvægum veiruepitópum með því að skima stór mótefnasöfn. Þetta ferli getur hindrað innkomu, fjölgun eða ónæmisfrávik veira og þannig lagt grunn að sjúkdómsmeðferð.

Fögasýningartækni er meira notuð en blendingatækni, sem takmarkast við að framleiða lítið magn mótefna gegn tilteknum ónæmisvökum. Aftur á móti getur fagasýningartækni framleitt heilt mótefnasafn sem er unnið úr ýmsum ónæmistegundum.

Fögasýningartækni hefur fjölbreytt notkunarsvið, þar á meðal skimun á viðtökum sjúkdómsvaldandi örvera, rannsóknir á próteinvíxlverkunum, rakningu merkjasendinga milli frumna, greiningu dýrasjúkdóma og þróun bóluefna, svo eitthvað sé nefnt.

Fögasýningartækni býður upp á fjölmarga kosti og er hægt að nota hana á ýmsum sviðum. Hins vegar er helsta áskorunin við þróun endurröðunar mótefna með því að nota fagasýningaraðferðina flækjustigið og kostnaðurinn sem fylgir ferlinu. Þessi aðferð krefst samþættingar sameindalíffræðitækni, þar á meðal stökkbreytinga, klónunar og tjáningar, ásamt ónæmisfræðilegum, lífefnafræðilegum og lífeðlisfræðilegum greiningum til að bera kennsl á og lýsa æskilegum mótefnum.

Kynning mótefnavaka er mjög mikilvægur hlekkur. Aðferðir við kynningu mótefnavaka fela aðallega í sér beina húðaða kynningu mótefnavaka, óbeina húðaða kynningu mótefnavaka, kynningu mótefnavaka með skimun heilla frumna, kynningu mótefnavaka með lípósómum, nanó-fosfólípíðskífum og VLP.

Bein húðunaraðferð er tiltölulega einföld, en auðvelt er að breyta mótefnavakalöguninni og óbein húðunaraðgerð er flókin, en hún getur viðhaldið mótefnavakalöguninni og bætt framsetningarvirkni. Frumuskimun getur hermt eftir raunverulegum aðstæðum in vivo, en vandamálið er með ósértæka bindingu. Nanó-fosfólípíðdiskur er lítill, skilvirkur í afhendingu og góður stöðugleiki; VLP er sameinuð mótefnavaka eða vafið mótefnavaka, sem hefur mikla ónæmissvörun og gott öryggi og getur kallað fram sterka ónæmissvörun.

Ef styrkurinn er of lágur minnkar líkurnar á bindingu við fagann, sem leiðir til minni skimunarvirkni. Aftur á móti getur of hár styrkur aukið líkurnar á ósértækri bindingu, hækkað bakgrunnsmerkið og hindrað greiningu jákvæðra klóna.

Hægt er að nota væga festingaraðferð til að forðast háan hita, sterkar sýrur og basa. Óbein húðunaraðferð og bíótín-streptavíðín kerfið voru notuð til að draga úr skemmdum á mótefnavakabyggingu. Ef mótefnavakinn er himnuprótein er hægt að birta hann á yfirborði óskemmdra frumna eða nota hann til að herma eftir himnuumhverfi, svo sem nanódisk, til að viðhalda náttúrulegri himnupróteinbyggingu sinni.

Auk hefðbundinna tilrauna eins og ELISA, Western Blotting (WB) og Immunofluorescence (IF), er hægt að nota Surface Plasmon Resonance (SPR) og Bio-Layer Interferometry (BLI) greiningartækni til að fylgjast með bindingar- og sundrunarferlum mótefna og mótefnavaka í rauntíma, sem gerir kleift að ákvarða sækni og hvarfhraðabreytur.

Hægt er að nota fagasýningu til að mynda einstofna mótefni með mikilli sækni fyrir fjölbreytt úrval af mótefnaframleiðandi tegundum, þar á meðal en ekki takmarkað við menn, mýs, rottur, kanínur, hænur, úlfalda, alpakka, kýr, hunda, kindur, apa og hákarla.

Tæknin við smíði músamótefnabókasafna er vel þekkt, hagkvæm og hefur stutta tilraunatíma, sem gerir hana hentuga fyrir forprófanir á mótefnum og grunnrannsóknir. Kanínumótefni sýna sterka sækni og sértækni, með breiðara svið mótefnagreiningar á mótefnum samanborið við músamótefni. Hægt er að fá mannleg mótefni beint úr mótefnabókasöfnum manna og þannig forðast hugsanleg ónæmisviðbrögð sem geta komið fram þegar ólík mótefni eru gefin mannslíkamanum. Þessi aðferð hefur verulegt gildi í lyfjarannsóknum og þróun, sérstaklega við gerð meðferðarmótefna.

