Þjónusta við greiningu á tvísértækum mótefnum

Alpha Lifetech getur boðið upp á fjölbreytta þjónustu við hreinsun tvísértækra mótefna, raðgreiningu mótefna, staðfestingu mótefna og aðrar þjónustur. Við getum veitt viðskiptavinum okkar gæðatryggðar mótefna- og endurröðunarpróteinvörur og þjónustu. Við getum búið til mótefni með mikilli virkni, sterkri sértækni og góðum stöðugleika.

Tvísértæk mótefni eru tegund erfðabreyttra mótefna, aðallega framleidd með frumusamruna eða erfðabreyttri DNA-samruna. Tvísértæk mótefni hafa tvö sértæk mótefnabindistaði, sem gerir þeim kleift að bindast sérstaklega tveimur mótefnavökum eða tveimur mismunandi mótefnavaka á sama mótefnavaka samtímis.

Kostir tvísértækra mótefna

Í samanburði við einstofna mótefni hafa tvísértæk mótefni tvö bindistaði mótefnavaka og geta samtímis bundist tveimur mismunandi sértækum mótefnavaka eða markpróteinum. Þess vegna hafa tvísértæk mótefni sterkari sértækni og geta miðað markfrumur eða sameindir með meiri nákvæmni. Tvísértæk mótefni geta gert ónæmisfrumum eins og T-frumum og NK-frumum kleift að mynda tengsl við æxlisfrumur. Með því að safna ónæmisfrumum að æxlisfrumum og virkja þær er hægt að auka drápsgetu tvísértækra mótefna gegn æxlum. Á sama tíma geta tvísértæk mótefni einnig lokað fyrir tvær mismunandi boðleiðir og þannig aukið frumudrepandi áhrif. Eftir bindingu við tvö mismunandi yfirborðsmótefnavaka á frumum getur bindingarsértækni tvísértækra mótefna aukist og tilurð aukaverkana utan markhóps getur minnkað. Því öryggi meðferðarinnar mun aukast.

Byggt á ofangreindum kostum getur meðferðaráhrif tvísértækra mótefna náð 100-1000 sinnum meiri en venjulegra mótefna. Þess vegna, þegar tvísértæk mótefni eru notuð til meðferðar, er hægt að minnka skammta verulega og þar með lækka kostnað við lyfjameðferð. Tvísértæk mótefni eru einnig samkeppnishæf hvað varðar gegndræpi vefja, skilvirkni æxlisfrumna, hraða utan markmiðs og klínískar ábendingar, og hægt er að nota þau við meðferð ýmissa sjúkdóma, svo sem æxla og sjálfsofnæmissjúkdóma. Uppbygging tvísértækra mótefna inniheldur Fc-byggð BsAbs og brotabyggð BsAbs. Þessar mismunandi gerðir tvísértækra mótefna hafa mismunandi eiginleika og kosti og hægt er að velja og hanna þau eftir sérstökum þörfum. Þess vegna er sveigjanleiki í hönnun tvísértækra mótefna einnig tiltölulega mikill.

Tæknilegir erfiðleikar

Við hönnun tvísértækra mótefnabygginga er mikilvægt að sameina á áhrifaríkan hátt tvær mismunandi mótefnagreiningarstaði og hámarka jafnframt einsleitni og afköst markmótefnisins. Í upphafi þróunarferlisins höfðu tvísértæk mótefni, sem voru framleidd með efnatengingu eða frumusamruna, „keðjuskiptavandamál“, sem þýðir að handahófskenndar samsetningar geta framleitt margar mismunandi mótefnabyggingar, sem gerir það erfitt að einangra marksamsetninguna.

Þróun tvísértækra mótefna krefst háþróaðra tæknilegra verkvanga og mismunandi tæknilegir verkvangar eru einnig ólíkir í uppbyggingu, framleiðsluferlum og lyfjaeiginleikum. Það eru nú þegar til tugir tækniverkvanga fyrir þróun tvísértækra mótefna, en þeir þurfa samt sem áður að vera stöðugt fínstilltir til að þróa verkvangstækni sem sameinar lyfjaeiginleika, hagkvæmni framleiðsluferla og sveigjanleika.

Notkun tvísértækra mótefna krefst forklínískrar mats og velja ætti viðeigandi forklínískt matslíkan. Núverandi líkan getur að einhverju leyti endurspeglað verkunarháttur og lyfjafræðileg áhrif tvísértækra mótefna, en vegna tegundamismunar er oft erfitt að umbreyta forklínískum gögnum beint í klíníska skammta, sem eykur áhættuna við klínískar rannsóknir.

