Þjónusta gegn tvísértækum mótefnum

Alpha Lifetech býður upp á sérsniðna þjónustu fyrir einstofna og fjölstofna mótefni af mismunandi tegundum, byggt á mismunandi tækni og kerfum fyrir mótefnaframleiðslu. Auk sérstillingar á mótefnum getum við einnig boðið upp á fjölbreytta þjónustu eins og framleiðslu á tvístofna mótefnum, hreinsun tvístofna mótefna, raðgreiningu mótefna og aðra þjónustu. Við getum veitt viðskiptavinum okkar gæðatryggðar mótefna- og endurröðunarpróteinvörur og þjónustu. Við getum framleitt mótefni með mikilli virkni, sterkri sértækni og góðum stöðugleika.

Inngangur að tvísértæku mótefni

Tvísértækt mótefni (BsAb) hefur tvö sértæk mótefnabindistaði sem geta samtímis bundist og þekkt tvö mismunandi mótefnavaka, eða tvö mismunandi mótefnavaka mótefnavaka. Tvísértæk mótefni geta tengt markfrumur við ónæmisfrumur til að miðla tilurð viðbragða. Tvísértæk mótefni eru framleidd með klónun mótefna með erfðatækni. Hugtakið tvísértæk mótefni var fyrst lagt til árið 1960, en vegna mikillar tæknilegrar erfiðleika var upphafleg þróun þess einnig tiltölulega hæg. En með stöðugum framförum í erfðatækni hefur þróun tvísértækra mótefna einnig tekið stigvaxandi framförum. Sem stendur eru undirbúningsaðferðir tvísértækra mótefna aðallega efnasamtenging, blendingsfrumusamruni og erfðatækni. Meðal þeirra hefur erfðatækni orðið algengasta undirbúningsaðferðin vegna mikillar skilvirkni og sveigjanleika.

Framleiðsla tvísértækra mótefna - Alpha Lifetech

Mynd 1 Margar gerðir tvísértækra mótefna

Flokkun og verkunarháttur tvísértækra mótefna

Samkvæmt mismunandi uppbyggingu þeirra eru tvísértæk mótefni skipt í tvo flokka: tvísértæk mótefni sem ekki eru IgG-lík og tvísértæk mótefni sem líkjast IgG. Meðal þeirra eru tvísértæk mótefni sem ekki eru IgG-lík, einnig þekkt sem tvísértæk mótefni án Fc-brota, sem geta bundist við mörg mótefnavakabindandi brot við sameindir án Fc-svæða og þannig forðast vandamál með keðjutengingu. Tvísértæk mótefni sem ekki eru IgG-lík hafa einnig kosti eins og litla ónæmissvörun, hraðan úthreinsunarhraða og stuttan helmingunartíma. Tvísértæk mótefni sem líkjast IgG, einnig þekkt sem tvísértæk mótefni sem innihalda Fc-brot, eru samsett úr tveimur einstofna mótefnum sem miða á mismunandi skotmörk. Þau hafa Fc-brot og geta beitt Fc-miðluðum áhrifaþáttum.

Tvísértæk mótefni eru aðallega notuð til meðferðar á æxlum, þar sem þau ráðast beint á æxlisfrumur með áhrifafrumum til að auka frumueituráhrif þeirra. Tvísértæk mótefni geta samtímis lokað fyrir tvær mismunandi boðleiðir meðan á meingerð stendur til að hafa áhrif á vöxt og fjölgun æxlisfrumna. Notkun tvívístækra mótefna getur tengt saman mismunandi gerðir ónæmisfrumna, svo sem T-frumur og æxlisfrumna, stuðlað að milliverkunum milli ónæmisfrumna og aukið ónæmissvörun.