Ónæmisvaka dýra er almennt skipt í prótein mótefnavaka, fjölpeptíð mótefnavaka, kjarnsýru mótefnavaka og sýklatengdan mótefnavaka, þar á meðal sýklatengdan mótefnavaka eru veirumótefnavaka (heildar veiruagnir, veiruprótein, óuppbyggð veiruprótein o.s.frv.), bakteríumótefnavaka (heildar bakteríuútdráttur, frumuveggsþáttur, seytandi prótein, eiturefni o.s.frv.) og sníkjudýramótefnavaka.

Aðlaga ónæmisvaka með því að skipta út ónæmisvaka fyrir endurröðuð prótein og skipta út slökkviveiruögnum fyrir byggingarprótein veira. Aðlaga tilraunahönnunina og breyta ónæmisskammti.

Hægt er að auka ónæmissvörun með því að tengja mótefnavaka við burðarprótein, svo sem nautgripasermisalbúmín. Að auki er hægt að nota ónæmisglæði, þar á meðal Freunds-glæði og ál-glæði, til að lengja dvalartíma in vivo og örva virkjun og fjölgun ónæmisfrumna og þar með bæta ónæmissvörun.

Fögamótefnasafn er safn fjölbreyttra fögamótefna sem eru búin til með því að setja saman heilt safn breytilegra svæðisgena úr mótefnum í fögavigra og tjá þau á yfirborði föga. Þetta ferli leiðir til myndunar fögamótefnasafns.

Almennt ferli fagasýningar felur í sér nokkur lykilþrep: að draga út einkjarna blóðfrumur (PBMC) úr bólusettum dýrum, einangra heildar-RNA og umrita það í viðbótar-DNA (cDNA), magna markgenið með PCR tækni (polymerase chain reaction), klóna markgenið í faga vektor og umbreyta vektornum í hýsilfrumu til tjáningar. Þetta ferli leiðir til smíði á fagasýningarbókasafni sem getur fljótt greint mótefni með mikilli sækni. Í kjölfarið getur þetta bókasafn þjónað sem verðmæt auðlind fyrir þróun bóluefna, lyfja og greiningarefna.

Samkvæmt uppruna mótefnasafnsins má flokka fögamótefnasöfn í ónæmisfögmótefnasöfn og söfn innfæddra fögamótefna. Helsti munurinn á þessum tveimur gerðum liggur í því hvort dýrin hafa verið bólusett. Að auki er hægt að búa til innfædd mótefnasöfn með hálfmyndun eða myndun.

Tveir meginvísar eru notaðir til að meta gæði mótefnasafns: geymslurými og fjölbreytileiki. Stórt geymslurými, ásamt mikilli fjölbreytileika, tryggir skilvirka skimun mótefna með bæði mikilli sækni og sértækni.

Í líffræðilegri útskiljun er sýningarsafnið ræktað með föstum skotmörkum og síðan vandlega þvegið til að fjarlægja óvirk föga. Tengdar frumusamsetningar eru venjulega útskilnaðar með súrri eða saltríkri lausn og síðan magnaðar upp í hentugum hýsilfrumum til auðgunar. Eftir 3 til 5 umferðir af skimun fást mótefni með mikilli sækni.

Aðferðir við skimun á fögum fela aðallega í sér skimun í föstu formi, skimun í fljótandi formi og skimun á frumum. Við val á viðeigandi skimunaraðferð ætti að taka mið af eiginleikum marksameindanna, markmiðum skimunarferlisins og umhverfi rannsóknarstofunnar.

Jákvæð skimun er grundvallaraðferðin til að skima fyrir fögamótefnum sem bindast markpróteinum. Neikvæð skimun þjónar til að útiloka ósértæk mótefni. Við skimun fögamótefna geta ósértæk mótefni fundist vegna truflunar frá merkimiða markmótefnavakans, efnum eða öðrum mótefnavökum með byggingarlega líkingu við markmótefnavakann. Í slíkum tilfellum getur neikvæð skimun aukið skilvirkni skimunarferlisins.

Aðferðirnar til að staðfesta mótefni eru yfirleitt ELISA, Western Blotting (WB), flæðifrumusjárgreining, ónæmisútfelling (IP), ónæmisflúrljómun (IF), ónæmisvefjaefnafræði og ýmsar aðrar tilraunaaðferðir. Alpha Lifetech býr yfir mikilli reynslu í mótefnagreiningu og hefur faglegt tilraunateymi sem tryggir virkni mótefna í síðari tilraunum.