Framleiðsla tvísértækra mótefna er yfirleitt lítil og hreinsunarferlið flókið, sem gerir stórfellda undirbúning erfiða. Í þróunarferli tvísértækra mótefna er nauðsynlegt að halda jafnvægi og samhæfa öryggi og virkni tveggja skotmarka, til að tryggja að tvísértæk mótefni geti drepið æxlisfrumur á áhrifaríkan hátt og dregið úr aukaverkunum í klínískum tilgangi.

Mynd 1. Skýringarmynd af sniðum og verkunarháttum bsAb sameinda.(Heimild myndar: Tengiefni mótefna og lyfja og tvísértæk mótefni sem miða á krabbamein: notkun smellefnafræði - PubMed (nih.gov))

framleiðsla tvísértækra mótefna

Hægt er að framleiða tvísértæk mótefni með efnasamtengingu, blendingsfrumum og erfðatækni. Tæknilega meginreglan byggir á erfðatækni eða frumusamrunatækni, sem sameinar genabrot úr tveimur mismunandi sértækum mótefnum til að mynda mótefnissameindir með tvísértæka bindingargetu. Þessi mótefnissameind getur samtímis bundist tveimur markmótefnavökum. Efnatengingaraðferðin tengir tvö heil IgG eða tvö F(ab')2 mótefnabrot í tvísértæk mótefni með því að nota efnatengiefni eins og ftalímíð og díþíóbensósýru. Þessi aðferð er einföld og auðveld í notkun, en hún getur skemmt bindingarstað mótefnavaka og dregið úr mótefnavirkni. Fjögurra uppspretta blendingsfrumuaðferðin getur sameinað líkamsfrumur úr tveimur mismunandi blendingsfrumulínum til að tjá samsvarandi músa-IgG.

Með erfðatækni er hægt að breyta mótefnum erfðafræðilega til að mynda tvísértæk mótefni. Tvö mismunandi einstofna mótefni voru smíðuð og Fab-brotin eða breytileg svæði þungkeðju og léttkeðju mótefnanna tveggja voru klofin sérstaklega. Með þvertengingarviðbrögðum eða keðjuendurröðunartækni voru brotin tvö sameinuð til að mynda tvísértækt mótefni. Þó að flækjustig erfðatækni sé tiltölulega mikil, er það nú algengasta aðferðin til framleiðslu á tvísértækum mótefnum til að aðlaga uppbyggingu og virkni mótefna. Við hönnun tvísértækra mótefna má nota meginregluna um krossvirkni mótefna, en krossvirkni mótefna getur valdið ósértækum viðbrögðum, þannig að það verður vandlega tekið til greina við hagnýtingu hönnunar tvísértækra mótefna.

Vinnuflæði fyrir greiningu tvísértækra mótefna

Skref	Þjónustuefni	Tímalína
Genasmíði	Myndun allt að þriggja mismunandi hönnunarkerfa raða, nýmyndun á erfðabreyttum mótefna-DNA plasmíðum	2-3 vikur
Lítil prófun	Framleiðsla tvísértækra mótefnapróteina → Lítil tjáning í spendýrafrumulínum → Staðfesting með SDS-PAGE → Bindingargreining með endurröðuðum próteinmótefnavökum með ELISA → Samanburður á klónum við foreldramótefni	5-6 vikur
Þekkja	Tjáning fyrstu tveggja tvísértækra mótefna í fullri lengd → Bindingargreining með ELISA → ELISA mat á mótefnum sem músamótefni þekkja	1 viku
Framleiðsla mótefna	Stórfelld mótefnaframleiðsla	3-4 vikur

Kostir okkar

Við bjóðum upp á alla þjónustu við mótefnaframleiðslu og -vinnslu og getum veitt tæknilega þjónustu allt frá mótefnaundirbúningi, hreinsun tvísértækra mótefna og aðskilnaði og hreinsun mótefna, raðgreiningu mótefna, staðfestingu mótefna o.s.frv., sem hægt er að nota við meðferð með tvísértækum mótefnum.

Mikil tjáning

Mikil próteinframleiðsla í CHO frumum.
Stöðug geymsla

>2 vikur í sermi við 37°C.
Engin leysnivandamál

>30 mg/ml
Stöðug frumulína

Margar stöðugar frumulínur með æxlismótefnavökum hafa verið þróaðar til að staðfesta mörg tvísértæk mótefni.