Mismunandi aðferðir til framleiðslu á tvísértækum mótefnum

Efnatenging

Kosturinn við að nota efnafræðilega tengiaðferð við framleiðslu tvísértækra mótefna er að hún er hröð og einföld, en mótefnabindistaðurinn eyðileggst auðveldlega, sem hefur áhrif á mótefnavirknina. Á sama tíma er öryggi og krabbameinsvaldandi áhrif þverbindiefnisins sjálfs einnig óljós. Tengiefni eins og ftalímíð, N-súksínýl-3-(2-pýridín dísúlfíð) própíónat og díþíóasýlbensósýra eru notuð til að tengja tvö óskemmd IgG mótefnabrot eða tvö F(ab')2 mótefnabrot í tvísértækt mótefni.

Hybridoma tækni

Kosturinn við að nota blendingsfrumusamrunaaðferð til að búa til tvísértæk mótefni er að tvísértæku mótefnin sem framleidd eru með þessari aðferð hafa góða líffræðilega virkni, stöðuga mótefnabyggingu, en lága mótefnaafköst og erfitt skimunarferli. Fyrst eru tvær stakar sértækar blendingsfrumur framleiddar og síðan eru þær sameinuð í tvöfaldar blendingsfrumur með frumusamrunatækni. Tvær þungar keðjusameindir og tvær léttar keðjusameindir eru myndaðar, sem hægt er að para af handahófi til að framleiða BsAb.

Erfðatækni

Kosturinn við að nota erfðatækni til að búa til tvísértæk mótefni liggur í mikilli skilvirkni, sveigjanleika og stjórnanleika. Með erfðatækni er hægt að hanna nákvæmlega uppbyggingu og virkni mótefna og síðan klóna þau. Algengar tæknilegar aðferðir eru meðal annars endurröðun gena, genaútsláttur, genainnsetning o.s.frv. Eftir breytingu geta mótefni myndað tvísértæk mótefni með nauðsynlegum virkni.

Aðrar aðferðir

Að auki eru til aðrar aðferðir til að búa til tvísértæk mótefni. Tvö Fab-brot úr einu sértæku mótefni er hægt að sameina með þvertengingarviðbrögðum til að mynda blendings-immunóglóbúlín. Með keðjuendurröðunartækni er hægt að sameina tvö VHH-brot til að mynda tvíþátta mótefni með breytilegu svæði. Sameind sem myndast með því að tengja saman breytilegt svæði þungkeðjunnar og breytilegt svæði léttkeðjunnar úr tveimur mismunandi sértækum mótefnum getur bundist tveimur mótefnavökum samtímis í formi tvíliðu.

Vinnuflæði fyrir tvísértæk mótefni

Skref	Þjónustuefni	Tímalína
Genasmíði	Myndun allt að þriggja mismunandi hönnunarkerfa raða, nýmyndun á erfðabreyttum mótefna-DNA plasmíðum	2-3 vikur
Lítil prófun	Framleiðsla tvísértækra mótefnapróteina → Lítil tjáning í spendýrafrumulínum → Staðfesting með SDS-PAGE → Bindingargreining með endurröðuðum próteinmótefnavökum með ELISA → Samanburður á klónum við foreldramótefni	5-6 vikur
Þekkja	Tjáning fyrstu tveggja tvísértækra mótefna í fullri lengd → Bindingargreining með ELISA → ELISA mat á mótefnum sem músamótefni þekkja	1 viku
Framleiðsla mótefna	Stórfelld mótefnaframleiðsla	3-4 vikur

Kostir okkar

Við bjóðum upp á alla þjónustu við mótefnaframleiðslu og -vinnslu og getum veitt tæknilega þjónustu allt frá mótefnaundirbúningi, hreinsun tvísértækra mótefna og aðskilnaði og hreinsun mótefna, raðgreiningu mótefna, staðfestingu mótefna o.s.frv., sem hægt er að nota við meðferð með tvísértækum mótefnum.

Mikil tjáning

Mikil próteinframleiðsla í CHO frumum.
Stöðug geymsla

>2 vikur í sermi við 37°C.
Engin leysnivandamál

>30 mg/ml
Stöðug frumulína

Margar stöðugar frumulínur með æxlismótefnavökum hafa verið þróaðar til að staðfesta mörg tvísértæk mótefni.